2021年第32卷第12期文章目次
2021, 32(12):1737-1744.
摘要:
目的从代谢组学及肠道菌群角度探讨葛根芩连汤干预胰岛素抵抗（IR）大鼠肠道代谢紊乱的作用机 制。方法将雄性SD 大鼠随机分成正常组、模型组及葛根芩连汤低、中、高剂量（1.65、4.96、14.86 g·kg-1）组。 采用高脂饲料喂养12 周建立IR 大鼠模型；模型复制成功后，连续灌胃给药16 周，每天1 次，同时继续以高 脂饲料喂养。给药结束后，采用超高效液相色谱-串联四级杆-飞行时间质谱（UHPLC/Q-TOF-MS）结合多元分 析的代谢组学技术对大鼠的粪便样品进行代谢轮廓分析，分析各组大鼠粪便内源性代谢物的变化，鉴定潜在 的生物标记物并进行生物学意义分析。对粪便样品进行16S rRNA V3~V4 区域测序，通过两部分模型（Twopart model）对生物标记物与肠道菌群进行关联性分析。结果筛选和鉴定出5 个潜在生物标记物：咪唑丙酸、 吲哚丙烯酸、二十碳四烯酸、二十四碳六烯酸及十二烷二酸；与模型组比较，葛根芩连汤低剂量组的十二烷 二酸含量明显增加（P＜0.05），二十四碳六烯酸含量明显减少（P＜0.05）。肠道菌群关联分析结果显示，二十碳 四烯酸和十二烷二酸共关联到5 个肠道菌群操作分类单元（OTU），涉及到的肠道菌群为厚壁菌门和拟杆菌门， 其中厚壁菌门消化链球菌科Romboutsia 属为二者所共有，其余OTU 为十二烷二酸特有；另外3 个生物标记物 未关联到相关肠道菌群。结论葛根芩连汤对高脂诱导的IR 大鼠的预防作用可能与其改善肠道中内源性代谢 物及相关肠道菌群的水平，恢复体内正常代谢活动有关。
目的从代谢组学及肠道菌群角度探讨葛根芩连汤干预胰岛素抵抗（IR）大鼠肠道代谢紊乱的作用机 制。方法将雄性SD 大鼠随机分成正常组、模型组及葛根芩连汤低、中、高剂量（1.65、4.96、14.86 g·kg-1）组。 采用高脂饲料喂养12 周建立IR 大鼠模型；模型复制成功后，连续灌胃给药16 周，每天1 次，同时继续以高 脂饲料喂养。给药结束后，采用超高效液相色谱-串联四级杆-飞行时间质谱（UHPLC/Q-TOF-MS）结合多元分 析的代谢组学技术对大鼠的粪便样品进行代谢轮廓分析，分析各组大鼠粪便内源性代谢物的变化，鉴定潜在 的生物标记物并进行生物学意义分析。对粪便样品进行16S rRNA V3~V4 区域测序，通过两部分模型（Twopart model）对生物标记物与肠道菌群进行关联性分析。结果筛选和鉴定出5 个潜在生物标记物：咪唑丙酸、 吲哚丙烯酸、二十碳四烯酸、二十四碳六烯酸及十二烷二酸；与模型组比较，葛根芩连汤低剂量组的十二烷 二酸含量明显增加（P＜0.05），二十四碳六烯酸含量明显减少（P＜0.05）。肠道菌群关联分析结果显示，二十碳 四烯酸和十二烷二酸共关联到5 个肠道菌群操作分类单元（OTU），涉及到的肠道菌群为厚壁菌门和拟杆菌门， 其中厚壁菌门消化链球菌科Romboutsia 属为二者所共有，其余OTU 为十二烷二酸特有；另外3 个生物标记物 未关联到相关肠道菌群。结论葛根芩连汤对高脂诱导的IR 大鼠的预防作用可能与其改善肠道中内源性代谢 物及相关肠道菌群的水平，恢复体内正常代谢活动有关。
2021, 32(12):1745-1751.
摘要:
目的探讨健脾化瘀方（JHD）通过外泌体对肝癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化（EMT）的影响。方法 利用转化生长因子β1（TGF-β1）刺激MHCC97H 细胞，构建肝癌细胞EMT 模型。根据处理条件，将细胞分为 4 组，①对照组：不进行干预；②模型组：TGF-β1（10 ng·mL-1）；③JHD 低浓度组：TGF-β1（10 ng·mL-1）+健 脾化瘀方（2 mg·mL-1）；④JHD 高浓度组：TGF-β1（10 ng·mL-1）+健脾化瘀方（4 mg·mL-1）。干预48 h 后，采用 超速离心法提取各组细胞培养上清液的外泌体，通过透射电镜（TEM）、纳米颗粒追踪分析（NTA）、Western Blot 法检测外泌体标志蛋白（CD63、CD81、HsP70、CD9），以及外泌体内吞实验对外泌体进行鉴定。将提取的 4 组外泌体分别与MHCC97H 细胞共培养24 h/48 h 后，分离MHCC97H 细胞，进行划细胞划痕实验、Transwell 细胞侵袭实验及Western Blot 法检测EMT 相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）。结果透射电镜下观 察到外泌体的形态呈囊泡状，分布不一，有单个分布，也有聚集成组，背景清晰，无明显污染物，各组外泌体 形态相近，无明显差异，直径在30~140 nm 之间；纳米颗粒追踪分析仪检测到4 组外泌体粒径的峰值在130~ 150 nm 之间，与电镜观察结果基本一致；各组均可检测到外泌体标志蛋白CD63、CD81、HsP70、CD9 表达。 被PKH26 标记的外泌体可被MHCC97H 细胞重新吸收内化。与对照组比较，模型组的MHCC97H 细胞迁移能 力（24、48 h）及侵袭能力均显著增强（P＜0.01）， E-cadherin 蛋白表达显著下调（P＜0.01）， Vimentin、 N-cadherin 蛋白表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，JHD 高、低浓度组的MHCC97H 细胞迁移能力（24、 48 h）及侵袭能力显著减弱（P＜0.01），E-cadherin 蛋白表达显著上调（P＜0.01），Vimentin、N-cadherin 蛋白表 达显著下调（P＜0.01）。结论健脾化瘀方体外可通过外泌体抑制MHCC97H 细胞的迁移、侵袭及上皮间质 转化。
目的探讨健脾化瘀方（JHD）通过外泌体对肝癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化（EMT）的影响。方法 利用转化生长因子β1（TGF-β1）刺激MHCC97H 细胞，构建肝癌细胞EMT 模型。根据处理条件，将细胞分为 4 组，①对照组：不进行干预；②模型组：TGF-β1（10 ng·mL-1）；③JHD 低浓度组：TGF-β1（10 ng·mL-1）+健 脾化瘀方（2 mg·mL-1）；④JHD 高浓度组：TGF-β1（10 ng·mL-1）+健脾化瘀方（4 mg·mL-1）。干预48 h 后，采用 超速离心法提取各组细胞培养上清液的外泌体，通过透射电镜（TEM）、纳米颗粒追踪分析（NTA）、Western Blot 法检测外泌体标志蛋白（CD63、CD81、HsP70、CD9），以及外泌体内吞实验对外泌体进行鉴定。将提取的 4 组外泌体分别与MHCC97H 细胞共培养24 h/48 h 后，分离MHCC97H 细胞，进行划细胞划痕实验、Transwell 细胞侵袭实验及Western Blot 法检测EMT 相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）。结果透射电镜下观 察到外泌体的形态呈囊泡状，分布不一，有单个分布，也有聚集成组，背景清晰，无明显污染物，各组外泌体 形态相近，无明显差异，直径在30~140 nm 之间；纳米颗粒追踪分析仪检测到4 组外泌体粒径的峰值在130~ 150 nm 之间，与电镜观察结果基本一致；各组均可检测到外泌体标志蛋白CD63、CD81、HsP70、CD9 表达。 被PKH26 标记的外泌体可被MHCC97H 细胞重新吸收内化。与对照组比较，模型组的MHCC97H 细胞迁移能 力（24、48 h）及侵袭能力均显著增强（P＜0.01）， E-cadherin 蛋白表达显著下调（P＜0.01）， Vimentin、 N-cadherin 蛋白表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，JHD 高、低浓度组的MHCC97H 细胞迁移能力（24、 48 h）及侵袭能力显著减弱（P＜0.01），E-cadherin 蛋白表达显著上调（P＜0.01），Vimentin、N-cadherin 蛋白表 达显著下调（P＜0.01）。结论健脾化瘀方体外可通过外泌体抑制MHCC97H 细胞的迁移、侵袭及上皮间质 转化。
2021, 32(12):1752-1756.
摘要:
目的探讨槐米提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠运动能力的影响及相关机制。方法采用小鼠颈背 部皮下注射D-半乳糖（500 mg·kg-1）建立衰老小鼠模型，每日1 次，连续9 周。将48 只小鼠随机分为6 组：空 白组、模型组、维生素C 组（200 mg·kg-1）和槐米提取物低、中、高剂量组（100、200、400 mg·kg-1），造模第 5 周开始，同时灌胃相应药物（10 mL·kg-1），每日1 次，连续4 周。观察小鼠的行为变化并定时记录小鼠体质 量；通过行为学疲劳实验和负重游泳实验考察小鼠的运动能力；测定小鼠胸腺、脾脏及脑组织的脏器指数；检 测血清及脑组织中的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量； 采用HE 染色法观察小鼠脑组织病理变化。结果与空白组比较，模型组小鼠的在棒时间及游泳时间显著缩短 （P＜0.01）；小鼠胸腺、脾脏及脑指数明显降低（P＜0.05，P＜0.01）；小鼠血清及脑组织中MDA 含量明显增高 （P＜0.05，P＜0.01），T-SOD、GSH-Px 活性明显降低（P＜0.05，P＜0.01）。与模型组比较，槐米提取物中剂 量组小鼠的在棒时间和游泳时间明显延长（P＜0.05），小鼠胸腺指数明显升高（P＜0.05）；槐米提取物中、低剂 量组小鼠的血清T-SOD、GSH-Px 活性显著升高（P＜0.01），脑组织中T-SOD 活性显著升高（P＜0.01），血清及 脑组织中的MDA 含量显著降低（P＜0.01）。结论槐米提取物可提高衰老模型小鼠的运动能力，其作用机制可 能与提高机体内抗氧化酶活性、降低脂质过氧化有关。
目的探讨槐米提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠运动能力的影响及相关机制。方法采用小鼠颈背 部皮下注射D-半乳糖（500 mg·kg-1）建立衰老小鼠模型，每日1 次，连续9 周。将48 只小鼠随机分为6 组：空 白组、模型组、维生素C 组（200 mg·kg-1）和槐米提取物低、中、高剂量组（100、200、400 mg·kg-1），造模第 5 周开始，同时灌胃相应药物（10 mL·kg-1），每日1 次，连续4 周。观察小鼠的行为变化并定时记录小鼠体质 量；通过行为学疲劳实验和负重游泳实验考察小鼠的运动能力；测定小鼠胸腺、脾脏及脑组织的脏器指数；检 测血清及脑组织中的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量； 采用HE 染色法观察小鼠脑组织病理变化。结果与空白组比较，模型组小鼠的在棒时间及游泳时间显著缩短 （P＜0.01）；小鼠胸腺、脾脏及脑指数明显降低（P＜0.05，P＜0.01）；小鼠血清及脑组织中MDA 含量明显增高 （P＜0.05，P＜0.01），T-SOD、GSH-Px 活性明显降低（P＜0.05，P＜0.01）。与模型组比较，槐米提取物中剂 量组小鼠的在棒时间和游泳时间明显延长（P＜0.05），小鼠胸腺指数明显升高（P＜0.05）；槐米提取物中、低剂 量组小鼠的血清T-SOD、GSH-Px 活性显著升高（P＜0.01），脑组织中T-SOD 活性显著升高（P＜0.01），血清及 脑组织中的MDA 含量显著降低（P＜0.01）。结论槐米提取物可提高衰老模型小鼠的运动能力，其作用机制可 能与提高机体内抗氧化酶活性、降低脂质过氧化有关。
2021, 32(12):1757-1761.
摘要:
目的探讨半夏生物总碱对运动氧化应激大鼠胃黏膜的保护作用及机制。方法将32 只SD 大鼠随机 分为空白组、模型组、半夏生物总碱组（20 mg·kg-1）和阳性对照组（奥美拉唑，10 mg·kg-1），每组8 只。灌胃给 药，每日1 次，连续7 d。第7 天灌胃给药1 h 后，进行一次性负重力竭游泳运动造模。麻醉后处死所有大 鼠，计算胃溃疡指数（UI），采用HE 染色法观察胃黏膜组织病理形态；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清 一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等氧化应激指标水 平，以及胃黏膜组织胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）含量。结果与空白组比较，模型组大鼠的UI 值与胃黏膜 组织GAS、MTL 含量，以及血清NO、MDA 含量均显著升高（P＜0.01），血清SOD、GSH-Px 水平显著降低 （P＜0.01）。与模型组比较，半夏生物总碱组大鼠的UI 值与胃黏膜组织GAS、MTL 含量，以及血清NO、MDA 含量均显著降低（P＜0.01），血清SOD、GSH-Px 水平显著升高（P＜0.01）。结论半夏生物总碱具有抗氧化作 用，能纠正运动应激导致的胃黏膜组织GAS、MTL 分泌异常状态，逆转运动氧化应激对胃黏膜的损伤，减少 胃溃疡的发生。
目的探讨半夏生物总碱对运动氧化应激大鼠胃黏膜的保护作用及机制。方法将32 只SD 大鼠随机 分为空白组、模型组、半夏生物总碱组（20 mg·kg-1）和阳性对照组（奥美拉唑，10 mg·kg-1），每组8 只。灌胃给 药，每日1 次，连续7 d。第7 天灌胃给药1 h 后，进行一次性负重力竭游泳运动造模。麻醉后处死所有大 鼠，计算胃溃疡指数（UI），采用HE 染色法观察胃黏膜组织病理形态；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清 一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等氧化应激指标水 平，以及胃黏膜组织胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）含量。结果与空白组比较，模型组大鼠的UI 值与胃黏膜 组织GAS、MTL 含量，以及血清NO、MDA 含量均显著升高（P＜0.01），血清SOD、GSH-Px 水平显著降低 （P＜0.01）。与模型组比较，半夏生物总碱组大鼠的UI 值与胃黏膜组织GAS、MTL 含量，以及血清NO、MDA 含量均显著降低（P＜0.01），血清SOD、GSH-Px 水平显著升高（P＜0.01）。结论半夏生物总碱具有抗氧化作 用，能纠正运动应激导致的胃黏膜组织GAS、MTL 分泌异常状态，逆转运动氧化应激对胃黏膜的损伤，减少 胃溃疡的发生。
2021, 32(12):1762-1768.
摘要:
目的探究苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2 心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法（1）体外 培养大鼠H9c2 心肌细胞，采用MTT 法评价不同浓度的异丙肾上腺素（0.625、1.25、2.5、5、10 μmol·L-1）和不 同浓度的苦瓜皂苷L（1.625、3.125、6.25、12.5、25.0 μg·mL-1）对心肌细胞活力的影响。（2） 采用异丙肾上腺素 诱导心肌细胞肥大模型。实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L 干预组和苦瓜皂苷L 单独组。分别通过细胞 拍照结合ImageJ 软件测量、荧光定量PCR 法考察苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞表 面积和心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC 及α-SKA 表达的影响。在此基础上，选择参与甘油磷脂代谢的 酶VI 组磷脂酶A2（PLA2G6）、二酰甘油激酶ζ（DGKZ）、甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶1（GPCPD1）为指标，评价苦 瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞上述3 种酶基因表达的影响；进一步以PLA2G6 和DGKZ 蛋白为指 标，采用Western Blot 法考察苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达的影 响。结果（1）与正常组比较，异丙肾上腺素（0.625~10 μmol·L-1）和苦瓜皂苷L（1.625~25 μg·mL-1）对心肌细胞 活力没有明显影响（P＞0.05）。本研究选用异丙肾上腺素10 μmol·L-1 和苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 进行实验。 （2）与正常组比较，模型组心肌细胞表面积增加（P＜0.05），心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA 表 达上调（P＜0.05），PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达上调（P＜0.05），PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达增加 （P＜0.05）；与模型组比较，苦瓜皂苷L 干预组能够降低心肌细胞表面积（P＜0.05），下调心肌肥大相关胚胎基 因ANP、β-MHC、α-SKA 表达（P＜0.05）， 下调PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达（P＜0.05）， 降低 PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达（P＜0.05）。结论苦瓜皂苷L 可缓解异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大，可能与 其抑制甘油磷脂代谢酶PLA2G6 和DGKZ 的表达有关。
目的探究苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2 心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法（1）体外 培养大鼠H9c2 心肌细胞，采用MTT 法评价不同浓度的异丙肾上腺素（0.625、1.25、2.5、5、10 μmol·L-1）和不 同浓度的苦瓜皂苷L（1.625、3.125、6.25、12.5、25.0 μg·mL-1）对心肌细胞活力的影响。（2） 采用异丙肾上腺素 诱导心肌细胞肥大模型。实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L 干预组和苦瓜皂苷L 单独组。分别通过细胞 拍照结合ImageJ 软件测量、荧光定量PCR 法考察苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞表 面积和心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC 及α-SKA 表达的影响。在此基础上，选择参与甘油磷脂代谢的 酶VI 组磷脂酶A2（PLA2G6）、二酰甘油激酶ζ（DGKZ）、甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶1（GPCPD1）为指标，评价苦 瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞上述3 种酶基因表达的影响；进一步以PLA2G6 和DGKZ 蛋白为指 标，采用Western Blot 法考察苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达的影 响。结果（1）与正常组比较，异丙肾上腺素（0.625~10 μmol·L-1）和苦瓜皂苷L（1.625~25 μg·mL-1）对心肌细胞 活力没有明显影响（P＞0.05）。本研究选用异丙肾上腺素10 μmol·L-1 和苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 进行实验。 （2）与正常组比较，模型组心肌细胞表面积增加（P＜0.05），心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA 表 达上调（P＜0.05），PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达上调（P＜0.05），PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达增加 （P＜0.05）；与模型组比较，苦瓜皂苷L 干预组能够降低心肌细胞表面积（P＜0.05），下调心肌肥大相关胚胎基 因ANP、β-MHC、α-SKA 表达（P＜0.05）， 下调PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达（P＜0.05）， 降低 PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达（P＜0.05）。结论苦瓜皂苷L 可缓解异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大，可能与 其抑制甘油磷脂代谢酶PLA2G6 和DGKZ 的表达有关。
2021, 32(12):1769-1775.
摘要:
目的探讨五指毛桃（Fici Hirtae Radix，FHR）醇提取物对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及其机制。 方法将60 只小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组及五指毛桃醇提取物高、中、低剂量组。除对照组 给予生理盐水灌胃外，其余各组小鼠以梯度酒精灌胃法复制酒精性肝损伤模型。复制模型同时，阳性对照组灌 胃给予50 mg·kg-1 水飞蓟素，五指毛桃醇提取物组分别灌胃给予2、1、0.5 g·kg-1 五指毛桃醇提取物进行干 预，对照组、模型组灌胃给予等体积生理盐水，连续6 周。复制模型成功后取材，HE 染色法观察肝组织病理 变化；比色法测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平，肝组织内丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘 肽（GSH）含量，超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性；并采用蛋白质印迹法测定核因 子E2 相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）、超氧化物歧化酶1（SOD-1）和细胞色素P450 2E1（CYP 2E1） 的蛋白表达水平。结果与对照组比较，模型组小鼠肝细胞肿胀，排列散乱，中央静脉周围小变性明显，呈现 肝细胞灶状坏死；血清中ALT 和AST 水平明显升高（P＜0.01）；肝组织中MDA 含量明显升高（P＜0.01），SOD 活性明显降低（P＜0.01），GSH 含量和GSH-Px 活性明显降低（P＜0.01）； Nrf2、HO-1 及SOD-1 蛋白水平明显 降低（P＜0.05），CYP2E1 蛋白水平明显升高（P＜0.05）。与模型组比较，五指毛桃醇提取物各剂量组肝脏炎性 细胞浸润减少，肝脏组织坏死减轻；五指毛桃醇提取物高、中剂量组明显降低ALT、AST 水平（P＜0.05）；五 指毛桃醇提取物高、中剂量组明显降低MDA 水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物低剂量组明显升高GSH 含量 （P＜0.05），五指毛桃醇提取物各剂量组均明显升高SOD 水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物高、低剂量组明 显升高GSH-Px 活性（P＜0.05）；五指毛桃醇提取物高剂量组明显上调Nrf2 蛋白表达水平（P＜0.05），五指毛桃 醇提取物高、低剂量组明显上调HO-1 蛋白表达水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物高、中剂量组明显上调 SOD-1 蛋白表达水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物中、低剂量组明显下调CYP2E1 蛋白表达水平（P＜0.05）。 结论五指毛桃醇提取物对酒精性肝损伤小鼠具有保护作用，其机制可能是通过激活Nrf2，诱导调控下游抗氧 化因子或抗氧化系统，并抑制CYP2E1 异常活化，减轻氧化应激反应，从而降低酒精对肝脏的损伤。
目的探讨五指毛桃（Fici Hirtae Radix，FHR）醇提取物对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及其机制。 方法将60 只小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组及五指毛桃醇提取物高、中、低剂量组。除对照组 给予生理盐水灌胃外，其余各组小鼠以梯度酒精灌胃法复制酒精性肝损伤模型。复制模型同时，阳性对照组灌 胃给予50 mg·kg-1 水飞蓟素，五指毛桃醇提取物组分别灌胃给予2、1、0.5 g·kg-1 五指毛桃醇提取物进行干 预，对照组、模型组灌胃给予等体积生理盐水，连续6 周。复制模型成功后取材，HE 染色法观察肝组织病理 变化；比色法测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平，肝组织内丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘 肽（GSH）含量，超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性；并采用蛋白质印迹法测定核因 子E2 相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）、超氧化物歧化酶1（SOD-1）和细胞色素P450 2E1（CYP 2E1） 的蛋白表达水平。结果与对照组比较，模型组小鼠肝细胞肿胀，排列散乱，中央静脉周围小变性明显，呈现 肝细胞灶状坏死；血清中ALT 和AST 水平明显升高（P＜0.01）；肝组织中MDA 含量明显升高（P＜0.01），SOD 活性明显降低（P＜0.01），GSH 含量和GSH-Px 活性明显降低（P＜0.01）； Nrf2、HO-1 及SOD-1 蛋白水平明显 降低（P＜0.05），CYP2E1 蛋白水平明显升高（P＜0.05）。与模型组比较，五指毛桃醇提取物各剂量组肝脏炎性 细胞浸润减少，肝脏组织坏死减轻；五指毛桃醇提取物高、中剂量组明显降低ALT、AST 水平（P＜0.05）；五 指毛桃醇提取物高、中剂量组明显降低MDA 水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物低剂量组明显升高GSH 含量 （P＜0.05），五指毛桃醇提取物各剂量组均明显升高SOD 水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物高、低剂量组明 显升高GSH-Px 活性（P＜0.05）；五指毛桃醇提取物高剂量组明显上调Nrf2 蛋白表达水平（P＜0.05），五指毛桃 醇提取物高、低剂量组明显上调HO-1 蛋白表达水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物高、中剂量组明显上调 SOD-1 蛋白表达水平（P＜0.05），五指毛桃醇提取物中、低剂量组明显下调CYP2E1 蛋白表达水平（P＜0.05）。 结论五指毛桃醇提取物对酒精性肝损伤小鼠具有保护作用，其机制可能是通过激活Nrf2，诱导调控下游抗氧 化因子或抗氧化系统，并抑制CYP2E1 异常活化，减轻氧化应激反应，从而降低酒精对肝脏的损伤。
2021, 32(12):1776-1784.
摘要:
目的探讨藁本内酯对阿霉素所致心肌损伤的作用及机制。方法采用MTT 法检测藁本内酯对阿霉素 诱导的大鼠心肌细胞H9c2 细胞存活率的影响。通过流式细胞术分析藁本内酯对阿霉素诱导的活性氧（ROS）水 平及H9c2 细胞焦亡的影响。采用免疫印迹法检测H9c2 细胞NLRP3、Caspase-1 蛋白表达情况。通过加入过氧 化氢，探究藁本内酯对阿霉素所致H9c2 细胞焦亡是否由ROS 所介导。将小鼠随机分成4 组，每组5 只，即正 常组、藁本内酯组、模型组（阿霉素）、治疗组（阿霉素+藁本内酯）。以阿霉素（5 mg·kg-1）腹腔注射，每周1 次， 共注射3 周，累积量为15 mg·kg-1。3 周后，以藁本内酯（20 mg·kg-1）腹腔注射，每天1 次，连续给药3 周。记 录心脏质量与体质量比值及心脏超声检查，结合HE 和Masson 染色观测心脏病理变化，探究藁本内酯对阿霉 素小鼠心脏功能和心肌损伤的影响。采用免疫印迹法检测藁本内酯对阿霉素小鼠心肌NLRP3、Caspase-1 蛋白 表达的影响情况。结果与正常组比较，模型组H9c2 细胞存活率明显降低（P＜0.05）；细胞内ROS 含量、 NLRP3 蛋白表达、Caspase-1 水解切割和Caspase-1/7-AAD 双阳性心肌细胞率明显升高（P＜0.05）。与模型组 比较，治疗组细胞存活率增加（P＜0.05）；细胞内ROS 含量、NLRP3 蛋白表达、Caspase-1 水解切割和 Caspase-1/7-AAD 双阳性心肌细胞率减少（P＜0.05）。而藁本内酯对Caspase-1/7-AAD 双阳性心肌细胞率的作 用可被过氧化氢所拮抗（P＜0.05）。与正常组比较，模型组小鼠心肌纤维排列紊乱，心肌纤维化明显；左心室 收缩末期内径和左心室舒张末期内径明显增大（P＜0.05），心脏射血分数和短轴缩短率、心脏质量与体质量比 值明显减少（P＜0.05）；心肌组织NLRP3 蛋白表达和Caspase-1 水解切割明显增多（P＜0.05）。与模型组比较， 治疗组小鼠心功能和心肌损伤检测指标均得到有效改善（P＜0.05）；心肌组织NLRP3 蛋白表达、Caspase-1 水 解切割明显减少（P＜0.05）。结论藁本内酯可改善阿霉素所致心肌细胞损伤。
目的探讨藁本内酯对阿霉素所致心肌损伤的作用及机制。方法采用MTT 法检测藁本内酯对阿霉素 诱导的大鼠心肌细胞H9c2 细胞存活率的影响。通过流式细胞术分析藁本内酯对阿霉素诱导的活性氧（ROS）水 平及H9c2 细胞焦亡的影响。采用免疫印迹法检测H9c2 细胞NLRP3、Caspase-1 蛋白表达情况。通过加入过氧 化氢，探究藁本内酯对阿霉素所致H9c2 细胞焦亡是否由ROS 所介导。将小鼠随机分成4 组，每组5 只，即正 常组、藁本内酯组、模型组（阿霉素）、治疗组（阿霉素+藁本内酯）。以阿霉素（5 mg·kg-1）腹腔注射，每周1 次， 共注射3 周，累积量为15 mg·kg-1。3 周后，以藁本内酯（20 mg·kg-1）腹腔注射，每天1 次，连续给药3 周。记 录心脏质量与体质量比值及心脏超声检查，结合HE 和Masson 染色观测心脏病理变化，探究藁本内酯对阿霉 素小鼠心脏功能和心肌损伤的影响。采用免疫印迹法检测藁本内酯对阿霉素小鼠心肌NLRP3、Caspase-1 蛋白 表达的影响情况。结果与正常组比较，模型组H9c2 细胞存活率明显降低（P＜0.05）；细胞内ROS 含量、 NLRP3 蛋白表达、Caspase-1 水解切割和Caspase-1/7-AAD 双阳性心肌细胞率明显升高（P＜0.05）。与模型组 比较，治疗组细胞存活率增加（P＜0.05）；细胞内ROS 含量、NLRP3 蛋白表达、Caspase-1 水解切割和 Caspase-1/7-AAD 双阳性心肌细胞率减少（P＜0.05）。而藁本内酯对Caspase-1/7-AAD 双阳性心肌细胞率的作 用可被过氧化氢所拮抗（P＜0.05）。与正常组比较，模型组小鼠心肌纤维排列紊乱，心肌纤维化明显；左心室 收缩末期内径和左心室舒张末期内径明显增大（P＜0.05），心脏射血分数和短轴缩短率、心脏质量与体质量比 值明显减少（P＜0.05）；心肌组织NLRP3 蛋白表达和Caspase-1 水解切割明显增多（P＜0.05）。与模型组比较， 治疗组小鼠心功能和心肌损伤检测指标均得到有效改善（P＜0.05）；心肌组织NLRP3 蛋白表达、Caspase-1 水 解切割明显减少（P＜0.05）。结论藁本内酯可改善阿霉素所致心肌细胞损伤。
2021, 32(12):1785-1796.
摘要:
目的基于网络药理学并辅以初步生物学验证探讨乌梅含漱液治疗尿毒症口干症的分子机制。方法 通过网络药理学分析从乌梅含漱液中筛选出124 个活性成分，利用Genecards、OMIM、Disgenet、TTD、 DrugBank 等数据库检索尿毒症口干症的疾病靶点预测。采用Cytoscape 3.8.0 软件构建“药物活性成分-治疗尿 毒症口干症潜在靶点”网络，将活性成分与预测疾病靶点的二者进行分子对接验证，借助R 3.6.3 软件的 ggplot2 包及clusterProfiler 将关键靶点进行GO 和KEGG 富集分析。最后以硫酸阿托品诱导5/6 肾切除大鼠制备 尿毒症口干症大鼠模型为研究材料，采用低、高不同剂量乌梅含漱液干预，从大鼠唾液分泌、唾液腺病理组织 学以及关键靶标蛋白表达等多种指标，进行多个层面的验证性实验，验证前期计算机模拟结果的可靠性。 结果计算机模拟实验预测结果表明，124 个活性药效分子作用于46 个关键靶点，其中核心靶点为EGFR、 ESR1、TP53、MCM2、NTRK1、XPO1、FN1、CDK2、CUL3、APP，分子对接结果发现活性成分与ESR1、 CDK2 结合性能良好。靶标主要作用涉及炎症反应、氧化应激反应、受体活性及生物化学过程调控等多种生物 过程，参与炎症、氧化应激、细胞凋亡、信号转导及其他等20 条信号通路。生物学验证实验结果表明，经乌 梅含漱液的干预后，明显增加了尿毒症口干症大鼠的平均唾液流量，减轻了颌下腺组织受损程度，且增加了分 子对接筛选的靶标ESR1 蛋白的表达量。结论乌梅含漱液的药效分子可能作用于ESR1 核心靶标，通过调节 PI3K/Akt 等多条信号通路发挥药效，为进一步开展乌梅含漱液治疗尿毒症口干症作用机制的研究提供了新思路 和新方法。
目的基于网络药理学并辅以初步生物学验证探讨乌梅含漱液治疗尿毒症口干症的分子机制。方法 通过网络药理学分析从乌梅含漱液中筛选出124 个活性成分，利用Genecards、OMIM、Disgenet、TTD、 DrugBank 等数据库检索尿毒症口干症的疾病靶点预测。采用Cytoscape 3.8.0 软件构建“药物活性成分-治疗尿 毒症口干症潜在靶点”网络，将活性成分与预测疾病靶点的二者进行分子对接验证，借助R 3.6.3 软件的 ggplot2 包及clusterProfiler 将关键靶点进行GO 和KEGG 富集分析。最后以硫酸阿托品诱导5/6 肾切除大鼠制备 尿毒症口干症大鼠模型为研究材料，采用低、高不同剂量乌梅含漱液干预，从大鼠唾液分泌、唾液腺病理组织 学以及关键靶标蛋白表达等多种指标，进行多个层面的验证性实验，验证前期计算机模拟结果的可靠性。 结果计算机模拟实验预测结果表明，124 个活性药效分子作用于46 个关键靶点，其中核心靶点为EGFR、 ESR1、TP53、MCM2、NTRK1、XPO1、FN1、CDK2、CUL3、APP，分子对接结果发现活性成分与ESR1、 CDK2 结合性能良好。靶标主要作用涉及炎症反应、氧化应激反应、受体活性及生物化学过程调控等多种生物 过程，参与炎症、氧化应激、细胞凋亡、信号转导及其他等20 条信号通路。生物学验证实验结果表明，经乌 梅含漱液的干预后，明显增加了尿毒症口干症大鼠的平均唾液流量，减轻了颌下腺组织受损程度，且增加了分 子对接筛选的靶标ESR1 蛋白的表达量。结论乌梅含漱液的药效分子可能作用于ESR1 核心靶标，通过调节 PI3K/Akt 等多条信号通路发挥药效，为进一步开展乌梅含漱液治疗尿毒症口干症作用机制的研究提供了新思路 和新方法。
2021, 32(12):1797-1806.
摘要:
目的利用网络药理学和分子对接技术预测补气消脂方治疗非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）的主要活性成分和目标基因靶点，并探讨其潜在的作用机制。方法通过检索中药系统 药理技术平台（TCMSP）、OMIM、GeneCards 等数据库，查找补气消脂方活性成分、作用靶点以及NAFLD 相关 靶点，以OB≥30%和DL≥0.18 为标准筛选活性成分，并查阅文献补充文献报道中常见的中药活性成分，汇总 得到活性成分库，并利用STRING 数据库平台分析各靶点之间的相互作用，构建蛋白互作网络。利用 Cytoscape 3.7.2 软件进行“活性成分-疾病靶点”网络分析，在此基础上采用R 4.0.3（依托于“clusterProfiler” “org.Hs.eg.db”以及“pathview”程序包）进行GO 与KEGG 基因功能富集分析。筛选出补气消脂方关键活性成 分和靶基因后，利用Autodock-vina 软件进行分子对接，选择蛋白互作网络中度值排名前6 位的重要的靶点进 行分子对接，验证结合活性。结果通过筛选发现了补气消脂方中共有98 种活性成分和229 种相应靶点， NAFLD 靶点1 283 个。最终筛选获得103 个关键靶点和30 个重要的信号通路，如癌症通路、AGE-RAGE 信 号通路、TNF 信号通路、HIF-1 信号通路等。补气消脂方治疗NAFLD 的主要成分为槲皮素、木犀草素、丹 参酮ⅡA、山柰酚等，关键靶点为IL-6、FOS、CXCL8、RELA、STAT3、AKT1 等。通过分子对接得到结合 能≤-6 kcal·mol-1 的“靶点蛋白-活性分子”16 个，与排名前6 位的关键靶点均有较好的亲和力。结论补气 消脂方中的活性成分槲皮素、木犀草素、丹参酮ⅡA、山柰酚、柚皮素等可能通过作用于多个靶点和调控多条 通路治疗NAFLD。
目的利用网络药理学和分子对接技术预测补气消脂方治疗非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）的主要活性成分和目标基因靶点，并探讨其潜在的作用机制。方法通过检索中药系统 药理技术平台（TCMSP）、OMIM、GeneCards 等数据库，查找补气消脂方活性成分、作用靶点以及NAFLD 相关 靶点，以OB≥30%和DL≥0.18 为标准筛选活性成分，并查阅文献补充文献报道中常见的中药活性成分，汇总 得到活性成分库，并利用STRING 数据库平台分析各靶点之间的相互作用，构建蛋白互作网络。利用 Cytoscape 3.7.2 软件进行“活性成分-疾病靶点”网络分析，在此基础上采用R 4.0.3（依托于“clusterProfiler” “org.Hs.eg.db”以及“pathview”程序包）进行GO 与KEGG 基因功能富集分析。筛选出补气消脂方关键活性成 分和靶基因后，利用Autodock-vina 软件进行分子对接，选择蛋白互作网络中度值排名前6 位的重要的靶点进 行分子对接，验证结合活性。结果通过筛选发现了补气消脂方中共有98 种活性成分和229 种相应靶点， NAFLD 靶点1 283 个。最终筛选获得103 个关键靶点和30 个重要的信号通路，如癌症通路、AGE-RAGE 信 号通路、TNF 信号通路、HIF-1 信号通路等。补气消脂方治疗NAFLD 的主要成分为槲皮素、木犀草素、丹 参酮ⅡA、山柰酚等，关键靶点为IL-6、FOS、CXCL8、RELA、STAT3、AKT1 等。通过分子对接得到结合 能≤-6 kcal·mol-1 的“靶点蛋白-活性分子”16 个，与排名前6 位的关键靶点均有较好的亲和力。结论补气 消脂方中的活性成分槲皮素、木犀草素、丹参酮ⅡA、山柰酚、柚皮素等可能通过作用于多个靶点和调控多条 通路治疗NAFLD。
2021, 32(12):1807-1816.
摘要:
目的基于转录组学与网络药理学探讨心阳片防治慢性心力衰竭（CHF）的关键机制。方法将32 只小 鼠随机分为假手术组、模型组、心阳片组（910 mg·kg-1）、培哚普利组（阳性对照组，0.607 mg·kg-1）。采用主动 脉弓缩窄术（TAC）构建CHF 小鼠模型。造模成功后，按照上述剂量灌胃给药（10 mL·kg-1），每日1 次，连续给 药8 周。给药结束后，对小鼠行心脏彩超检测，采集左室射血分数（LVEF）及左室短轴缩短率（LVFS）等心功能 指标；采用Masson 染色法观察心脏组织病理形态变化。取小鼠心脏组织提取RNA 进行转录组测序，并对组间 差异基因进行GO 功能及KEGG 通路富集分析。通过TCMSP 平台以及文献检索筛选心阳片的活性成分，利用 SwissTargetPrediction 网站预测活性成分作用靶点。通过Venny 平台对转录组测序得到的交集差异基因与活性成 分作用靶点取交集，获得交集靶点（心阳片治疗CHF 的关键靶点）。利用STRING 平台构建交集靶点蛋白互作 （PPI）网络；通过Cytoscape 3.8.0 软件构建“中药-活性成分-关键靶点网络”网络，筛选出心阳片防治CHF 的 核心靶点，并对核心靶点进行KEGG 通路富集分析；采用qPCR 法检测核心靶点mRNA 表达。结果与假手 术组比较，模型组小鼠的LVEF、LVFS 均显著降低（P＜0.01），小鼠的心脏体积明显增大，心脏系数显著升高 （P＜0.01），心脏胶原容积分数明显升高（P＜0.05）。与模型组比较，给药组小鼠的LVEF、LVFS 均显著升高 （P＜0.01），小鼠的心脏体积明显缩小，心脏系数显著降低（P＜0.01）；心阳片组小鼠的心脏胶原容积分数明显 下降（P＜0.05），培哚普利组的变化无明显差异（P＞0.05）。共得到心阳片有效成分83 个；假手术组-模型组的 差异基因与模型组-心阳片组差异基因的交集差异基因共有354 个，进一步与心阳片主要活性成分的771 个作 用靶点取交集，共得到21 个交集靶点，即心阳片治疗CHF 的关键靶点。心阳片改善CHF 的核心靶点包括 CCNB1、CCNA2、CDK1、PLK1、TNF、ALOX5、CCND1；KEGG 信号通路主要富集在细胞周期、细胞衰老、 FoxO、AMPK、p53、肥厚型心肌病、糖尿病并发症中的AGE-RAGE 等。结论心阳片可明显改善CHF 小鼠 的心功能，减轻小鼠心脏的纤维化面积以及肥厚程度，与其多成分、多靶点、多信号通路发挥的协同作用机制 相关。
目的基于转录组学与网络药理学探讨心阳片防治慢性心力衰竭（CHF）的关键机制。方法将32 只小 鼠随机分为假手术组、模型组、心阳片组（910 mg·kg-1）、培哚普利组（阳性对照组，0.607 mg·kg-1）。采用主动 脉弓缩窄术（TAC）构建CHF 小鼠模型。造模成功后，按照上述剂量灌胃给药（10 mL·kg-1），每日1 次，连续给 药8 周。给药结束后，对小鼠行心脏彩超检测，采集左室射血分数（LVEF）及左室短轴缩短率（LVFS）等心功能 指标；采用Masson 染色法观察心脏组织病理形态变化。取小鼠心脏组织提取RNA 进行转录组测序，并对组间 差异基因进行GO 功能及KEGG 通路富集分析。通过TCMSP 平台以及文献检索筛选心阳片的活性成分，利用 SwissTargetPrediction 网站预测活性成分作用靶点。通过Venny 平台对转录组测序得到的交集差异基因与活性成 分作用靶点取交集，获得交集靶点（心阳片治疗CHF 的关键靶点）。利用STRING 平台构建交集靶点蛋白互作 （PPI）网络；通过Cytoscape 3.8.0 软件构建“中药-活性成分-关键靶点网络”网络，筛选出心阳片防治CHF 的 核心靶点，并对核心靶点进行KEGG 通路富集分析；采用qPCR 法检测核心靶点mRNA 表达。结果与假手 术组比较，模型组小鼠的LVEF、LVFS 均显著降低（P＜0.01），小鼠的心脏体积明显增大，心脏系数显著升高 （P＜0.01），心脏胶原容积分数明显升高（P＜0.05）。与模型组比较，给药组小鼠的LVEF、LVFS 均显著升高 （P＜0.01），小鼠的心脏体积明显缩小，心脏系数显著降低（P＜0.01）；心阳片组小鼠的心脏胶原容积分数明显 下降（P＜0.05），培哚普利组的变化无明显差异（P＞0.05）。共得到心阳片有效成分83 个；假手术组-模型组的 差异基因与模型组-心阳片组差异基因的交集差异基因共有354 个，进一步与心阳片主要活性成分的771 个作 用靶点取交集，共得到21 个交集靶点，即心阳片治疗CHF 的关键靶点。心阳片改善CHF 的核心靶点包括 CCNB1、CCNA2、CDK1、PLK1、TNF、ALOX5、CCND1；KEGG 信号通路主要富集在细胞周期、细胞衰老、 FoxO、AMPK、p53、肥厚型心肌病、糖尿病并发症中的AGE-RAGE 等。结论心阳片可明显改善CHF 小鼠 的心功能，减轻小鼠心脏的纤维化面积以及肥厚程度，与其多成分、多靶点、多信号通路发挥的协同作用机制 相关。
2021, 32(12):1817-1824.
摘要:
目的基于网络药理学方法探讨黄芪-百合-沙棘（ALH）联用治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease， AD）的可能作用机制。方法利用TCMSP 数据库筛选ALH 的活性成分及作用靶点，通过GeneCards、OMIM 数据库收集AD 相关靶点，将药物活性成分靶点与AD 疾病相关靶点取交集，获得药物-疾病共同靶点；采用 Cytoscape 3.7.2 软件构建药物-活性成分-靶点-疾病网络，并采用STRING 平台构建蛋白互作（PPI）网络，筛选 关键活性成分和靶点；采用Autodock 软件对关键活性成分与核心靶点进行分子对接；采用Clue GO 插件进行 KEGG 通路富集分析。采用D-半乳糖联合氯化铝诱导AD 小鼠模型，通过Morris 水迷宫实验、海马组织病理 学观察（HE 染色法）及ELISA 法检测海马组织中TNF-α、IL-6、IL-17 含量，对ALH 治疗AD 的作用机制进行 初步验证。结果经筛选共获得ALH 活性成分39 个，如槲皮素、山柰酚、7-O-甲基异丙醇胺、芒柄花黄 素、异鼠李素等，主要作用于ATK1、MAPK1、JUN、TP53、TNF 等靶点，涉及PI3K-Akt、MAPK、AGERAGE 、IL-17、TNF 等信号通路，共同发挥治疗AD 的作用。药理学实验结果显示，ALH 可显著提高小鼠学 习记忆能力（P＜0.05，P＜0.01），减轻海马组织损伤，降低海马组织中TNF-α、IL-6、IL-17 含量（P＜0.05， P＜0.01）。结论ALH 治疗AD 是多成分、多靶点、多通路相互作用的结果，其机制与抑制炎性因子表达，减 轻炎症损伤有关。
目的基于网络药理学方法探讨黄芪-百合-沙棘（ALH）联用治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease， AD）的可能作用机制。方法利用TCMSP 数据库筛选ALH 的活性成分及作用靶点，通过GeneCards、OMIM 数据库收集AD 相关靶点，将药物活性成分靶点与AD 疾病相关靶点取交集，获得药物-疾病共同靶点；采用 Cytoscape 3.7.2 软件构建药物-活性成分-靶点-疾病网络，并采用STRING 平台构建蛋白互作（PPI）网络，筛选 关键活性成分和靶点；采用Autodock 软件对关键活性成分与核心靶点进行分子对接；采用Clue GO 插件进行 KEGG 通路富集分析。采用D-半乳糖联合氯化铝诱导AD 小鼠模型，通过Morris 水迷宫实验、海马组织病理 学观察（HE 染色法）及ELISA 法检测海马组织中TNF-α、IL-6、IL-17 含量，对ALH 治疗AD 的作用机制进行 初步验证。结果经筛选共获得ALH 活性成分39 个，如槲皮素、山柰酚、7-O-甲基异丙醇胺、芒柄花黄 素、异鼠李素等，主要作用于ATK1、MAPK1、JUN、TP53、TNF 等靶点，涉及PI3K-Akt、MAPK、AGERAGE 、IL-17、TNF 等信号通路，共同发挥治疗AD 的作用。药理学实验结果显示，ALH 可显著提高小鼠学 习记忆能力（P＜0.05，P＜0.01），减轻海马组织损伤，降低海马组织中TNF-α、IL-6、IL-17 含量（P＜0.05， P＜0.01）。结论ALH 治疗AD 是多成分、多靶点、多通路相互作用的结果，其机制与抑制炎性因子表达，减 轻炎症损伤有关。
2021, 32(12):1825-1832.
摘要:
目的运用网络药理学方法分析四妙丸治疗类风湿性关节炎和湿疹的活性成分、作用靶点及关键通路， 探讨该方“异病同治”的作用机制。方法通过检索中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库并结合文献筛 选四妙丸中的活性成分及其作用靶点；利用OMIM、GeneCards、Drugbank 等数据库收集类风湿性关节炎和湿 疹的疾病相关靶点；活性成分作用靶点与疾病靶点取交集得到四妙丸治疗类风湿性关节炎和湿疹的共同靶点。 通过Cytoscape 3.7.1 软件构建“中药-活性成分-疾病共同靶点”网络；运用STRING 数据库构建共同靶点蛋白 互作（PPI）网络。通过Metascape 和DAVID 数据库对共同靶点分别进行GO 功能富集分析和KEEG 通路富集分 析。结果共筛选出四妙丸治疗类风湿关节炎和湿疹的共同靶点46 个，对应四妙丸中的45 种活性成分。四妙 丸主要通过槲皮素、山柰酚、汉黄芩素、油酸、3β-乙酰氧基苍术酮等活性成分，对TNF、IL6、IL1B、 CCL2、CXCL8 等关键基因进行调控，实现对类风湿关节炎和湿疹的异病同治作用。其作用机制可能与细胞黏 附、白细胞迁移、对脂多糖的反应等生物过程有关，并通过TNF 信号通路、类风湿性关节炎、Toll 样受体信 号通路等相关通路实现。结论四妙丸是通过多成分、多靶点、多种信号通路来发挥治疗类风湿关节炎和湿疹 的作用，与其抗炎及免疫调节作用密切相关。
目的运用网络药理学方法分析四妙丸治疗类风湿性关节炎和湿疹的活性成分、作用靶点及关键通路， 探讨该方“异病同治”的作用机制。方法通过检索中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库并结合文献筛 选四妙丸中的活性成分及其作用靶点；利用OMIM、GeneCards、Drugbank 等数据库收集类风湿性关节炎和湿 疹的疾病相关靶点；活性成分作用靶点与疾病靶点取交集得到四妙丸治疗类风湿性关节炎和湿疹的共同靶点。 通过Cytoscape 3.7.1 软件构建“中药-活性成分-疾病共同靶点”网络；运用STRING 数据库构建共同靶点蛋白 互作（PPI）网络。通过Metascape 和DAVID 数据库对共同靶点分别进行GO 功能富集分析和KEEG 通路富集分 析。结果共筛选出四妙丸治疗类风湿关节炎和湿疹的共同靶点46 个，对应四妙丸中的45 种活性成分。四妙 丸主要通过槲皮素、山柰酚、汉黄芩素、油酸、3β-乙酰氧基苍术酮等活性成分，对TNF、IL6、IL1B、 CCL2、CXCL8 等关键基因进行调控，实现对类风湿关节炎和湿疹的异病同治作用。其作用机制可能与细胞黏 附、白细胞迁移、对脂多糖的反应等生物过程有关，并通过TNF 信号通路、类风湿性关节炎、Toll 样受体信 号通路等相关通路实现。结论四妙丸是通过多成分、多靶点、多种信号通路来发挥治疗类风湿关节炎和湿疹 的作用，与其抗炎及免疫调节作用密切相关。
2021, 32(12):1833-1838.
摘要:
基于药物性肝损伤的中、西医临床病症特点，通过查阅相关文献，整理分析并建立药物性肝损伤的西医 诊断标准与中医辨证标准，总结药物性肝损伤动物模型的模型复制方法、模型特点、模型优缺点。并对动物模 型与中、西医临床病症特点的吻合度进行评价，分析其优缺点及应用前景。总结发现，关于药物性肝损伤模型 应用最广泛的模型复制方法是对乙酰氨基酚致肝损伤模型和异烟肼致肝损伤模型，虽然这两种方法西医临床吻 合度较高，但与中医证型吻合度较低，尚无公认的中医证型的模型复制方法，在一定程度上限制了中医药对其 的研究。因此未来研究应集中在如何结合药物性肝损伤中西医临床评价标准，构建一套完善可靠的病-证结合 动物模型，为药物性肝损伤模型的建立提供更多的理论支撑。
基于药物性肝损伤的中、西医临床病症特点，通过查阅相关文献，整理分析并建立药物性肝损伤的西医 诊断标准与中医辨证标准，总结药物性肝损伤动物模型的模型复制方法、模型特点、模型优缺点。并对动物模 型与中、西医临床病症特点的吻合度进行评价，分析其优缺点及应用前景。总结发现，关于药物性肝损伤模型 应用最广泛的模型复制方法是对乙酰氨基酚致肝损伤模型和异烟肼致肝损伤模型，虽然这两种方法西医临床吻 合度较高，但与中医证型吻合度较低，尚无公认的中医证型的模型复制方法，在一定程度上限制了中医药对其 的研究。因此未来研究应集中在如何结合药物性肝损伤中西医临床评价标准，构建一套完善可靠的病-证结合 动物模型，为药物性肝损伤模型的建立提供更多的理论支撑。
2021, 32(12):1839-1844.
摘要:
目的建立毛蕊花糖苷血浆蛋白结合率的测定方法，比较常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷蛋白结合率 的异同。方法将大鼠置于低压低氧动物实验舱中，于海拨7 500 m 下缺氧暴露3 d 制备缺氧大鼠模型。采用 超滤法处理样品，结合高效液相色谱（HPLC）法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷游离型药物浓度（Cf）和 总药物浓度（Ct），并考察超滤膜非特异性结合率（NSB），对Cf 进行矫正后，计算血浆蛋白结合率。结果大鼠 血浆中毛蕊花糖苷浓度为3、6、12 μg·mL-1 时，毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（62.02± 8.51）%、（60.17±5.59）%和（62.60±3.77）%；与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（32.79±4.20）%、（33.16± 1.74）%和（32.72±2.20）%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆蛋白属于 中强度结合，且在研究的浓度范围内，不具浓度依赖性，而毛蕊花糖苷与缺氧大鼠血浆蛋白结合强度明显低于 常氧大鼠血浆。
目的建立毛蕊花糖苷血浆蛋白结合率的测定方法，比较常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷蛋白结合率 的异同。方法将大鼠置于低压低氧动物实验舱中，于海拨7 500 m 下缺氧暴露3 d 制备缺氧大鼠模型。采用 超滤法处理样品，结合高效液相色谱（HPLC）法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷游离型药物浓度（Cf）和 总药物浓度（Ct），并考察超滤膜非特异性结合率（NSB），对Cf 进行矫正后，计算血浆蛋白结合率。结果大鼠 血浆中毛蕊花糖苷浓度为3、6、12 μg·mL-1 时，毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（62.02± 8.51）%、（60.17±5.59）%和（62.60±3.77）%；与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（32.79±4.20）%、（33.16± 1.74）%和（32.72±2.20）%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆蛋白属于 中强度结合，且在研究的浓度范围内，不具浓度依赖性，而毛蕊花糖苷与缺氧大鼠血浆蛋白结合强度明显低于 常氧大鼠血浆。
2021, 32(12):1845-1854.
摘要:
目的比较远志生品、“建昌帮”炆远志与药典法甘草制远志的成分差异。方法运用超高效液相色谱- 线性离子阱-静电场轨道阱质谱联用（UPLC-LTQ-Orbitrap MS）技术，在负离子模式下采集样品数据，根据相对 分子质量及碎片离子等质谱信息，结合对照品与文献信息鉴定化学成分，并以各成分炮制前后离子峰面积比为 炮制前后变化指数进行比较。利用SIMCA 软件进行主成分分析（PCA）与偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）， 根据变量重要性投影（VIP）值对炮制前后差异成分进行筛选。结果共鉴定出51 个化合物，其中42 个成分来 源于远志，9 个为炮制辅料甘草引入的成分。PCA 分析表明生远志与炆远志、制远志具有明显差异，OPLS-DA 筛选得生远志与炆远志差异成分27 个；生远志与制远志差异成分25 个；炆远志与制远志差异成分23 个。 结论远志炮制前后成分种类与成分含量均发生了明显变化，炮制过程中皂苷类、寡糖酯类等同类成分间的转 化以及辅料甘草成分的引入是产生该差异的主要原因，且炆远志与制远志两种炮制品也存在着明显差异。
目的比较远志生品、“建昌帮”炆远志与药典法甘草制远志的成分差异。方法运用超高效液相色谱- 线性离子阱-静电场轨道阱质谱联用（UPLC-LTQ-Orbitrap MS）技术，在负离子模式下采集样品数据，根据相对 分子质量及碎片离子等质谱信息，结合对照品与文献信息鉴定化学成分，并以各成分炮制前后离子峰面积比为 炮制前后变化指数进行比较。利用SIMCA 软件进行主成分分析（PCA）与偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）， 根据变量重要性投影（VIP）值对炮制前后差异成分进行筛选。结果共鉴定出51 个化合物，其中42 个成分来 源于远志，9 个为炮制辅料甘草引入的成分。PCA 分析表明生远志与炆远志、制远志具有明显差异，OPLS-DA 筛选得生远志与炆远志差异成分27 个；生远志与制远志差异成分25 个；炆远志与制远志差异成分23 个。 结论远志炮制前后成分种类与成分含量均发生了明显变化，炮制过程中皂苷类、寡糖酯类等同类成分间的转 化以及辅料甘草成分的引入是产生该差异的主要原因，且炆远志与制远志两种炮制品也存在着明显差异。
2021, 32(12):1855-1858.
摘要:
目的建立超快速液相色谱-串联质谱（UFLC-MS/MS）法同时测定黄芪中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖 苷的含量。方法液相测定采用0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱；Shim-Pack XR-ODS 柱 （75 mm×3.0 mm，2.2 μm）；流速为0.4 mL·min-1。质谱测定采用三重四极杆串联质谱仪，电喷雾电离源（ESI 源），负离子模式检测。结果黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷分别在1~50 μg·mL-1（r = 0.999 6）、2~100 μg·mL-1 （r = 0.999 8）范围内线性关系良好。黄芪甲苷含量为0.132%~0.140%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.055 1%~ 0.064 3%。结论与《中国药典》方法比较，该方法供试品提取简单，分析快速、准确，可用于黄芪的质量控 制研究。
目的建立超快速液相色谱-串联质谱（UFLC-MS/MS）法同时测定黄芪中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖 苷的含量。方法液相测定采用0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱；Shim-Pack XR-ODS 柱 （75 mm×3.0 mm，2.2 μm）；流速为0.4 mL·min-1。质谱测定采用三重四极杆串联质谱仪，电喷雾电离源（ESI 源），负离子模式检测。结果黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷分别在1~50 μg·mL-1（r = 0.999 6）、2~100 μg·mL-1 （r = 0.999 8）范围内线性关系良好。黄芪甲苷含量为0.132%~0.140%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.055 1%~ 0.064 3%。结论与《中国药典》方法比较，该方法供试品提取简单，分析快速、准确，可用于黄芪的质量控 制研究。
2021, 32(12):1859-1864.
摘要:
目的研究黄芩清肺汤中黄芩、栀子配伍前后的成分变化，探讨二者配伍的合理性。方法采用超高效 液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱联用（UPLC-LTQ-Orbitrap-MS）技术建立黄芩、栀子配伍前后的化学指纹 图谱，通过正交偏最小二乘判别法分析药对配伍前后的化学成分变化，并对筛选到的化学标记物进行鉴定。 结果黄芩、栀子合并液与合煎液化学成分存在明显差异，合煎后京尼平苷酸（geniposidic acid）、栀子苷 （gardenoside）等含量显著下降，黄芩素（baicalein）、槲皮素（quercetin）等含量显著升高。结论黄芩清肺汤中黄 芩、栀子配伍后，可促进多种活性成分在合煎液中的溶出，这些成分可能是黄芩、栀子配伍协同增效的物质 基础。
目的研究黄芩清肺汤中黄芩、栀子配伍前后的成分变化，探讨二者配伍的合理性。方法采用超高效 液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱联用（UPLC-LTQ-Orbitrap-MS）技术建立黄芩、栀子配伍前后的化学指纹 图谱，通过正交偏最小二乘判别法分析药对配伍前后的化学成分变化，并对筛选到的化学标记物进行鉴定。 结果黄芩、栀子合并液与合煎液化学成分存在明显差异，合煎后京尼平苷酸（geniposidic acid）、栀子苷 （gardenoside）等含量显著下降，黄芩素（baicalein）、槲皮素（quercetin）等含量显著升高。结论黄芩清肺汤中黄 芩、栀子配伍后，可促进多种活性成分在合煎液中的溶出，这些成分可能是黄芩、栀子配伍协同增效的物质 基础。
2021, 32(12):1865-1870.
摘要:
目的评价止带排毒汤治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）持续感染（湿热下注证）的临床效果及对 宫颈局部免疫炎症因子的调节作用。方法将109 例HR-HPV 确诊患者随机分为对照组（55 例）和观察组 （54 例）。对照组口服治带片，每次5 片，每日3 次。观察组口服止带排毒汤，每日1 剂。疗程均为4 个月经 周期。治疗前后进行宫颈分泌物HR-HPV 检测、液基薄层细胞学检测（TCT）、中医临床症状评分；检测治疗 前后宫颈分泌物白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6 和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平；随访6 个月记录复发情况。 结果治疗后，观察组HR-HPV 阴转率为48.08%（25/52），高于对照组的25.49%（13/51）（P＜0.05）；观察组 HR-HPV 临床疗效总有效率为88.46%（46/52），高于对照组的68.63%（35/51）（P＜0.05）；观察组中医证候疗效 总有效率为92.31%（48/52），高于对照组的76.47%（39/51）（P＜0.05）；观察组TCT 检测正常率为51.92%（27/ 52），高于对照组的25.49%（13/51）（P＜0.05）；观察组第二代杂交捕获法（HC2）比值和中医证候积分均低于对 照组（P＜0.01）；观察组宫颈管分泌物IL-2 水平高于对照组，IL-4、IL-6 和TNF-α 水平低于对照组（P＜ 0.01）；随访6 个月后，观察组复发率为20%（5/25），低于对照组的53.86%（7/13）（P＜0.05）。结论止带排毒 汤可降低宫颈HR-HPV 持续感染患者的病毒载量，提高HR-HPV 阴转率，逆转不良病理状况，并能调节宫颈 局部免疫炎症因子，减轻中医症状，有较好的临床疗效，且安全。
目的评价止带排毒汤治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）持续感染（湿热下注证）的临床效果及对 宫颈局部免疫炎症因子的调节作用。方法将109 例HR-HPV 确诊患者随机分为对照组（55 例）和观察组 （54 例）。对照组口服治带片，每次5 片，每日3 次。观察组口服止带排毒汤，每日1 剂。疗程均为4 个月经 周期。治疗前后进行宫颈分泌物HR-HPV 检测、液基薄层细胞学检测（TCT）、中医临床症状评分；检测治疗 前后宫颈分泌物白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6 和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平；随访6 个月记录复发情况。 结果治疗后，观察组HR-HPV 阴转率为48.08%（25/52），高于对照组的25.49%（13/51）（P＜0.05）；观察组 HR-HPV 临床疗效总有效率为88.46%（46/52），高于对照组的68.63%（35/51）（P＜0.05）；观察组中医证候疗效 总有效率为92.31%（48/52），高于对照组的76.47%（39/51）（P＜0.05）；观察组TCT 检测正常率为51.92%（27/ 52），高于对照组的25.49%（13/51）（P＜0.05）；观察组第二代杂交捕获法（HC2）比值和中医证候积分均低于对 照组（P＜0.01）；观察组宫颈管分泌物IL-2 水平高于对照组，IL-4、IL-6 和TNF-α 水平低于对照组（P＜ 0.01）；随访6 个月后，观察组复发率为20%（5/25），低于对照组的53.86%（7/13）（P＜0.05）。结论止带排毒 汤可降低宫颈HR-HPV 持续感染患者的病毒载量，提高HR-HPV 阴转率，逆转不良病理状况，并能调节宫颈 局部免疫炎症因子，减轻中医症状，有较好的临床疗效，且安全。
2021, 32(12):1871-1876.
摘要:
目的探索邓高丕教授治疗子宫内膜异位症的用药规律。方法收集邓高丕教授治疗子宫内膜异位症 113 首中药处方，录入古今医案云平台软件，经数据标准化处理后建立标准医案数据库，利用其中的数据挖掘 功能对药物进行频次分析、属性分析、关联分析、聚类分析、复杂网络分析等。结果113 首处方中使用中药 112 味，使用频次较高的中药为皂角刺、丹参、女贞子、赤芍、三棱、莪术、三七、薏苡仁、海螵蛸、鸡内 金、枸杞子、覆盆子等；药物以甘温为主，多入肝、脾、肾经。聚类分析可将高频药物分为3 组，其主要功效 为活血散结，养阴柔肝，补益肝肾；复杂网络分析提示核心处方以滋补肝肾、化瘀散结为法。结论邓高丕教 授治疗子宫内膜异位症以化瘀散结、滋补肝肾为主要治疗方法，同时重视健脾益气类药物的应用，从而达到标 本兼治的目的。
目的探索邓高丕教授治疗子宫内膜异位症的用药规律。方法收集邓高丕教授治疗子宫内膜异位症 113 首中药处方，录入古今医案云平台软件，经数据标准化处理后建立标准医案数据库，利用其中的数据挖掘 功能对药物进行频次分析、属性分析、关联分析、聚类分析、复杂网络分析等。结果113 首处方中使用中药 112 味，使用频次较高的中药为皂角刺、丹参、女贞子、赤芍、三棱、莪术、三七、薏苡仁、海螵蛸、鸡内 金、枸杞子、覆盆子等；药物以甘温为主，多入肝、脾、肾经。聚类分析可将高频药物分为3 组，其主要功效 为活血散结，养阴柔肝，补益肝肾；复杂网络分析提示核心处方以滋补肝肾、化瘀散结为法。结论邓高丕教 授治疗子宫内膜异位症以化瘀散结、滋补肝肾为主要治疗方法，同时重视健脾益气类药物的应用，从而达到标 本兼治的目的。
2021, 32(12):1877-1882.
摘要:
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种累及人体动脉的慢性炎症性疾病。细胞焦亡作为一种炎症性质 的细胞程序性死亡方式，被证实与AS 进展密切相关，其特点是细胞膜完整性被破坏，炎症因子及细胞内容物 经膜孔释放引发局部强烈而持续的炎症反应。AS 病变组织中的细胞焦亡因血液循环积聚的脂质而过度激活， 继而释放大量炎症因子损伤血管内皮，促进AS 病变的形成与发展，这与中医“痰瘀毒”致病机制相似。活血 解毒类中药正是以“痰瘀毒”为病机治疗AS 的药物，具有抗炎降脂、改善循环等作用。因此，活血解毒类中 药可以将细胞焦亡作为靶点发挥抗AS 的功效。
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种累及人体动脉的慢性炎症性疾病。细胞焦亡作为一种炎症性质 的细胞程序性死亡方式，被证实与AS 进展密切相关，其特点是细胞膜完整性被破坏，炎症因子及细胞内容物 经膜孔释放引发局部强烈而持续的炎症反应。AS 病变组织中的细胞焦亡因血液循环积聚的脂质而过度激活， 继而释放大量炎症因子损伤血管内皮，促进AS 病变的形成与发展，这与中医“痰瘀毒”致病机制相似。活血 解毒类中药正是以“痰瘀毒”为病机治疗AS 的药物，具有抗炎降脂、改善循环等作用。因此，活血解毒类中 药可以将细胞焦亡作为靶点发挥抗AS 的功效。
