Abstract:

目的 探究暖心康调控支链氨基酸（BCAA）代谢改善压力负荷致小鼠心力衰竭的作用机制。方法 采用 主动脉弓缩窄术（TAC）构建压力负荷导致的心力衰竭小鼠模型。将 C57BL/6J 小鼠随机分为假手术组、模型组、 暖心康组、暖心康+3-MA 组以及诺欣妥组，每组 8 只。暖心康组给予 1.65 g·kg-1暖心康灌胃，诺欣妥组按照 25 mg·kg-1剂量灌胃，每日 1 次，持续 6 周；暖心康+3-MA 组在暖心康组干预基础上，在灌胃第 4 周同时腹腔 注射 10 mg·kg-1自噬抑制剂 3-甲基腺嘌呤（3-MA），每日 1 次，连续 1 周。利用超声心动图检测小鼠心功能： 心脏左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、舒张末期左室内径（LVIDd）、收缩末期左室内径 （LVIDs）；苏木精-伊红（HE）、小麦胚芽凝集素（WGA）染色法观察心肌组织病理变化；免疫荧光法检测心肌细 胞 LC3B 蛋白表达情况；qPCR 法检测心肌组织心房钠尿肰（ANP）、脑钠肰（BNP） mRNA 表达水平；ELISA 法 检测心肌组织 BCAA 表达水平；Western Blot 法检测心肌组织 BCKDK、p-E1α、E1α、p-mTOR、mTOR、 LC3、P62 蛋白表达水平。结果 （1）与假手术组比较，模型组小鼠的 LVEF、LVFS 显著降低（P＜0.01）， LVIDd、LVIDs 显著升高（P＜0.01）；小鼠的心肌细胞明显增大，排列无序，炎症细胞浸润增多；心肌细胞明显 增大，细胞横截面积显著增加（P＜0.01）；心肌组织 ANP、BNP mRNA 表达显著上调（P＜0.01）；心肌细胞 LC3B 蛋白表达显著下调（P＜0.01）；心肌组织 p-mTOR/mTOR、P62 蛋白表达显著上调（P＜0.01），LC3 Ⅱ/Ⅰ 蛋白表达显著下调（P＜0.01）；心肌组织中 BCAA 含量显著升高（P＜0.01），BCKDK、p-E1α/E1α 蛋白表达显著 上调（P＜0.01）。（2）与模型组比较，暖心康组小鼠的 LVEF、LVFS 显著升高（P＜0.01），LVIDd、LVIDs 显著下 降（P＜0.05，P＜0.01）；小鼠的心肌细胞病理形态明显改善，排列有序，炎症细胞浸润明显减少；心肌细胞明 显缩小，细胞横截面积显著减少（P＜0.01）；心肌组织 ANP、BNP mRNA 表达显著下调（P＜0.01）；心肌细胞 LC3B 蛋白表达显著上调（P＜0.01）；心肌组织 p-mTOR/mTOR、P62 蛋白表达显著下调（P＜0.01），LC3 Ⅱ/Ⅰ 蛋白表达明显上调（P＜0.05）；心肌组织中 BCAA 含量显著降低（P＜0.01），BCKDK、p-E1α/E1α 蛋白表达显著 下调（P＜0.01）。（3）与暖心康组比较，暖心康+3-MA 组小鼠的 LVEF、LVFS 显著降低（P＜0.01），LVIDd、 LVIDs 明显升高（P＜0.05）；小鼠心肌细胞排列紊乱，炎症细胞浸润增多；心肌细胞明显增大，细胞横截面积 显著增加（P＜0.01）；心肌组织 ANP、BNP mRNA 显著表达上调（P＜0.01）；心肌细胞 LC3B 蛋白表达显著下调 （P＜0.01）；心肌组织 p-mTOR/mTOR、P62 蛋白表达显著上调（P＜0.01），LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达明显下调（P＜ 0.05）；心肌组织中 BCAA 含量明显升高（P＜0.05），BCKDK、p-E1α/E1α 蛋白表达明显上调（P＜0.05）。结论 暖心康能有效改善心力衰竭小鼠的心功能，可能与促进 BCAA 代谢，增强心肌细胞自噬有关。

Abstract:

目的 探讨柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肠道动力障碍的作用及机制。方法 将 48 只 SD 雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、柴黄清胰活血颗粒组，各组再分为 12、24 h 两个亚组，每组 8 只。 采用经胰胆管逆行注射 3.5% 牛磺胆酸钠复制 SAP 大鼠模型。柴黄清胰活血颗粒组按照 2.2 g·kg-1剂量灌胃给 药，假手术组、模型组大鼠灌胃等量生理盐水，每 6 h 灌胃 1 次。于术后 12、24 h 分别处死各组大鼠并采集 相关组织样本。大鼠处死前 1 h 灌胃墨炭（0.1 mL·kg-1 ），检测小肠推进率；采用 HE 染色法观察胰腺、结肠组 织病理改变；生化法检测血清淀粉酶（AMY）活性；鲎定量法检测血浆内毒素（ET）含量；ELISA 法检测血清酪 氨酸激酶受体（c-kit）、胃动素（MTL）、P 物质（SP）、血管活性肠肽（VIP）表达水平；免疫组化法检测结肠组织 SP、VIP、c-kit 蛋白表达水平；RT-PCR 法检测结肠组织 MTL、SP、VIP、c-kit mRNA 表达水平。结果 在 12、24 h 同一亚组中，与假手术组比较，模型组大鼠腹腔有大量腹水，胰腺组织呈脓肿样改变，甚至出现皂 化斑和大片坏死，肠腔膨胀，有明显积气、积液，胰腺及肠道均与周围组织有粘连，小肠推进率显著下降 （P＜0.001）；胰腺组织出现肿胀、结构紊乱、出血，胰腺组织病理评分显著升高（P＜0.001）；结肠组织出现黏 膜破损、炎性细胞渗出、充血水肿，结肠组织病理评分显著升高（P＜0.001）；血清 AMY 活性显著升高（P＜ 0.001）；血浆 ET 含量显著升高（P＜0.001）；血清 c-kit、MTL 水平显著降低（P＜0.01，P＜0.001），血清 SP、 VIP 水平显著升高（P＜0.01，P＜0.001）；结肠组织 c-kit 蛋白表达水平显著下降（P＜0.001），SP、VIP 蛋白表 达水平显著升高（P＜0.001）；结肠组织 c-kit、MTL mRNA 表达水平显著下降（P＜0.001），SP、VIP mRNA 表 达水平显著升高（P＜0.001）。与模型组比较，柴黄清胰活血颗粒组大鼠的胰腺及肠道病变较轻，坏死范围缩 小，小肠推进率显著升高（P＜0.001）；胰腺组织小叶及腺泡间隙肿胀及结构紊乱明显减轻，腺泡出血及坏死区 域明显缩小，胰腺组织病理评分显著降低（P＜0.001）；结肠组织炎性细胞渗出减少，黏膜破损程度及充血水肿 明显减轻，结肠组织病理评分显著降低（P＜0.001）；血清 AMY 活性显著降低（P＜0.01，P＜0.001）；血浆 ET 含量显著降低（P＜0.001）；血清 c-kit、MTL 水平显著升高（P＜0.01，P＜0.001），血清 SP、VIP 水平显著降低 （P＜0.01，P＜0.001）；结肠组织 c-kit 蛋白表达水平显著升高（P＜0.001），SP、VIP 蛋白表达水平显著下降 （P＜0.01，P＜0.001）；结肠组织 c-kit、MTL mRNA 表达水平显著升高（P＜0.001），SP、VIP mRNA 表达水平 显著下降（P＜0.001）。结论 柴黄清胰活血颗粒可能通过调节与胃-肠-胰系统内分泌相关的胃肠激素表达水 平，从而改善 SAP 大鼠的肠道动力障碍，减轻胰腺组织及结肠组织病理损伤。

Abstract:

目的 探讨健脾祛湿方对高脂饮食诱导肥胖小鼠的减脂作用及机制。方法 将 C57BL/6J 雄性小鼠随机 分为正常组（6 只）、高脂造模组（44 只）。正常组给予常规维持饲料喂养，高脂造模组给予高脂饲料喂养，连续 12 周。以造模小鼠体质量超过正常小鼠平均体质量的 20% 作为模型复制成功的标准。将 30 只模型复制成功 的肥胖小鼠随机分为模型组、奥利司他组（0.046 8 g·kg-1 ）及健脾祛湿方低、中、高剂量组（6、12、24 g·kg-1 ）， 每组 6 只。继续饲以高脂饲料，同时各给药组均按照上述剂量灌胃给予相应药物，每日 1 次，连续灌胃 8 周。 给药期间，于每周固定时间点称量小鼠的体质量并记录；实验结束前 2 周进行口服葡萄糖耐量（OGTT）试验， 计算时间-血糖曲线下面积（AUC）；分离小鼠附睾白色脂肪、腹股沟白色脂肪、肩胛棕色脂肪并称质量；检测 血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平； 苏木素-伊红（HE）染色法观察脂肪组织病理变化；Real-time PCR 法检测脂肪组织 UCP1、PRDM16、PGC-1α、 PPARγ mRNA 表达水平；免疫组化法检测脂肪组织中 UCP1 蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组小 鼠的体质量、脂肪组织（附睾白色脂肪、腹股沟白色脂肪及肩胛棕色脂肪）质量、AUC 值均显著升高（P＜ 0.01）；血清 TC、TG、LDL-C 水平显著升高（P＜0.05，P＜0.01），HDL-C 水平显著降低（P＜0.01）；附睾白色 脂肪及肩胛棕色脂肪细胞体积明显增大、直径明显增加，单位面积细胞数目明显减少；附睾白色脂肪及肩胛棕 色脂肪组织中的 UCP1、PGC-1α、PPARγ、PRDM16 mRNA 表达水平均显著降低（P＜0.01）；附睾白色脂肪及 肩胛棕色脂肪组织中的 UCP1 蛋白表达显著下调（P＜0.01）。与模型组比较，各给药组小鼠第 5～8 周的体质量 均显著降低（P＜0.01），健脾祛湿方低、高剂量组的腹股沟白色脂肪质量明显降低（P＜0.05），健脾祛湿方中、 高剂量组的附睾白色脂肪、肩胛棕色脂肪质量显著降低（P＜0.05，P＜0.01）；各给药组小鼠的 AUC 值均显著 降低（P＜0.05，P＜0.01）；健脾祛湿方高剂量组小鼠的血清 TC、TG、LDL-C 水平显著降低（P＜0.05，P＜0.01）， HDL-C 水平明显升高（P＜0.05）；各给药组小鼠的附睾白色脂肪及肩胛棕色脂肪体积明显缩小，细胞直径明显 缩短，单位面积细胞数目明显增多，排列更加致密；各给药组小鼠附睾白色脂肪组织中的 UCP1、PGC-1α、 PPARγ mRNA 表达水平均显著升高（P＜0.05，P＜0.01），健脾祛湿方中、高剂量组小鼠肩胛棕色脂肪组织中的 UCP1、PGC-1α、PPARγ mRNA 表达水平均显著升高（P＜0.05，P＜0.01），健脾祛湿方高剂量组小鼠肩胛棕色 脂肪组织中的 PRDM16 mRNA 表达水平显著升高（P＜0.01）；各给药组小鼠附睾白色脂肪及肩胛棕色脂肪组织 中的 UCP1 蛋白表达显著上调（P＜0.01）。结论 健脾祛湿方对高脂饮食诱导肥胖小鼠具有明显的减脂作用， 能够有效改善其糖脂代谢紊乱及脂肪组织病理变化，可能与其促进白色脂肪棕色化及棕色脂肪活化有关。

Abstract:

目的 基于核因子 κB（NF-κB）/长链非编码 RNA 心肌梗死相关转录本（LncRNA-Miat）信号通路探讨炎调 方抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞（AEC Ⅱ）的过度自噬减轻肠缺血再灌注（IIR）引起的急性肺损伤的作用机制。方法 体 外构建细胞缺氧复氧模型，予以炎调方干预，慢病毒转染的方式构建 NF-κB 敲低稳定转染细胞株，蛋白免疫 印迹法（Western Blot）及实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法验证敲低效率。采用 RT-qPCR 和 Western Blot 法检测各组细胞相关蛋白及 mRNA 表达量。自噬染色（MDC 法）观察细胞自噬情况。结果 与阴性对照组 （shNC）比较，NF-κB 敲低组（shNF-κB）NF-κB 蛋白及 mRNA 表达明显降低（P＜0.001，P＜0.000 1）。与对照 组比较，缺氧复氧组自噬明显增强（P＜0.01，P＜0.001），LC3II 蛋白的表达明显升高（P＜0.05）；与缺氧复氧 组比较，炎调方组及炎调方+缺氧复氧组自噬明显减弱（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001），LC3II 及 p62 蛋白的表 达明显降低（P＜0.05，P＜0.01）。与对照组比较，缺氧复氧组 NF-κB mRNA 及蛋白、LncRNA-Miat mRNA 表 达水平明显升高（P＜0.05，P＜0.01）；与缺氧复氧组比较，炎调方组及炎调方+缺氧复氧组 NF-κBmRNA 及蛋 白、LncRNA-Miat mRNA 表达水平明显降低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）。敲低 NF-κB 后，与 shNC 组比 较，shNC+缺氧复氧组肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬水平明显增加（P＜0.05），LC3II 蛋白的表达明显升高（P＜0.05）； 与 shNC+缺氧复氧组比较，shNF-κB 组及 shNF-κB+缺氧复氧组肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬水平明显降低（P＜0.05， P＜0.01，P＜0.001），LC3II 蛋白的表达明显降低（P＜0.05）；与 shNC 组比较，shNC+缺氧复氧组 LncRNAMiat mRNA 表达水平明显升高（P＜0.05）；与 shNC+缺氧复氧组比较，shNF-κB 组及 shNF-κB+缺氧复氧组 LncRNA-Miat mRNA 表达水平降低（P＜0.05，P＜0.01）。 结论 炎调方可通过 NF-κB/LncRNA-Miat 信号通 路，抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体过度自噬，从而减轻 IIR 引起的急性肺损伤。

Abstract:

目的 探讨木蝴蝶总黄酮（TFO）的抗氧化活性及其对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化应激和凋亡的影 响。方法 采用 DPPH、ABTS 和 O2- 清除、Fe2+ 和 Cu2+ 螯合、Fe3+ 和 Cu2+ 还原法测定木蝴蝶总黄酮的抗氧化水 平。采用过氧化氢（H2O2 ）诱导 HUVECs 损伤模型，测定木蝴蝶总黄酮干预处理后细胞活性和超氧化物歧化酶 （SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、过氧化氢酶（CAT）和活性氧（ROS）的活性。采用 Hoechst 33258、 JC-1 和 Annexin V-FITC/PI 染色研究木蝴蝶总黄酮对细胞凋亡的影响。通过蛋白质印迹法检测核因子 E2 相关 因子 2（Nrf2）、血红素加氧酶（HO-1）和醌氧化还原酶 1（NQO-1）的表达，观察木蝴蝶总黄酮抗氧化应激和凋亡 的作用机制。结果 木蝴蝶总黄酮具有较强的清除自由基和还原金属离子的能力，而金属螯合能力相对较弱。 体外细胞实验显示木蝴蝶总黄酮可明显提高 HUVECs 的存活率（P＜0.01，P＜0.001），明显增强 SOD 和 CAT 的活性（P＜0.05，P＜0.001），降低 LDH、MDA 和 ROS 的水平（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001），降低 H2O2诱导 的细胞凋亡（P＜0.01，P＜0.001），提高 Nrf2、HO-1 和 NQO-1 蛋白的表达（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）。 结论 木蝴蝶总黄酮具有明显的抗氧化活性，可通过 Nrf2/HO-1 通路缓解 H2O2诱导的氧化应激和细胞凋亡。

Abstract:

目的 探讨白芍苷对缺氧缺血性脑损伤（HIBI）新生大鼠神经炎症及 Ras 相关 C3 肉毒素底物 1/丝氨酸- 苏氨酸蛋白酶/核转录因子 κB（Rac1/Akt/NF-κB）信号通路的影响。方法 构建 HIBI 新生大鼠模型，将造模成 功大鼠随机分为模型组，白芍苷低、高剂量组，白芍苷高剂量+佛波酯（通路激活剂）组，每组 18 只，另取 18 只 正常新生大鼠作为对照组。给药结束进行神经功能缺陷评分；检测脑组织含水量；酶联免疫吸附试验（ELISA） 检测脑组织炎症因子水平；苏木精-伊红（HE）染色观察脑组织病理形态变化；原位末端转移酶标记技术 （TUNEL）染色检测神经元细胞凋亡情况；Western Blot 法检测 Rac1/Akt/NF-κB 信号通路及凋亡相关蛋白表达。 结果 与对照组比，模型组脑组织结构破坏明显，水肿明显，神经元排列紊乱，部分肿胀变性坏死，数量减 少，神经胶质细胞大量增生，炎性浸润明显，神经功能缺损评分、脑组织含水量和 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平 及神经元凋亡率、Bax、Rac1、p-Akt/Akt、p-NF-κB/NF-κB 表达升高，Bcl-2 表达降低（P＜0.05）；白芍苷低、 高剂量组组较模型组脑组织结构基本正常，轻度水肿，神经元及胶质细胞结构形态相对正常，少量神经元发生 变性坏死及神经胶质细胞增生，神经功能缺损评分、脑组织含水量、神经元凋亡率和 TNF-α、IL-1β、IL-6 水 平及 Bax、Rac1、p-Akt/Akt、p-NF-κB/NF-κB 蛋白表达降低，Bcl-2 蛋白表达升高（P＜0.05）；白芍苷高剂量 组较白芍苷高剂量+佛波酯组脑组织结构破坏严重，神经元排列紊乱，数量减少，肿胀变性坏死现象严重，神 经胶质细胞大量增生，神经功能缺损评分、脑组织含水量、神经元凋亡率 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平及 Bax、 Rac1、p-Akt/Akt、p-NF-κB/NF-κB 蛋白表达均升高，Bcl-2 蛋白表达降低（P＜0.05）。结论 白芍苷可改善 HIBI 新生大鼠神经炎症，其作用机制与抑制 Rac1/Akt/NF-κB 信号通路相关。

Abstract:

目的 采用生物信息学、网络药理学、网络近邻法和分子对接综合网络医学策略研究健脾化瘀解毒方 （JPHYJDF）干预胃癌前病变（GPL）衰老表型的作用机制。方法 通过生物信息学方法分析 GEO 数据库中的 GPL 衰老表型基因数据，并结合差异表达基因（DEGs）分析、加权基因共表达网络分析（WGCNA）、数据库筛选、 PPI 网络构建、GO 功能、KEGG 通路以及 GSEA 基因集富集分析等方法筛选出与 GPL 衰老表型相关的关键基 因；进一步结合网络药理学方法和网络近邻法筛选 JPHYJDF 干预 GPL 的潜在活性成分及其作用靶点，并进行 分子对接验证。结果 （1）通过对 GSE130823 数据集进行 DEGs 分析，共筛选出 519 个与 GPL 衰老表型相关的 DEGs；WGCNA 分析确定 50 个与 GPL 衰老表型相关的基因模块集；数据库筛选出 76 个潜在的 GPL 衰老表型 相关基因靶标。PPI 网络分析筛选出 TP53、HIF1A、STAT3、CDK1、AURKA、BIRC5、CCNB1 等关键基因； GO 功能和 KEGG 通路富集分析显示，这些基因主要参与细胞周期、DNA 损伤修复和衰老等过程。（2）网络药 理学分析共获得 JPHYJDF 活性成分对应靶点 608 个，GPL 衰老表型靶点 80 个，潜在作用靶点 19 个。JPHYJDF 干预 GPL 的关键活性成分有 7 个，核心靶点有 ATM、CDK1、PARP1 等。JPHYJDF 干预 GPL 衰老表型主要涉 及细胞氧化应激响应、端粒延长维持的调控、细胞周期负调控、细胞分裂和炎症反应等 GO 生物过程，与 p53 信号通路、细胞凋亡通路等 4 条通路关系密切。网络近邻法筛选出潜在活性成分 23 个，关键活性成分有槲皮 素、山柰酚、大豆异黄酮、β-谷甾醇、豆甾醇等。分子对接显示，活性成分与 ATM、ESR1、CDK1、HIF1A、 PARP1、SRC 具有较好结合活性和稳定性。结论 JPHYJDF 通过多成分、多靶点调控 p53 信号通路、凋亡通 路和 DNA 损伤修复通路等途径，调控 GPL 相关细胞衰老，可为 GPL 的精准治疗提供新的思路。

Abstract:

目的 运用网络药理学和实验验证探讨白术内酯 （I At-1）治疗膝骨关节炎（KOA）的作用机制。方法 （1）采 用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、PubChem、SwissTargetPrediction 数据库筛选 At-1 的作用靶点； 利用 DisGeNET、NCBI 数据库筛选 KOA 疾病靶点，并取 At-1 的作用靶点与 KOA 的疾病靶点的交集，作为 At-1 治疗 KOA 的潜在作用靶点。通过 STRING 数据库构建蛋白质-蛋白质互作网络，筛选 At-1 治疗 KOA 的 关键靶点。利用基迪奥生物网站对潜在作用靶点进行 GO 功能和 KEGG 通路富集分析，并对 At-1 与关键靶点 进行分子对接验证。（2）采用内侧半月板失稳法构建小鼠 KOA 模型。将 15 只小鼠随机分为对照组、模型组和 At-1 组（0.2 mg·mL-1 ），每组 5 只。At-1 组小鼠每次每只关节腔注射 At-1 溶液 15 µL，对照组和模型组小鼠每 次每只关节腔注射等量 PBS 溶液，每周给药 3 次，连续给药 4 周后处死，取小鼠膝关节组织。采用番红 O-固 绿染色及 OARSI 评分评估小鼠膝关节软骨病变程度；免疫组织化学染色法检测小鼠膝关节中缺氧诱导因子 1α （HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、Ⅱ型胶原蛋白（COL2）阳性细胞表达情况。结果 （1）获得 At-1 治疗 KOA 的潜在作用靶点 49 个，其中 AKT1、IL-6、TNF、VEGF 为其治疗 KOA 的核心靶点。At-1 治疗 KOA 的 机制涉及 AGE-RAGE 信号通路、C 型凝集素受体信号通路、HIF-1α 信号通路、VEGF 信号通路、PI3K-AKT 信号通路等。分子对接显示，At-1 与核心靶点之间的结合活性良好。（2）动物实验验证结果显示，与对照组比 较，模型组小鼠膝关节组织表面软骨不规则、粗糙、损伤、缺陷，软骨细胞数量减少，潮线消失；与模型组比 较，At-1 组小鼠的关节软骨结构更为规则，软骨缺损深度更小，软骨细胞数量增加。与对照组比较，模型组 小鼠膝关节组织 HIF-1α、VEGF 阳性面积比及 OARSI 评分明显增加（P＜0.01），COL2 阳性面积比明显减少 （P＜0.01）。与模型组比较，At-1 组小鼠膝关节组织中 HIF-1α、VEGF 阳性面积比及 OARSI 评分明显减少 （P＜0.05），COL2 阳性面积比明显增多（P＜0.01）。结论 At-1 可能是通过作用于 AKT1、IL-6、TNF、VEGF、 HIF-1α 等核心靶点，调节 HIF-1α/VEGF 信号通路促进软骨细胞生成和软骨修复，从而发挥治疗 KOA 的作用。

Abstract:

目的 通过网络药理学结合体外实验探讨蒲葵子治疗脑胶质瘤的潜在作用机制。方法 （1）通过文献检 索和中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）获取蒲葵子的作用靶点；利用 GeneCards 数据库收集脑胶质瘤 相关靶点，并取二者交集获得蒲葵子治疗脑胶质瘤的潜在作用靶点。采用 Cytoscape 3.9.1 软件、STRING 数据 库分别构建“中药-活性成分-靶点”网络、蛋白互作（PPI）网络，筛选出蒲葵子治疗脑胶质瘤的关键活性成分 及关键靶点。使用 R 语言包对交集靶点进行 GO 功能和 KEGG 通路富集分析，并进行关键活性成分与关键靶 点的分子对接验证。（2）采用 CCK-8 法筛选蒲葵子醇提取物的不同极性组分（正丁醇、乙酸乙酯、石油醚）干预 U251 脑胶质瘤细胞的药物浓度。在此基础上，将 U251 脑胶质瘤细胞分为对照组及正丁醇（101.2 µg·mL-1 ）、 乙酸乙酯（107.0 µg·mL-1 ）、石油醚（97.0 µg·mL-1 ）组。采用 Annexin V-FITC 流式细胞双染法评估细胞凋亡；荧 光法检测活性氧（ROS）水平；RT-qPCR 法检测细胞中原癌基因 MYC、原癌基因 JUN、血管内皮生长因子 A （VEGFA）、原癌基因 FOS、表皮生长因子（EGF）、缺氧诱导因子 1α（HIF-1α）及半胱天冬酶 9（Caspase-9）的 mRNA 表达水平；Western Blot 法检测细胞中 VEGFA、磷酸化蛋白激酶 B（p-AKT）、HIF-1α、Caspase-9 的蛋 白表达。结果 （1）共筛选出蒲葵子 17 种活性成分，获得 167 个潜在作用靶点。蒲葵子治疗脑胶质瘤关键活性 成分有芹菜素、大黄素、β-谷甾醇、异鼠李素和脱氢卡维丁等；关键靶点有 MYC、JUN、VEGFA、FOS、EGF 和 HIF-1α。GO 功能富集分析显示，其主要参与前体代谢产物与能量生成过程、线粒体蛋白复合物形成及鸟 苷核苷酸结合等过程。蒲葵子治疗脑胶质瘤主要涉及代谢通路、癌症形成、人类 T 细胞白血病病毒 1 型感染 等信号通路。分子对接结果显示，蒲葵子的关键活性成分与关键靶点具有较强的结合能力。（2）筛选出正丁醇 组、乙酸乙酯组及石油醚组的干预浓度分别为 101.2、107.0、97.0 µg·mL-1 。正丁醇组、乙酸乙酯组和石油醚 组的增殖指数均较对照组降低（P＜0.05，P＜0.01），ROS 相对荧光强度增强（P＜0.01）；正丁醇组、乙酸乙酯 组的细胞凋亡率升高（P＜0.01），而石油醚组有升高趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）。正丁醇组、乙酸乙 酯组、石油醚组细胞的 JUN、VEGFA、HIF-1α 的 mRNA 及 VEGFA、HIF-1α 的蛋白表达较对照组明显降低 （P＜0.05，P＜0.01），Caspase-9 的 mRNA 及蛋白表达升高（P＜0.05，P＜0.01）。正丁醇组、乙酸乙酯组细胞 MYC、FOS 的 mRNA、p-AKT 蛋白及正丁醇组细胞 EGF 的 mRNA 的表达水平较对照组显著降低（P＜0.05， P＜0.01）。而石油醚组细胞 MYC、FOS、EGF 的 mRNA、p-AKT 蛋白及乙酸乙酯组细胞 EGF mRNA 有降低的 趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 蒲葵子能通过多成分、多靶点、多通路协同发挥抗脑胶质瘤的 作用，其机制可能与作用于 MYC、JUN、VEGFA、FOS、EGF、HIF-1α 和 Caspase-9 等关键靶点，调控 PI3K/ AKT 信号通路、HIF-1α/VEGF 介导的血管生成通路等多个关键信号通路有关。

Abstract:

目的 基于琥珀酸脱氢酶（SDH）探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤（IR）大鼠氧化应激损伤的作用及机 制。方法 （1）采用人工文本挖掘方法筛选补阳还五汤的活性成分；利用 CB-Dock2 蛋白配体分子对接网站进 行活性成分与 SDH 靶点对接，考察二者的相互作用。（2）将雄性 SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、DMM 组、 补阳还五汤组、补阳还五汤+DMM 组。使用 LONGA 线栓法复制大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠模型。DMM 组于 MCAO 术前 15 min 给予 6 mg·kg-1丙二酸二甲酯（DMM，SDH 抑制剂）腹腔注射；补阳还五汤组在术后给予补阳 还五汤 16 g·kg-1灌胃，给药 2 次；补阳还五汤+DMM 组于术前 15 min 给予 6 mg·kg-1 DMM 腹腔注射，术后给 予补阳还五汤 16 g·kg-1灌胃（给药 2 次）。脑缺血再灌注 24 h 后，通过 Zea Longa 评分进行大鼠神经功能缺损 状况评价；通过横木行走测试来评估大鼠平衡协调能力；通过抓力测试来评估大鼠肢体力量；采用 TTC 染色 法检测脑梗死体积；通过脑组织含水量测定观察大鼠脑水肿情况；HE 染色法观察大鼠脑组织病理变化； Western Blot 法检测缺血侧脑组织 SDH 蛋白表达水平；免疫荧光法检测缺血侧边缘脑组织 SDH 表达水平； ELISA 法检测血清 SDH 含量；检测缺血侧脑组织中 SDH 活性及活性氧（ROS）含量。结果 （1）筛选出的 16 个 活性成分均与 SDH 具有一定亲和力（结合能均＜-5 kcal·mol-1 ），以大黄酚结合能力最好（结合能为-10.2 kcal·mol-1 ）， 欧当归内酯 A 次之（结合能为-10.1 kcal·mol-1 ）。（2）与假手术组比较，模型组大鼠神经行为学评分及横木行走测 试评分均显著升高（P＜0.01），抓力测试数值显著降低（P＜0.01）；脑梗死体积百分比显著增加（P＜0.01），脑 含水量显著升高（P＜0.01）；脑组织缺血侧皮质区部分呈疏松的网状结构，神经细胞排列紊乱、完整性被破坏 甚至萎缩、数量减少，核固缩、碎裂；缺血侧脑组织 SDH 蛋白表达显著上调（P＜0.01），SDH 阳性表达水平显 著升高（P＜0.01），SDH 活性显著升高（P＜0.01），ROS 含量显著升高（P＜0.01）；血清 SDH 含量显著增加（P＜ 0.01）。与模型组比较，各给药组大鼠的抓力测试数值显著升高（P＜0.05，P＜0.01），补阳还五汤组大鼠的神经 行为学评分及横木行走测试评分均明显降低（P＜0.05）；各给药组大鼠的脑梗死体积百分比显著降低（P＜ 0.01），脑含水量均显著降低（P＜0.01），脑组织病理损伤均明显减轻，神经细胞萎缩形态有所改善、数量增 多；各给药组大鼠缺血侧脑组织 SDH 蛋白表达均显著下调（P＜0.05，P＜0.01），SDH 阳性表达水平显著降低 （P＜0.01），SDH 活性显著降低（P＜0.01），ROS 含量显著降低（P＜0.01）；各给药组大鼠血清 SDH 含量显著降 低（P＜0.05，P＜0.01）。与 DMM 组比较，补阳还五汤组大鼠的抓力测试数值明显升高（P＜0.05）；脑梗死体积 百分比显著降低（P＜0.01）；脑组织神经细胞萎缩形态改善及数量增多情况更好；缺血侧脑组织 ROS 含量显著 降低（P＜0.01）。与补阳还五汤组比较，补阳还五汤+DMM 组大鼠的神经行为学评分、横木行走测试评分、抓 力测试数值、脑梗死体积百分比、脑含水量、脑组织的病理变化、缺血侧脑组织 ROS 含量均无明显变化（P＞ 0.05）。结论 补阳还五汤能够改善 IR 大鼠脑组织缺血区的病理损伤，降低脑水肿程度，具有脑保护作用，可 能与其抑制 SDH 的活性及表达，从而减轻 ROS 大量产生导致的氧化应激损伤有关。

Abstract:

目的 基于网络药理学及胆汁酸代谢组学探讨气滞胃痛颗粒治疗抑郁症的作用机制。方法 将雄性 SD 大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组（5.0 mg·kg-1 ）及气滞胃痛颗粒低、中、高剂量组（0.512、1.024、 2.048 g·kg-1 ），每组 10 只。采用慢性不可预知温和应激（CUMS）复制抑郁症大鼠模型。造模 5 周后，大鼠灌胃 给药，每日 1 次，持续 4 周，给药期间保持 CUMS 造模。采用行为学检测大鼠抑郁样表现，包括糖水偏好实 验、旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验，计算糖水偏好率、旷场实验总路程、开臂进入时间比、开 臂进入次数比及强迫游泳不动时间；HE 染色法观察肝脏组织病理变化；检测肝脏及血清谷丙转氨酶（ALT）、 谷草转氨酶（AST）水平；通过网络药理学方法预测气滞胃痛颗粒治疗抑郁症的潜在作用靶点，构建“中药-活 性成分-靶点”网络及潜在作用靶点蛋白互作（PPI）网络，筛选出关键活性成分及核心靶点；对气滞胃痛颗粒治 疗抑郁症的潜在作用靶点进行 GO 功能及 KEGG 通路富集分析；基于高效液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）建立 靶向胆汁酸代谢组学分析方法，对大鼠肝脏、血清、脑皮质组织的胆汁酸谱（24 种胆汁酸）进行绝对定量分析； qRT-PCR 法测定肝脏组织中胆汁酸合成、吸收、转运相关基因的表达水平。结果 （1）与正常组比较，模型组 大鼠的糖水偏好率、旷场实验总路程、开臂进入次数比、开臂进入时间比均显著降低或缩短（P＜0.01），强迫 游泳不动时间显著延长（P＜0.01）；肝脏组织中有少量炎症细胞浸润，血清 ALT、AST 水平无明显变化（P＞ 0.05），肝脏组织 ALT、AST 显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，气滞胃痛颗粒各剂量组大鼠的强迫游泳不动 时间显著缩短（P＜0.01），开臂进入时间比显著升高（P＜0.05，P＜0.01），气滞胃痛颗粒中、高剂量组大鼠的 糖水偏好率、开臂进入次数比显著升高（P＜0.05，P＜0.01），气滞胃痛颗粒低、高剂量组大鼠的旷场实验总路 程明显延长（P＜0.05）；气滞胃痛颗粒中剂量组大鼠的肝脏组织炎症细胞浸润减少，肝脏组织 ALT、AST 水平 显著降低（P＜0.05，P＜0.01）。（2）共获得气滞胃痛颗粒治疗抑郁症的潜在作用靶点 102 个；关键活性成分包括 山柰酚、槲皮素、异鼠李素、木犀草素、金圣草黄素、延胡索乙素等；筛选出 50 个核心靶点，包括 TNF、 AKT1、PPARG、NR1H4 等；潜在作用靶点主要参与调控神经配体受体相互作用、胆汁酸代谢通路、化学致癌 受体激活等信号通路。（3）与正常组比较，模型组大鼠肝脏中 CA、α-MCA、β-MCA、ω-MCA、HCA、T-CA 水平显 著降低（P＜0.05，P＜0.01），DCA、T-αMCA、G-CA、G-CDCA、G-DCA 水平显著升高（P＜0.05，P＜0.01）； 血清中 CA、α-MCA、β-MCA、ω-MCA、HCA、UDCA 水平显著降低（P＜0.05，P＜0.01），T-CA、T-HDCA、 G-CA、G-DCA、G-UDCA、G-LCA 显著升高（P＜0.05，P＜0.01）；脑皮质中 DCA 水平明显升高（P＜0.05）， 而 CDCA、UDCA 水平无明显变化（P＞0.05）。与模型组比较，气滞胃痛颗粒中剂量组大鼠肝脏中 α-MCA、 ω-MCA 水平显著升高（P＜0.01），MCA、DCA、T-αMCA、T-HDCA 水平显著降低（P＜0.05，P＜0.01）；血清 中 CA、α-MCA、β-MCA、HCA、T-CDCA 水平明显升高（P＜0.05），而 T-CA、G-CA、G-DCA、G-UDCA 水 平明显降低（P＜0.05）；气滞胃痛颗粒中剂量组大鼠脑皮质中 DCA 水平有降低趋势，但差异无统计学意义（P＞ 0.05）。（4）与正常组比较，模型组大鼠肝脏组织中 FXR、CYP7B1、CYP8B1 mRNA 表达水平显著升高（P＜0.05，P＜0.01），而 BSEP、MRP3、CYP27A1 mRNA 表达水平显著降低（P＜0.05，P＜0.01）。与模型组比较，气滞胃 痛颗粒中、高剂量组大鼠肝脏组织中 FXR mRMA 表达水平显著降低（P＜0.01），BSEP 表达水平显著升高（P＜ 0.05，P＜0.01）；气滞胃痛颗粒低剂量组大鼠肝脏组织中 CYP8B1 mRNA 表达水平明显降低（P＜0.05），气滞胃 痛颗粒中剂量组大鼠肝脏组织中 CYP7B1 mRNA 表达水平明显降低（P＜0.05），气滞胃痛颗粒高剂量组大鼠肝 脏组织中 MRP3 mRNA 表达水平显著升高（P＜0.01）。结论 气滞胃痛颗粒可能通过法尼醇 X 受体（FXR）调控 CUMS 诱导抑郁症大鼠的肝-血-脑胆汁酸稳态，发挥抗抑郁及保肝作用。

Abstract:

目的 建立小通草的多指标成分定量检测方法，构建化学计量学及 Logistic 回归模型，评价不同产地小 通草的质量。方法 收集 36 批小通草样品，以木犀草苷和白桦脂酸为内参物，采用一测多评（QAMS）法同步 测定小通草中表儿茶素、木犀草苷、大波斯菊苷、木犀草素、肉桂酸、羽扇豆醇、白桦脂醇、白桦脂酸、β- 谷甾醇、豆甾醇的含量，并对其总灰分和酸不溶性灰分进行检测。采用化学识别模式、Logistic 回归分析建立 小通草质量优劣评价模型，对不同产地小通草质量进行综合评价。结果 以木犀草苷和白桦脂酸为内参物时， 相对校正因子耐用性良好，相对保留时间值法可用于色谱峰定位。表儿茶素、木犀草苷、大波斯菊苷、木犀草 素、肉桂酸、羽扇豆醇、白桦脂醇、白桦脂酸、β-谷甾醇、豆甾醇在一定浓度范围内线性关系良好（r＞0.999 0）； 平均加样回收率为 96.91%～100.12%，RSD 为 0.90%～1.69%。外标法与 QAMS 法测定的结果比较，差异无统 计学意义 （P＞0.05）。化学识别模式结果显示，36 批小通草可分为 3 组，分别为 S1～S13、S14～S24、S25～ S36 组，有一定的产地差异；表儿茶素、肉桂酸、β-谷甾醇、木犀草苷和羽扇豆醇可能是影响小通草质量的差 异因子。因子分析法结果显示，36 批小通草的综合得分在-1.267～1.370 之间，其中 S28 综合得分最高。 Logistic 回归模型结果与因子分析法分析结果一致。结论 基于一测多评多指标成分定量联合化学计量学及 Logistic 回归模型可以有效评价不同产地小通草的质量，可为小通草质量控制提供更多科学依据。

Abstract:

目的 建立超快速液相色谱-串联质谱（UFLC-MS/MS）法同时测定加味西黄丸中 4 个胆汁酸成分（甘氨胆 酸、牛磺胆酸、胆酸和牛磺鹅去氧胆酸）含量。方法 采用 Shimadzu Shim-Pack XR-ODS 色谱柱（75 mm× 3.0 mm，2.2 µm），以 0.1% 甲酸水溶液（A）和乙腈溶液（B）作为流动相，梯度洗脱，流速 0.5 mL·min-1 ，柱温 35 ℃进行色谱分离；采用电喷雾离子源，负离子检测，多重反应监测模式进行加味西黄丸中胆汁酸成分的含 量检测。结果 加味西黄丸中甘氨胆酸、牛磺胆酸、胆酸和牛磺鹅去氧胆酸在一定浓度范围内与峰面积呈良好 的线性关系（r＞0.998 9）；甘氨胆酸、牛磺胆酸、胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的平均回收率范围为 98.80%～ 99.62%，RSD 均≤1.52%。6 批次加味西黄丸样品中甘氨胆酸、牛磺胆酸、胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的含量分别 为 0.064 7～0.076 2、0.083 7～0.096 6、0.605 0～0.681 8、0.003 5～0.004 1 mg·g-1 。结论 该测定方法具有简 便、快速、灵敏度高的优点，可为加味西黄丸的质量控制方法研究提供科学依据。

Abstract:

目的 建立同时测定泻青丸中 8 个成分（马钱苷酸、龙胆苦苷、栀子苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米 醇苷、羌活醇、异欧前胡素、大黄酚）含量的高效液相色谱（HPLC）方法。方法 采用 Shim-Pack Scepter-C18色 谱柱 （4.6 mm × 250 mm，5 µm）；以甲醇-乙腈（4∶1）混合溶液-0.1% 磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速 1.0 mL·min-1 ；柱温 35 ℃，进样量 10 µL。切换波长检测泻青丸中马钱苷酸、龙胆苦苷、栀子苷、升麻素苷、 5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素、大黄酚的含量。结果 马钱苷酸、龙胆苦苷、栀子苷、升麻 素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素、大黄酚在相应的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关 系（r ≥ 0.999 6）；重复性、稳定性和精密度试验的 RSD 均＜2%。泻青丸中 8 个成分的加样回收率为 97.71%～ 104.86%，RSD 为 0.70%～2.11%。6 批泻青丸样品中马钱苷酸、龙胆苦苷、栀子苷、升麻素苷、5-O-甲基维 斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素、大黄酚含量范围分别为 0.385 5～0.557 5、1.831 5～3.409 0、3.141 3～ 4.015 7、0.276 0～0.569 3、0.376 9～0.534 0、0.100 3～0.414 2、0.294 0～0.760 4、0.467 0～0.734 3 mg·g-1 。 结论 该研究所建立的方法简单、准确，可用于泻青丸的质量控制与评价。

Abstract:

目的 观察益肝化瘀颗粒治疗肝郁脾虚型慢性乙型肝炎（乙肝）肝纤维化的临床疗效。方法 收集 2024 年 4 月至 2024 年 11 月就诊于北京中医药大学深圳医院（龙岗）的肝郁脾虚型乙肝肝纤维化患者共 61 例，按照随 机数字表法分为对照组（31 例）和观察组（30 例）。对照组给予恩替卡韦分散片口服，500 µg/次，1 日 1 次，连续 12 周。观察组在对照组治疗基础上，给予益肝化瘀颗粒冲服，20 g/次，1 日 3 次，连续 12 周。根据中医症状 积分计算疗效指数，作为临床疗效指标。观察指标包括（1）肝功能指标：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸 氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）；（2）肝纤四项：透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原 N 端肽 （PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CⅣ）；（3）肝脏硬度值（LSM）；（4）中医症状评分：主症“胁痛”“纳差”“精神抑郁”及 次症“乏力”。结果 观察组的总有效率为 90.00%（27/30），明显高于对照组的 65.51%（20/31），差异有统计学 意义（P＜0.05）。治疗后，两组患者的 ALT、AST、CⅣ、LN、HA、PⅢNP、LSM 水平及胁痛、纳差、乏力、 精神抑郁评分均明显低于治疗前（P＜0.05），且观察组明显低于对照组（P＜0.05）；治疗后对照组的 TBIL 水平 无明显变化（P＞0.05），但观察组的 TBIL 水平明显降低（P＜0.05），且明显低于对照组（P＜0.05）。结论 益肝 化瘀颗粒联合恩替卡韦分散片治疗肝郁脾虚型乙肝肝纤维化疗效确切，可明显改善肝功能，降低肝纤四项水平 及肝脏硬度值，缓解患者临床症状，其疗效较单独使用恩替卡韦抗病毒更优。

Abstract:

目的 探讨李晶教授治疗食管鳞状细胞癌（ESCC）的用药规律，以及核心药物的作用机制与活性成分。 方法 （1）数据挖掘：应用数据挖掘分析李晶教授治疗食管鳞状细胞癌的组方规律及核心药物。（2）网络药理学： 根据前期研究通过超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）鉴定出的核心 药物石见穿的有效成分，在中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）和 SwissTargetPrediction 数据库中筛选 有效成分靶点，使用 R 语言分析 GEO 数据库中食管鳞状细胞癌组织与正常组织差异基因，对药物成分靶点与 差异基因取交集进行蛋白质相互作用（PPI）、基因本体（GO）分析、基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析。 利用 R 语言对核心靶点进行表达差异、预后以及基因共表达分析。使用 OSIRIS 软件对核心活性成分进行毒性 预测，并使用分子对接与分子动力学模拟检测核心活性成分与核心靶点体系稳定性。（3）实验验证：取 30 只 6～8 周龄雌性 C57BL/6J 小鼠，随机分为对照组、模型组、石见穿组（4.55 g·kg-1 ·d-1 ），每组 10 只。采用 4-硝 基喹啉-N-氧化物（4NQO）建立小鼠食管鳞状细胞癌模型。模型复制第 16 周开始灌胃相应药物，连续 16 周。 干预结束后，取小鼠食管组织，进行苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠食管组织病理变化，免疫组化染色观察食 管组织中白细胞介素 17A（IL-17A）、核因子 κB（NF-κB）与基质金属蛋白酶 9（MMP9）蛋白的表达，ELISA 法检测 血清中 IL-17A、肿瘤坏死因子 α（TNF-α）与转化生长因子 β（TGF-β）的含量，临床化学分析仪分析小鼠血液生 化指标，实时荧光 PCR 法分析食管组织中 IL-17A、NF-κB 以及 MMP9 mRNA 的表达。结果 李晶教授治疗食 管鳞状细胞癌的常用中药处方为启膈散，石见穿为核心药物。石见穿治疗食管鳞状细胞癌的核心活性成分为槲 皮素、山柰酚、柚皮素和甘草素，核心靶点 MMP9、基质金属蛋白酶 1（MMP1）、花生四烯酸 12-脂氧合酶 （ALOX12）、纤溶酶原激活因子（PLAU）、基质金属蛋白酶 3（MMP3）、细胞周期蛋白依赖性激酶 1（CDK1）与食 管鳞状细胞癌发生发展密切相关。体内实验说明石见穿可以抑制食管鳞状细胞癌疾病进展，减轻炎症，抑制 IL-17A/NF-κB/MMP9 相关基因与蛋白表达。结论 李晶教授治疗食管鳞状细胞癌的核心药物石见穿通过 IL-17A/ NF-κB/MMP9 通路发挥治疗作用。

Abstract:

目的 运用数据挖掘与网络药理学方法，解析国家授权中药专利复方治疗慢性萎缩性胃炎（CAG）的配伍 规律及作用原理。方法 从国家知识产权局专利库筛选慢性萎缩性胃炎中药治疗专利复方，借助 Excel 2021、 SPSS Statistics 26.0 及 SPSS Modeler 18.0 进行频数统计、关联规则挖掘与系统聚类分析，总结用药特征并提取 核心药对；进一步通过网络药理学探究核心药对治疗慢性萎缩性胃炎的活性成分及靶点，结合分子对接验证结 合活性。结果 共纳入 207 项慢性萎缩性胃炎中药专利复方，涵盖 293 种中药，高频用药集中于清热类、补益 类、理气类及活血化瘀类，前五位为炙甘草、白术、白芍、黄芪、茯苓，药性以温为主，苦甘辛居多，主归 肝、脾、胃、肺经；关联规则识别出白术-茯苓、白术-茯苓-炙甘草、白术-党参-茯苓等药物组合，聚类分析 获得黄连-半夏等 7 类新聚类，确定白术-茯苓为核心药对；网络药理学揭示该药对含 14-乙酰基-12-千里光酰 基-8-顺式折术三醇、12-千里光酰基-8-反式白术三醇等活性成分，作用于 AKT1、ERBB2、EGFR 等关键靶 点，调控 PI3K-Akt、ErbB 等通路；分子对接证实啤酒甾醇（Cerevisterol）与 MTOR 结合能最优。结论 慢性萎 缩性胃炎中药专利复方以清热补虚、理气活血为治则，白术-茯苓核心药对通过干预 MTOR 等靶点，调节 PI3K-Akt 与 ErbB 等信号通路发挥治疗效应。

Abstract:

目的 探究细胞因子信号转导抑制因子 3（SOCS3）的 DNA 甲基化对氧糖剥夺/复氧复糖（OGD/R）所致 BV-2 小胶质细胞炎性反应的作用及其调控机制。方法 利用小鼠 BV-2 小胶质细胞系制备 OGD/R 模型，细胞分 为对照组、OGD（2 h）/R（3、6、12 h）组、5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycytidine，5-Aza-CdR）（10 µmol·L-1 ） 干预的 OGD（2 h）/R（6、12 h）组。对照组利用含糖 OGD 溶液和 DMEM 高糖培养基分别培养 3、6、12 h； OGD/R 模型利用 OGD 溶液和缺氧装置培养 2 h，DMEM 高糖培养基继续培养 3、6、12 h；5-Aza-CdR 干预组 用 5-Aza-CdR 预处理 0.5 h，后续全程进行给药处理。观察细胞形态学变化，采用 CCK-8 测定法检测细胞存 活率；ELISA 法检测上清液 IL-1β、TNF-α 含量；实时荧光定量 PCR（qPCR）法检测肿瘤坏死因子（TNF-α）、 白细胞介素 1β（IL-1β）、白细胞介素 6（IL-6）、SOCS3、酪氨酸蛋白激酶（JAK2）、信号传导和转录激活因子 3 （STAT3）、DNA 甲基转移酶 1（DNMT1）、DNA 甲基转移酶 3a（DNMT3a）、DNA 甲基转移酶 3b（DNMT3b） mRNA 的表达变化；蛋白免疫印记法检测 OGD/R 损伤对 BV-2 细胞中 DNMT1 蛋白水平的影响，并进行表达水 平的相关性分析。结果 经 OGD/R 诱导损伤的 BV-2 细胞形态由静息状态变为活化状态，5-Aza-CdR 干预后， 细胞的形态变化有所恢复并且能够提高细胞的存活率（P＜0.01）；OGD/R 诱导损伤的 BV-2 细胞上清液中主要 炎症因子 IL-1β、TNF-α 表达明显升高（P＜0.01）。炎症因子 IL-1β、IL-6、TNF-α 的 mRNA 表达在 OGD（2 h）/R （12 h）达到高峰（P＜0.01）；JAK2 与 STAT3 mRNA 的表达均呈现先降低后升高的趋势，两者均在 OGD（2 h）/R（12 h）达到表达高峰（P＜0.05，P＜0.01）；SOCS3 mRNA 的表达在 OGD（2 h）/R（6 h）达到高峰（P＜0.01）， 在 OGD（2 h）/R （12 h）有所升高（P＜0.05），与 JAK2、STAT3、炎症因子随复氧复糖时间变化的表达量变化呈 相反趋势；5-Aza-CdR 干预后，与 OGD/R 组比较，OGD（2 h）/R （12 h）+5-Aza-CdR组细胞中炎症因子 IL-1β、 IL-6、TNF-α 及 JAK2、STAT3 mRNA 的表达明显降低（P＜0.05，P＜0.01），而 SOCS3 mRNA 的表达明显升高 （P＜0.01）。OGD/R 诱导损伤后，DNMT1 mRNA 的表达与对照组比较呈现先降低后升高的趋势（P＜0.01）；5- Aza-CdR 干预后，OGD（2 h）/R（6 h）+5-Aza-CdR 组 DNMT1 的 mRNA 表达无明显变化（P＞0.05），OGD（2 h）/ R （12 h）+5-Aza-CdR组 DNMT1 mRNA 及蛋白表达水平明显降低（P＜0.01，P＜0.05）；OGD/R 诱导损伤后，细 胞中 SOCS3 与 DNMT1 的表达呈现明显的负相关（P＜0.05）。结论 经 OGD/R 诱导损伤的 BV-2 小胶质细胞 SOCS3 的基因表达受到 DNMT1 介导的 DNA 甲基化的调控，进而负向调节 JAK2/STAT3 信号通路，导致 BV-2 小胶质细胞炎症反应的发展。

Abstract:

中医传统药用昆虫美洲大蠊（Periplaneta americana）因其丰富的药理活性逐渐成为抗炎研究的热点。美洲 大蠊提取物及其活性成分包括肽类、氨基酸、多糖、香豆素类化合物等具有显著的抗炎作用。其作用机制包括 调控免疫细胞、调控一氧化氮（NO）及其合酶活性、抑制线粒体功能障碍、调节肠道菌群、调控炎症细胞因子 等，NF-κB、MAPK、JAK/STAT 等经典信号通路在其抗炎作用中发挥了关键作用。该结果可为美洲大蠊的临 床应用及抗炎药物研发提供参考。