2014年第25卷第5期文章目次
2014, 25(5):523-526.
摘要:
目的 观察党参黄酮提取部位对小肠上皮细胞（IEC-6）迁移及迁移过程细胞内多胺（精脒）含量的影响。方法 划痕法复制细胞迁移模型，观察在多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸（DFMO）及钾通道抑制剂4-氨基吡啶（4-AP）负荷下，党参黄酮提取部位对细胞迁移的影响；柱前衍生-高效液相色谱法检测给予党参黄酮提取部位12 h和24 h后细胞内精脒的含量。结果 党参黄酮提取部位可促进IEC-6细胞迁移，逆转DFMO或4-AP所致细胞迁移抑制；党参黄酮提取部位给药12 h和24 h后可提高细胞内精脒含量。结论 党参黄酮提取部位促进细胞迁移的作用与影响多胺调控信号通路有关。
目的 观察党参黄酮提取部位对小肠上皮细胞（IEC-6）迁移及迁移过程细胞内多胺（精脒）含量的影响。方法 划痕法复制细胞迁移模型，观察在多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸（DFMO）及钾通道抑制剂4-氨基吡啶（4-AP）负荷下，党参黄酮提取部位对细胞迁移的影响；柱前衍生-高效液相色谱法检测给予党参黄酮提取部位12 h和24 h后细胞内精脒的含量。结果 党参黄酮提取部位可促进IEC-6细胞迁移，逆转DFMO或4-AP所致细胞迁移抑制；党参黄酮提取部位给药12 h和24 h后可提高细胞内精脒含量。结论 党参黄酮提取部位促进细胞迁移的作用与影响多胺调控信号通路有关。
2014, 25(5):527-531.
摘要:
目的 研究三味干姜散对慢性肝损伤大鼠核因子NF-E2相关因子（Nrf2）、BTB-CNC同源体1（Bach1）表达的影响，初步探讨三味干姜散调节机体氧化应激抗肝损伤的作用机制。方法 以四氯化碳（CCl4）诱导慢性肝损伤大鼠模型，灌胃给予三味干姜散（660 mg·kg-1）6周，测定大鼠肝脏、脾脏和胸腺指数；苏木精-伊红（HE）染色法观察肝脏病理变化；检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST），肝组织匀浆中丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性；Western-Blot法测检Nrf2、Bach1、细胞核内与胞浆蛋白、血红素氧合酶1（HO-1）总蛋白；实时RT-PCR法检测Nrf2、Bach1和HO-1 mRNA水平。结果 三味干姜散能改善CCL4所致肝损伤的病理表现，降低血清ALT、AST水平和肝组织匀浆MDA水平，提升GSH-PX活性（P＜0.01，P＜0.05）；提高Nrf2核转位率与核Nrf2/Bach1比值，提高Nrf2的蛋白及mRNA的表达，降低Bach1蛋白及mRNA的表达，并使HO-1 mRNA及总蛋白水平提高（P＜0.01）。结论 三味干姜散可通过改变Nrf2核转位率与核Nrf2/Bach1比值调控Nrf2与Bach1在肝细胞中的表达，促进机体氧化应激的调节与抗肝损伤。
目的 研究三味干姜散对慢性肝损伤大鼠核因子NF-E2相关因子（Nrf2）、BTB-CNC同源体1（Bach1）表达的影响，初步探讨三味干姜散调节机体氧化应激抗肝损伤的作用机制。方法 以四氯化碳（CCl4）诱导慢性肝损伤大鼠模型，灌胃给予三味干姜散（660 mg·kg-1）6周，测定大鼠肝脏、脾脏和胸腺指数；苏木精-伊红（HE）染色法观察肝脏病理变化；检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST），肝组织匀浆中丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性；Western-Blot法测检Nrf2、Bach1、细胞核内与胞浆蛋白、血红素氧合酶1（HO-1）总蛋白；实时RT-PCR法检测Nrf2、Bach1和HO-1 mRNA水平。结果 三味干姜散能改善CCL4所致肝损伤的病理表现，降低血清ALT、AST水平和肝组织匀浆MDA水平，提升GSH-PX活性（P＜0.01，P＜0.05）；提高Nrf2核转位率与核Nrf2/Bach1比值，提高Nrf2的蛋白及mRNA的表达，降低Bach1蛋白及mRNA的表达，并使HO-1 mRNA及总蛋白水平提高（P＜0.01）。结论 三味干姜散可通过改变Nrf2核转位率与核Nrf2/Bach1比值调控Nrf2与Bach1在肝细胞中的表达，促进机体氧化应激的调节与抗肝损伤。
2014, 25(5):532-535.
摘要:
目的 初步研究葛根素与牛磺酸配伍对红细胞膜稳定性、膜流动性及形态影响。方法 采用体外溶血实验，比较葛根素与牛磺酸配伍前后红细胞溶血的程度；采用荧光染料技术，比较葛根素与牛磺酸配伍前后红细胞膜流动性的变化；体内试验以血细胞涂片观察葛根素与牛磺酸配伍前后对红细胞形态的影响。结果 葛根素能直接导致红细胞溶血，牛磺酸可抑制葛根素所致的溶血现象。葛根素能显著提高红细胞膜流动性，牛磺酸对葛根素此作用无明显影响。静脉注射葛根素可引起部分红细胞呈棘形，牛磺酸能抑制葛根素对红细胞形态的改变。结论 牛磺酸体外能对抗葛根素的溶血现象，体内可抑制葛根素诱导的红细胞形态异常。
目的 初步研究葛根素与牛磺酸配伍对红细胞膜稳定性、膜流动性及形态影响。方法 采用体外溶血实验，比较葛根素与牛磺酸配伍前后红细胞溶血的程度；采用荧光染料技术，比较葛根素与牛磺酸配伍前后红细胞膜流动性的变化；体内试验以血细胞涂片观察葛根素与牛磺酸配伍前后对红细胞形态的影响。结果 葛根素能直接导致红细胞溶血，牛磺酸可抑制葛根素所致的溶血现象。葛根素能显著提高红细胞膜流动性，牛磺酸对葛根素此作用无明显影响。静脉注射葛根素可引起部分红细胞呈棘形，牛磺酸能抑制葛根素对红细胞形态的改变。结论 牛磺酸体外能对抗葛根素的溶血现象，体内可抑制葛根素诱导的红细胞形态异常。
2014, 25(5):536-538.
摘要:
目的 观察华佗再造丸对大鼠心肌缺血再灌注所致心肌梗死的保护作用。方法 复制大鼠心肌缺血再灌注致心肌梗死模型，以硝基四氮唑蓝（N-BT）为染色剂，观察华佗再造丸对心肌梗死程度，并检测其对超氧化物岐化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的影响。结果 与模型组比较，华佗再造丸高、中、低剂量组能明显减轻心肌梗死程度，缩小梗死面积，降低梗死区质量，降低梗死区占心室及心脏百分比，差异均有统计学意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）；同时血清SOD活性升高，MDA含量降低，差异均有统计学意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。结论 华佗再造丸对心肌缺血所致心肌梗死有确切的保护作用，其机制与其抗氧自由基作用有关。
目的 观察华佗再造丸对大鼠心肌缺血再灌注所致心肌梗死的保护作用。方法 复制大鼠心肌缺血再灌注致心肌梗死模型，以硝基四氮唑蓝（N-BT）为染色剂，观察华佗再造丸对心肌梗死程度，并检测其对超氧化物岐化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的影响。结果 与模型组比较，华佗再造丸高、中、低剂量组能明显减轻心肌梗死程度，缩小梗死面积，降低梗死区质量，降低梗死区占心室及心脏百分比，差异均有统计学意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）；同时血清SOD活性升高，MDA含量降低，差异均有统计学意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。结论 华佗再造丸对心肌缺血所致心肌梗死有确切的保护作用，其机制与其抗氧自由基作用有关。
2014, 25(5):538-541.
摘要:
目的 观察补肾清毒方对HBV转基因小鼠外周血乙肝病毒DNA（HBV-DNA）、干扰素-γ（IFN-γ）及白介素-17A（IL-17A）的影响。方法 将50只HBV转基因小鼠随机分为模型组，补肾清毒方高、中、低剂量组，拉米夫定组，另取10只非HBV转基因小鼠为正常对照组。采用荧光定量PCR方法检测药物干预前后小鼠外周血HBV-DNA水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测药物干预前后小鼠血清IL-17A及IFN-γ的水平。结果 与正常对照组比较，模型组IL-17A显著升高（P＜ 0.01），IFN-γ也明显升高（P＜ 0.05）。与模型组比较，各药物干预组小鼠血清IL-17A水平不同程度降低（P＜ 0.01），其中以补肾清毒方高剂量组和中剂量组降幅最为明显（P＜ 0.01），并且随用药时间的延长IL-17A水平进一步降低；各药物干预组血清IFN-γ水平升高（P＜ 0.05），其中以补肾清毒方高、中剂量组升高最为显著（P＜ 0.01），且随用药时间延长有所提高。与模型组比较，各药物干预组小鼠外周血HBV-DNA变化不大（P ＞ 0.05）。结论 补肾清毒方对乙肝有一定的治疗作用，其作用机理可能与升高IFN-γ水平、降低IL-17A表达有关。
目的 观察补肾清毒方对HBV转基因小鼠外周血乙肝病毒DNA（HBV-DNA）、干扰素-γ（IFN-γ）及白介素-17A（IL-17A）的影响。方法 将50只HBV转基因小鼠随机分为模型组，补肾清毒方高、中、低剂量组，拉米夫定组，另取10只非HBV转基因小鼠为正常对照组。采用荧光定量PCR方法检测药物干预前后小鼠外周血HBV-DNA水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测药物干预前后小鼠血清IL-17A及IFN-γ的水平。结果 与正常对照组比较，模型组IL-17A显著升高（P＜ 0.01），IFN-γ也明显升高（P＜ 0.05）。与模型组比较，各药物干预组小鼠血清IL-17A水平不同程度降低（P＜ 0.01），其中以补肾清毒方高剂量组和中剂量组降幅最为明显（P＜ 0.01），并且随用药时间的延长IL-17A水平进一步降低；各药物干预组血清IFN-γ水平升高（P＜ 0.05），其中以补肾清毒方高、中剂量组升高最为显著（P＜ 0.01），且随用药时间延长有所提高。与模型组比较，各药物干预组小鼠外周血HBV-DNA变化不大（P ＞ 0.05）。结论 补肾清毒方对乙肝有一定的治疗作用，其作用机理可能与升高IFN-γ水平、降低IL-17A表达有关。
2014, 25(5):542-546.
摘要:
目的 观察附子配伍不同比例大黄对附子毒性和药效的影响。方法 ICR小鼠，40 mL·kg-1体质量灌胃给药，平行比较附子和附子配伍大黄的急性毒性，测定其半数致死量（LD50）；SD大鼠10 mL·kg-1体质量灌胃给药，平行比较附子和附子配伍大黄的心脏毒性；采用高效液相色谱法测定附子与大黄配伍前后乌头类生物碱成分的含量；通过小鼠耳肿胀试验、醋酸扭体试验和回阳救逆试验考察附子配伍大黄对附子药效的影响。结果 随着大黄配伍比例的增高，附子急性毒性LD50有增加趋势，大黄对附子心脏心律失常抑制率逐渐增大，附子配伍大黄后主要乌头类生物碱成分含量降低，但附子配伍大黄后对附子抗炎、镇痛和回阳救逆药效无明显影响。结论 大黄对附子毒性具有剂量依赖性拮抗作用，大黄配伍附子在减轻附子毒性的同时不影响附子的药效，附子配伍大黄减毒时应该考虑大黄的配伍比例。
目的 观察附子配伍不同比例大黄对附子毒性和药效的影响。方法 ICR小鼠，40 mL·kg-1体质量灌胃给药，平行比较附子和附子配伍大黄的急性毒性，测定其半数致死量（LD50）；SD大鼠10 mL·kg-1体质量灌胃给药，平行比较附子和附子配伍大黄的心脏毒性；采用高效液相色谱法测定附子与大黄配伍前后乌头类生物碱成分的含量；通过小鼠耳肿胀试验、醋酸扭体试验和回阳救逆试验考察附子配伍大黄对附子药效的影响。结果 随着大黄配伍比例的增高，附子急性毒性LD50有增加趋势，大黄对附子心脏心律失常抑制率逐渐增大，附子配伍大黄后主要乌头类生物碱成分含量降低，但附子配伍大黄后对附子抗炎、镇痛和回阳救逆药效无明显影响。结论 大黄对附子毒性具有剂量依赖性拮抗作用，大黄配伍附子在减轻附子毒性的同时不影响附子的药效，附子配伍大黄减毒时应该考虑大黄的配伍比例。
2014, 25(5):546-552.
摘要:
目的 建立具有绿色荧光蛋白（GFP）示踪功能的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因/更昔洛韦自杀基因系统（HSV1-tkGFP/GCV），并检测该系统对小鼠黑色素瘤的抑制作用。方法 将阳性重组质粒pLXSN-tkGFP和pLXSN-DsRed2分别转染B16细胞，加G418进行筛选。用GCV（5，50，500 μmol·L-1）杀伤实验验证tk基因的表达。四甲基偶氮唑盐（MTT）法和荧光示踪法验证该系统存在旁杀伤效应。将B16-tkGFP和B16-RFP细胞按1∶1混合，接种于C57BL/6J小鼠进行肿瘤模型复制，随机分为模型组和GCV（50 mg·kg-1·d-1）组，腹腔注射给药，每3 d检测1次肿瘤大小（n=14）。结果 成功获得能发出绿色荧光的B16-tkGFP细胞和能发出红色荧光的B16-RFP细胞，且tk基因在B16-tkGFP细胞中表达正常。该系统存在一定的旁杀伤效应。与模型组比较，GCV组小鼠肿瘤生长受到明显抑制（P＜0.01）。结论 重组HSV1-tkGFP/GCV系统对小鼠黑色素瘤有明显抑制作用，并可实现直观检测其旁杀伤效应，为后续中药联合自杀基因疗法的研究奠定基础。
目的 建立具有绿色荧光蛋白（GFP）示踪功能的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因/更昔洛韦自杀基因系统（HSV1-tkGFP/GCV），并检测该系统对小鼠黑色素瘤的抑制作用。方法 将阳性重组质粒pLXSN-tkGFP和pLXSN-DsRed2分别转染B16细胞，加G418进行筛选。用GCV（5，50，500 μmol·L-1）杀伤实验验证tk基因的表达。四甲基偶氮唑盐（MTT）法和荧光示踪法验证该系统存在旁杀伤效应。将B16-tkGFP和B16-RFP细胞按1∶1混合，接种于C57BL/6J小鼠进行肿瘤模型复制，随机分为模型组和GCV（50 mg·kg-1·d-1）组，腹腔注射给药，每3 d检测1次肿瘤大小（n=14）。结果 成功获得能发出绿色荧光的B16-tkGFP细胞和能发出红色荧光的B16-RFP细胞，且tk基因在B16-tkGFP细胞中表达正常。该系统存在一定的旁杀伤效应。与模型组比较，GCV组小鼠肿瘤生长受到明显抑制（P＜0.01）。结论 重组HSV1-tkGFP/GCV系统对小鼠黑色素瘤有明显抑制作用，并可实现直观检测其旁杀伤效应，为后续中药联合自杀基因疗法的研究奠定基础。
2014, 25(5):552-555.
摘要:
目的 研究芍苓汤对心得安豚鼠模型的影响及对脂多糖（LPS）诱导人永久分化表皮角质细胞（HaCaT细胞）产生炎症因子IL-6、IL-17A和IL-22 mRNA表达的调控作用。方法 以Baker评分法观测芍苓汤对豚鼠心得安模型的作用，实时荧光定量PCR（RT-Q-PCR）检测芍苓汤对LPS诱导HaCaT细胞IL-6、IL-17和IL-22 mRNA表达水平。结果 芍苓汤能够显著改善心得安诱发豚鼠的银屑病样病变，并显著下调LPS诱导的IL-6 mRNA表达。结论 芍苓汤具有治疗银屑病的药效，其作用机制与下调IL-6 mRNA表达水平有关。
目的 研究芍苓汤对心得安豚鼠模型的影响及对脂多糖（LPS）诱导人永久分化表皮角质细胞（HaCaT细胞）产生炎症因子IL-6、IL-17A和IL-22 mRNA表达的调控作用。方法 以Baker评分法观测芍苓汤对豚鼠心得安模型的作用，实时荧光定量PCR（RT-Q-PCR）检测芍苓汤对LPS诱导HaCaT细胞IL-6、IL-17和IL-22 mRNA表达水平。结果 芍苓汤能够显著改善心得安诱发豚鼠的银屑病样病变，并显著下调LPS诱导的IL-6 mRNA表达。结论 芍苓汤具有治疗银屑病的药效，其作用机制与下调IL-6 mRNA表达水平有关。
2014, 25(5):556-559.
摘要:
目的 确定柴胡加龙骨牡蛎汤改善围绝经期睡眠的有效部位及最佳给药剂量。方法 以去卵巢合并电刺激小鼠为动物模型，观察柴胡加龙骨牡蛎汤水洗脱部位和不同浓度乙醇洗脱部位对戊巴比妥钠协同睡眠时间，以及对模型小鼠子宫系数和肾上腺系数的影响。结果 与模型组比，柴胡加龙骨牡蛎汤70%醇洗脱组（48 mg·kg-1）可以明显延长模型小鼠的睡眠时间（P＜0.01），增加模型小鼠的子宫系数（P＜0.05）。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤改善睡眠作用的有效部位为70 %醇洗脱部位，最佳给药剂量每天为48 mg·kg-1。
目的 确定柴胡加龙骨牡蛎汤改善围绝经期睡眠的有效部位及最佳给药剂量。方法 以去卵巢合并电刺激小鼠为动物模型，观察柴胡加龙骨牡蛎汤水洗脱部位和不同浓度乙醇洗脱部位对戊巴比妥钠协同睡眠时间，以及对模型小鼠子宫系数和肾上腺系数的影响。结果 与模型组比，柴胡加龙骨牡蛎汤70%醇洗脱组（48 mg·kg-1）可以明显延长模型小鼠的睡眠时间（P＜0.01），增加模型小鼠的子宫系数（P＜0.05）。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤改善睡眠作用的有效部位为70 %醇洗脱部位，最佳给药剂量每天为48 mg·kg-1。
2014, 25(5):559-564.
摘要:
目的 基于Ⅰ型胶原合成降解率探讨淫羊藿和女贞子配伍对大鼠骨质疏松模型的影响及可能机制。方法 取Wistar雄性大鼠60只，随机分为6组，即正常对照组、模型对照组、淫羊藿组（9.5 g·kg-1）、女贞子组（9.5 g·kg-1）、淫羊藿女贞子配伍组（淫羊藿∶女贞子=4∶3，9.5 g·kg-1）、雷洛昔芬阳性对照组（6.25 mg·kg-1），每组10只，自由饮水、摄食。除正常对照组外，其余各组大鼠均用0.5 % 羧甲基纤维素钠（CMC-Na）配成的维甲酸混悬液按70 mg·kg-1灌胃，正常对照组大鼠以0.5 % CMC-Na灌胃，连续造模2周。在模型复制的同时，各组动物灌胃给予相应的药物，正常对照组和模型对照组给予等量的生理盐水灌胃，每日1次，共3周。检测骨密度、生物力学、血清骨钙素（BGP）及Ⅰ型前胶原氨基端前肽（PINP）、Ⅰ型前胶原羧基端前肽（PICP）、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽（ICTP）水平，并对实验数据进行相关性分析。结果 与正常对照组比较，模型对照组大鼠骨密度和生物力学性能显著下降（P＜ 0.01），BGP含量及PINP、PICP、ICTP水平显著升高（P＜ 0.05，P＜ 0.01）；与模型对照组比较，淫羊藿女贞子配伍可显著升高骨密度（P＜ 0.01），增强骨生物力学性能（P＜ 0.01），下调血清BGP及PINP、PICP、ICTP水平（P＜ 0.05）；相关性分析结果显示骨密度、生物力学性能与反映Ⅰ型胶原合成降解率的各指标间存在显著负相关（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。结论 Ⅰ型胶原合成降解率的加快与骨质疏松的发生密切相关，淫羊藿女贞子配伍对Ⅰ型胶原代谢水平的调节作用可能是其防治骨质疏松症的机制之一。
目的 基于Ⅰ型胶原合成降解率探讨淫羊藿和女贞子配伍对大鼠骨质疏松模型的影响及可能机制。方法 取Wistar雄性大鼠60只，随机分为6组，即正常对照组、模型对照组、淫羊藿组（9.5 g·kg-1）、女贞子组（9.5 g·kg-1）、淫羊藿女贞子配伍组（淫羊藿∶女贞子=4∶3，9.5 g·kg-1）、雷洛昔芬阳性对照组（6.25 mg·kg-1），每组10只，自由饮水、摄食。除正常对照组外，其余各组大鼠均用0.5 % 羧甲基纤维素钠（CMC-Na）配成的维甲酸混悬液按70 mg·kg-1灌胃，正常对照组大鼠以0.5 % CMC-Na灌胃，连续造模2周。在模型复制的同时，各组动物灌胃给予相应的药物，正常对照组和模型对照组给予等量的生理盐水灌胃，每日1次，共3周。检测骨密度、生物力学、血清骨钙素（BGP）及Ⅰ型前胶原氨基端前肽（PINP）、Ⅰ型前胶原羧基端前肽（PICP）、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽（ICTP）水平，并对实验数据进行相关性分析。结果 与正常对照组比较，模型对照组大鼠骨密度和生物力学性能显著下降（P＜ 0.01），BGP含量及PINP、PICP、ICTP水平显著升高（P＜ 0.05，P＜ 0.01）；与模型对照组比较，淫羊藿女贞子配伍可显著升高骨密度（P＜ 0.01），增强骨生物力学性能（P＜ 0.01），下调血清BGP及PINP、PICP、ICTP水平（P＜ 0.05）；相关性分析结果显示骨密度、生物力学性能与反映Ⅰ型胶原合成降解率的各指标间存在显著负相关（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。结论 Ⅰ型胶原合成降解率的加快与骨质疏松的发生密切相关，淫羊藿女贞子配伍对Ⅰ型胶原代谢水平的调节作用可能是其防治骨质疏松症的机制之一。
2014, 25(5):564-567.
摘要:
目的 研究齐墩果酸（OA）对血管紧张素II（Ang II）诱导的大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响，并探讨其可能的作用机制。方法 采用胰酶消化法及差速贴壁法培养大鼠CFs，实验分为空白对照组、Ang II（10-6 mol·L-1）组、Ang II（10-6 mol·L-1）+OA（60，80，100 μmol·L-1）组。细胞长至融合状态时，先加入OA（60，80， 100 μmol·L-1）预处理1 h，然后加入Ang II（10-6 mol·L-1）作用24 h。应用二甲基四唑氮蓝（MTT）法测定细胞增殖活性，酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞上清中I型胶原含量，蛋白质印迹法（Western blotting）和激光扫描共聚焦显微镜分别检测各组CFs中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）蛋白表达和活性氧（ROS）变化。结果 Ang II能诱导CFs增殖，并能增加细胞上清中I型胶原的含量，同时CTGF的蛋白表达及CFs中ROS水平也显著增加。OA在60~100 μmol·L-1浓度范围内呈浓度依赖性抑制Ang II诱导的CFs增殖，并且OA能减弱Ang II诱导的CTGF和ROS表达。结论 OA可通过ROS-CTGF途径抑制Ang II诱导的CFs增殖和胶原生成。
目的 研究齐墩果酸（OA）对血管紧张素II（Ang II）诱导的大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响，并探讨其可能的作用机制。方法 采用胰酶消化法及差速贴壁法培养大鼠CFs，实验分为空白对照组、Ang II（10-6 mol·L-1）组、Ang II（10-6 mol·L-1）+OA（60，80，100 μmol·L-1）组。细胞长至融合状态时，先加入OA（60，80， 100 μmol·L-1）预处理1 h，然后加入Ang II（10-6 mol·L-1）作用24 h。应用二甲基四唑氮蓝（MTT）法测定细胞增殖活性，酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞上清中I型胶原含量，蛋白质印迹法（Western blotting）和激光扫描共聚焦显微镜分别检测各组CFs中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）蛋白表达和活性氧（ROS）变化。结果 Ang II能诱导CFs增殖，并能增加细胞上清中I型胶原的含量，同时CTGF的蛋白表达及CFs中ROS水平也显著增加。OA在60~100 μmol·L-1浓度范围内呈浓度依赖性抑制Ang II诱导的CFs增殖，并且OA能减弱Ang II诱导的CTGF和ROS表达。结论 OA可通过ROS-CTGF途径抑制Ang II诱导的CFs增殖和胶原生成。
2014, 25(5):567-572.
摘要:
目的 从脑-肠互动的角度，探讨百合总皂苷、知母总皂苷、百合知母总皂苷治疗肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）的疗效及其作用机制。方法 采用慢性束缚应激刺激配合夹尾刺激制备IBS模型，将60只成年雄性SD大鼠，随机分为6组，即正常组、IBS模型组、得舒特组（15 mg·kg-1）、百合总皂苷组（100 mg·kg-1）、知母总皂苷组（220 mg·kg-1）及百合知母总皂苷组（240 mg·kg-1），每组10只。观察大鼠在2，4，6周时的排便粒数和腹部撤回反射（AWR）评分。采用HE染色、醛品红-橙黄G特殊染色，检测结肠组织病理学变化及肥大细胞数量，酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测大鼠血清降钙素基因相关肽（CGRP）、血管活性肠肽（VIP）含量的变化。结果 IBS模型组大鼠排便量增加，内脏敏感性增高，与正常组比较，差异有显著性意义（P＜0.01）；与IBS模型组比较，百合总皂苷组、知母总皂苷组、百合知母总皂苷组、得舒特组对IBS大鼠均有明显的治疗作用，使IBS模型大鼠结直肠部位肥大细胞数量以及血清CGRP、VIP的含量明显降低（P＜0.05，P＜0.01）。结论 百合总皂苷、知母总皂苷、百合知母总皂苷能减少IBS模型大鼠结直肠部位肥大细胞数量，降低血清CGRP、VIP的含量，从而对IBS起到一定的治疗作用。
目的 从脑-肠互动的角度，探讨百合总皂苷、知母总皂苷、百合知母总皂苷治疗肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）的疗效及其作用机制。方法 采用慢性束缚应激刺激配合夹尾刺激制备IBS模型，将60只成年雄性SD大鼠，随机分为6组，即正常组、IBS模型组、得舒特组（15 mg·kg-1）、百合总皂苷组（100 mg·kg-1）、知母总皂苷组（220 mg·kg-1）及百合知母总皂苷组（240 mg·kg-1），每组10只。观察大鼠在2，4，6周时的排便粒数和腹部撤回反射（AWR）评分。采用HE染色、醛品红-橙黄G特殊染色，检测结肠组织病理学变化及肥大细胞数量，酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测大鼠血清降钙素基因相关肽（CGRP）、血管活性肠肽（VIP）含量的变化。结果 IBS模型组大鼠排便量增加，内脏敏感性增高，与正常组比较，差异有显著性意义（P＜0.01）；与IBS模型组比较，百合总皂苷组、知母总皂苷组、百合知母总皂苷组、得舒特组对IBS大鼠均有明显的治疗作用，使IBS模型大鼠结直肠部位肥大细胞数量以及血清CGRP、VIP的含量明显降低（P＜0.05，P＜0.01）。结论 百合总皂苷、知母总皂苷、百合知母总皂苷能减少IBS模型大鼠结直肠部位肥大细胞数量，降低血清CGRP、VIP的含量，从而对IBS起到一定的治疗作用。
2014, 25(5):572-576.
摘要:
目的 研究胃疡宁丸在体内、体外抗幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，HP）的作用机制。方法 采用液体稀释法测定胃疡宁丸和阿莫西林对HP的最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration，MIC）。将BALB/c小鼠随机分为6组，即正常对照组、模型对照组、阿莫西林组（0.4 mg·g-1）及胃疡宁丸低、中、高剂量组（0.79， 1.58，3.16 g·kg-1·d-1）。采用抗生素加HP的方法，连续灌胃7 d，建立HP感染动物模型。从第11天开始，连续灌胃给药8周后处死小鼠，取胃黏膜和血清进行快速尿素酶测试、血清HP抗体检测以及病理切片检查。结果 液体稀释法测得胃疡宁丸最小MIC值为0.0416 g·mL-1；阿莫西林最小MIC值为0.00012 g·mL-1。快速尿素酶测试、血清幽门螺杆菌抗体检测、小鼠胃黏膜病理切片结果均提示HP感染动物模型复制成功，与正常对照组比较，差异有显著性意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。阿莫西林、胃疡宁丸高、中、低剂量组均能有效抑制体内HP的生长，与模型对照组比较，差异有显著性意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。结论 胃疡宁丸在体内和体外均能有效地抑制幽门螺旋杆菌的生长。
目的 研究胃疡宁丸在体内、体外抗幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，HP）的作用机制。方法 采用液体稀释法测定胃疡宁丸和阿莫西林对HP的最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration，MIC）。将BALB/c小鼠随机分为6组，即正常对照组、模型对照组、阿莫西林组（0.4 mg·g-1）及胃疡宁丸低、中、高剂量组（0.79， 1.58，3.16 g·kg-1·d-1）。采用抗生素加HP的方法，连续灌胃7 d，建立HP感染动物模型。从第11天开始，连续灌胃给药8周后处死小鼠，取胃黏膜和血清进行快速尿素酶测试、血清HP抗体检测以及病理切片检查。结果 液体稀释法测得胃疡宁丸最小MIC值为0.0416 g·mL-1；阿莫西林最小MIC值为0.00012 g·mL-1。快速尿素酶测试、血清幽门螺杆菌抗体检测、小鼠胃黏膜病理切片结果均提示HP感染动物模型复制成功，与正常对照组比较，差异有显著性意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。阿莫西林、胃疡宁丸高、中、低剂量组均能有效抑制体内HP的生长，与模型对照组比较，差异有显著性意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01）。结论 胃疡宁丸在体内和体外均能有效地抑制幽门螺旋杆菌的生长。
2014, 25(5):576-581.
摘要:
目的 探讨枳实总黄酮对肝郁脾虚型肠易激综合征（IBS）的治疗作用。方法 取SD大鼠32只，随机分为正常对照组、模型组、得舒特组（1.5 mg·kg-1）和枳实总黄酮组（3 g·kg-1），每组8只，采用乙酸灌肠刺激加慢性束缚夹尾的方法，建立肝郁脾虚型IBS大鼠模型，观察第0，7，14，21，28天不同阶段大鼠的体质量、排便数、敞箱运动、内脏敏感性、糖水消耗量水平变化以及血清一氧化氮（NO）水平和结、盲肠组织中肥大细胞（MC）数目的变化。结果 与正常对照组比较，模型组和给药组大鼠行为学及内脏敏感性，差异均有统计学意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01），表现为应激21 d，体质量增长缓慢，排便数逐渐增加，模型组和治疗组大鼠于第7，14，21，28 d排便数均高于相应阶段的正常对照组；糖水吸收量在不同阶段有波动，但模型复制21 d后，模型组、得舒特组、枳实总黄酮组大鼠蔗糖偏嗜度均低于正常对照组；内脏敏感性显著增加。给药治疗1周后，枳实总黄酮组和得舒特组大鼠排便数减少、糖水消耗量增加、活动增加、内脏敏感性降低；枳实总黄酮能提高模型大鼠血清NO的含量，并且减少模型大鼠结盲肠组织MC的数目。结论 枳实总黄酮对肝郁脾虚型IBS大鼠具有治疗作用。
目的 探讨枳实总黄酮对肝郁脾虚型肠易激综合征（IBS）的治疗作用。方法 取SD大鼠32只，随机分为正常对照组、模型组、得舒特组（1.5 mg·kg-1）和枳实总黄酮组（3 g·kg-1），每组8只，采用乙酸灌肠刺激加慢性束缚夹尾的方法，建立肝郁脾虚型IBS大鼠模型，观察第0，7，14，21，28天不同阶段大鼠的体质量、排便数、敞箱运动、内脏敏感性、糖水消耗量水平变化以及血清一氧化氮（NO）水平和结、盲肠组织中肥大细胞（MC）数目的变化。结果 与正常对照组比较，模型组和给药组大鼠行为学及内脏敏感性，差异均有统计学意义（P＜ 0.05，P＜ 0.01），表现为应激21 d，体质量增长缓慢，排便数逐渐增加，模型组和治疗组大鼠于第7，14，21，28 d排便数均高于相应阶段的正常对照组；糖水吸收量在不同阶段有波动，但模型复制21 d后，模型组、得舒特组、枳实总黄酮组大鼠蔗糖偏嗜度均低于正常对照组；内脏敏感性显著增加。给药治疗1周后，枳实总黄酮组和得舒特组大鼠排便数减少、糖水消耗量增加、活动增加、内脏敏感性降低；枳实总黄酮能提高模型大鼠血清NO的含量，并且减少模型大鼠结盲肠组织MC的数目。结论 枳实总黄酮对肝郁脾虚型IBS大鼠具有治疗作用。
2014, 25(5):582-585.
摘要:
目的 探讨没食子酸丙酯（propyl gallate，PG，赤芍801）对H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）氧化损伤的影响及其作用机制。方法 将SH-SY5Y细胞均分为对照组、H2O2模型组、PG1组、PG2组和PG3组，对照组常规加入DMEM/F12培养液培养；H2O2模型组加入H2O2 200 μmol·L-1；PG1组加入PG 20 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1；PG2组加入PG 40 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1；PG3组加入PG 80 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1。比较5组SH-SY5Y细胞的增殖活性，细胞培养物上清中8-OHdG，细胞内ROS、LDH释放量，Hoechst 33258染色结果、细胞周期变化情况及Caspase-3酶活性。结果 H2O2模型组细胞存活率显著低于对照组，细胞培养物上清中8-OHdG水平显著高于对照组，ROS水平显著高于对照组，LDH释放量显著高于对照组，具有非常显著性差异（P＜0.01）；PG1组、PG2组和PG3组细胞存活率均显著高于H2O2模型组，细胞培养物上清中8-OHdG水平均显著低于H2O2模型组，ROS水平均显著低于H2O2模型组，LDH释放量均显著低于H2O2模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；PG可显著改善SH-SY5Y细胞凋亡情况，且具有剂量依赖关系；H2O2模型组G0/G1期百分率显著高于对照组，S期、G2/M期和PI均显著低于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；PG2组、PG3组G0/G1期百分率显著低于H2O2模型组，S期、G2/M期和PI均显著高于H2O2模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；H2O2模型组Caspase-3酶活性显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；PG2组和PG3组Caspase-3酶活性显著低于H2O2模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PG在一定剂量范围内对H2O2诱导的SH-SYSY神经细胞损伤具有明显的保护作用，其保护效应可能与清除ROS，减轻DNA氧化损伤，抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。
目的 探讨没食子酸丙酯（propyl gallate，PG，赤芍801）对H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）氧化损伤的影响及其作用机制。方法 将SH-SY5Y细胞均分为对照组、H2O2模型组、PG1组、PG2组和PG3组，对照组常规加入DMEM/F12培养液培养；H2O2模型组加入H2O2 200 μmol·L-1；PG1组加入PG 20 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1；PG2组加入PG 40 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1；PG3组加入PG 80 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1。比较5组SH-SY5Y细胞的增殖活性，细胞培养物上清中8-OHdG，细胞内ROS、LDH释放量，Hoechst 33258染色结果、细胞周期变化情况及Caspase-3酶活性。结果 H2O2模型组细胞存活率显著低于对照组，细胞培养物上清中8-OHdG水平显著高于对照组，ROS水平显著高于对照组，LDH释放量显著高于对照组，具有非常显著性差异（P＜0.01）；PG1组、PG2组和PG3组细胞存活率均显著高于H2O2模型组，细胞培养物上清中8-OHdG水平均显著低于H2O2模型组，ROS水平均显著低于H2O2模型组，LDH释放量均显著低于H2O2模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；PG可显著改善SH-SY5Y细胞凋亡情况，且具有剂量依赖关系；H2O2模型组G0/G1期百分率显著高于对照组，S期、G2/M期和PI均显著低于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；PG2组、PG3组G0/G1期百分率显著低于H2O2模型组，S期、G2/M期和PI均显著高于H2O2模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；H2O2模型组Caspase-3酶活性显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；PG2组和PG3组Caspase-3酶活性显著低于H2O2模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PG在一定剂量范围内对H2O2诱导的SH-SYSY神经细胞损伤具有明显的保护作用，其保护效应可能与清除ROS，减轻DNA氧化损伤，抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。
2014, 25(5):586-589.
摘要:
目的 探讨甘利欣注射液对博莱霉素所致肺纤维化大鼠血清α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅱ型肺泡表面抗原-6（KL-6）和核因子κB（NF-κB）的影响。方法 取健康Wistar大鼠50只，随机分为5组，即正常组、模型组和甘利欣注射液低、中、高剂量组（25，50，100 mg·kg-1）。除正常组外，其余各组经气道注入博莱霉素复制肺纤维化动物模型，正常组用等容量生理盐水经大鼠气道注入。模型复制后第28天开始，腹腔注射甘利欣注射液，连续14 d。第15天处死大鼠，取左肺下叶的组织，用实时荧光PCR和免疫组化检测α-SMA mRNA、NF-κB mRNA表达；大鼠右肺下叶HE染色观察病理学切片。取大鼠血清用ELISA双抗体夹心法测定α-SMA、KL-6和NF-κB的含量。结果 甘利欣各组大鼠肺纤维化程度均较轻微，模型组大鼠肺组织成纤维细胞反应增强。正常组和甘利欣各组大鼠肺组织α-SMA mRNA、NF-κB mRNA表达较低，α-SMA和NF-κB染色及定量表达减弱，与模型组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。正常组和甘利欣各组大鼠血清α-SMA、KL-6和NF-κB含量与模型组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 甘利欣注射液能够减少肺组织α-SMA、NF-κB的表达，降低α-SMA、KL-6和NF-κB含量，进而减轻肺组织纤维化程度。
目的 探讨甘利欣注射液对博莱霉素所致肺纤维化大鼠血清α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅱ型肺泡表面抗原-6（KL-6）和核因子κB（NF-κB）的影响。方法 取健康Wistar大鼠50只，随机分为5组，即正常组、模型组和甘利欣注射液低、中、高剂量组（25，50，100 mg·kg-1）。除正常组外，其余各组经气道注入博莱霉素复制肺纤维化动物模型，正常组用等容量生理盐水经大鼠气道注入。模型复制后第28天开始，腹腔注射甘利欣注射液，连续14 d。第15天处死大鼠，取左肺下叶的组织，用实时荧光PCR和免疫组化检测α-SMA mRNA、NF-κB mRNA表达；大鼠右肺下叶HE染色观察病理学切片。取大鼠血清用ELISA双抗体夹心法测定α-SMA、KL-6和NF-κB的含量。结果 甘利欣各组大鼠肺纤维化程度均较轻微，模型组大鼠肺组织成纤维细胞反应增强。正常组和甘利欣各组大鼠肺组织α-SMA mRNA、NF-κB mRNA表达较低，α-SMA和NF-κB染色及定量表达减弱，与模型组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。正常组和甘利欣各组大鼠血清α-SMA、KL-6和NF-κB含量与模型组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 甘利欣注射液能够减少肺组织α-SMA、NF-κB的表达，降低α-SMA、KL-6和NF-κB含量，进而减轻肺组织纤维化程度。
2014, 25(5):590-594.
摘要:
目的 探讨大黄及大黄蒽醌类有效成分对胰腺腺泡细胞AR42J损伤的保护作用。方法 取生长良好的AR42J细胞，以1×105·mL-1浓度接种于6孔板中，设空白对照组、模型组、大黄含药血清（10 %，5 %，2.5 %，1.25 %，0.625 %）组，每组3个复孔，培养24 h待细胞贴壁后弃上清，空白对照组加入含10 %空白血清培养液、模型组用含10 %空白血清培养液配置造模液（雨蛙素终浓度为10-7 mol·L-1，脂多糖终浓度为10 mg·L-1）、大黄含药血清组分别加入不同浓度的含药血清，继续培养24 h后，检测细胞上清液中淀粉酶含量，取细胞检测细胞内胰蛋白酶、脂肪酶的含量。另取AR42J细胞，以1×105·mL-1浓度接种于6孔板中，设正常对照组、模型组、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚组，上述大黄蒽醌类成分分别设10，20，40， 80 μmol·L-1共4个剂量，每组3个复孔，在37 ℃、5 % CO2条件下，分别培养3，6，12，24 h后，取细胞上清液，检测上清液中淀粉酶的含量。结果 大黄含药血清在2.5 %到10 %浓度范围内，能显著抑制AR42J细胞内蛋白酶、脂肪酶含量，降低细胞培养上清液中淀粉酶的水平。对大黄蒽醌的研究结果提示，大黄素在模型复制3 h后即能显著降低AR42J细胞分泌淀粉酶，且呈明显的剂量依赖性，在24 h内，大黄素各剂量组均表现出较强的抑制淀粉酶的作用；芦荟大黄素及大黄酸在40和80 μmol·L-1剂量下也能显著降低细胞上清液中淀粉酶水平，而大黄素甲醚及大黄酚作用较弱。结论 大黄蒽醌是大黄保护胰腺腺泡细胞损伤的重要物质基础，其中，大黄素的作用最强。
目的 探讨大黄及大黄蒽醌类有效成分对胰腺腺泡细胞AR42J损伤的保护作用。方法 取生长良好的AR42J细胞，以1×105·mL-1浓度接种于6孔板中，设空白对照组、模型组、大黄含药血清（10 %，5 %，2.5 %，1.25 %，0.625 %）组，每组3个复孔，培养24 h待细胞贴壁后弃上清，空白对照组加入含10 %空白血清培养液、模型组用含10 %空白血清培养液配置造模液（雨蛙素终浓度为10-7 mol·L-1，脂多糖终浓度为10 mg·L-1）、大黄含药血清组分别加入不同浓度的含药血清，继续培养24 h后，检测细胞上清液中淀粉酶含量，取细胞检测细胞内胰蛋白酶、脂肪酶的含量。另取AR42J细胞，以1×105·mL-1浓度接种于6孔板中，设正常对照组、模型组、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚组，上述大黄蒽醌类成分分别设10，20，40， 80 μmol·L-1共4个剂量，每组3个复孔，在37 ℃、5 % CO2条件下，分别培养3，6，12，24 h后，取细胞上清液，检测上清液中淀粉酶的含量。结果 大黄含药血清在2.5 %到10 %浓度范围内，能显著抑制AR42J细胞内蛋白酶、脂肪酶含量，降低细胞培养上清液中淀粉酶的水平。对大黄蒽醌的研究结果提示，大黄素在模型复制3 h后即能显著降低AR42J细胞分泌淀粉酶，且呈明显的剂量依赖性，在24 h内，大黄素各剂量组均表现出较强的抑制淀粉酶的作用；芦荟大黄素及大黄酸在40和80 μmol·L-1剂量下也能显著降低细胞上清液中淀粉酶水平，而大黄素甲醚及大黄酚作用较弱。结论 大黄蒽醌是大黄保护胰腺腺泡细胞损伤的重要物质基础，其中，大黄素的作用最强。
2014, 25(5):595-598.
摘要:
目的 利用线粒体细胞色素C氧化酶亚基1（COI）和16S核糖体RNA（16SrRNA）对地龙药材及常见混伪品进行分子鉴定，探讨快速、准确鉴定地龙药材及其混伪品基原物种的方法。方法 收集地龙药材的药典收载品种及其易混品种10种，提取DNA，得到其COI和16SrRNA序列。所得序列经DNAStar校正后，用MEGA6.0自带的Clustal W多重比对，除去冗余位点，比对结果经MEGA6.0分析，构建地龙药材及其混淆品的邻接（N-J）树。结果 地龙药材的正品来源参环毛蚓（Pheretima aspergillum）、通俗环毛蚓（P. vulgaris）、威廉环毛蚓（P. guillelmi）及栉盲环毛蚓（P. pectinifera）与其混淆品种间COI和16SrRNA基因序列均存在较多变异位点。由所构建的N-J系统聚类树图显示所测物种的单系性，即16SrRNA、COI可以很好的将地龙药材区别于其他混伪品。结论 所获得的COI和16SrRNA序列可作为不同状态的地龙类药材物种鉴定的分子依据，并为进一步建立地龙等动物类中药物种真实性鉴定体系奠定了重要的实验基础。
目的 利用线粒体细胞色素C氧化酶亚基1（COI）和16S核糖体RNA（16SrRNA）对地龙药材及常见混伪品进行分子鉴定，探讨快速、准确鉴定地龙药材及其混伪品基原物种的方法。方法 收集地龙药材的药典收载品种及其易混品种10种，提取DNA，得到其COI和16SrRNA序列。所得序列经DNAStar校正后，用MEGA6.0自带的Clustal W多重比对，除去冗余位点，比对结果经MEGA6.0分析，构建地龙药材及其混淆品的邻接（N-J）树。结果 地龙药材的正品来源参环毛蚓（Pheretima aspergillum）、通俗环毛蚓（P. vulgaris）、威廉环毛蚓（P. guillelmi）及栉盲环毛蚓（P. pectinifera）与其混淆品种间COI和16SrRNA基因序列均存在较多变异位点。由所构建的N-J系统聚类树图显示所测物种的单系性，即16SrRNA、COI可以很好的将地龙药材区别于其他混伪品。结论 所获得的COI和16SrRNA序列可作为不同状态的地龙类药材物种鉴定的分子依据，并为进一步建立地龙等动物类中药物种真实性鉴定体系奠定了重要的实验基础。
19 喘平缓释片释药机制的研究
2014, 25(5):599-603.
摘要:
目的 阐明喘平缓释片的释药机制。方法 采用转篮法结合HPLC测定喘平缓释片的累计释放率，用零级、一级、Higuchi方程、Peppas方程等释药模型对喘平缓释片的释放曲线进行拟合，从溶出过程中各规定时间点取样测定其溶胀率、溶蚀度，体视显微镜观察缓释片的形态变化。结果 喘平缓释片指标成分盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱在8 h的累计释放率均达到了80 %，基本实现了均衡释放，用Peppas方程进行拟合后的方程分别为lg（Mt/M∞）=0.5108 lgt-0.5562，R2=0.9991，n=0.5108和lg（Mt/M∞）=0.5150 lgt-0.5386，R2=0.9989，n=0.5150。喘平缓释片的溶胀率在药物约释放60 %时达到了最大值，其后逐渐下降，而溶蚀度则随着药物累计释放率的增加而增加。从体视显微镜观察到遇水膨胀后的缓释片凝胶层和浸润层在一定时间内是逐渐增厚的。结论 喘平缓释片的体外释放机制为药物扩散及骨架溶蚀两种作用。在喘平缓释片的体外溶出实验中，有众多颗粒从片剂表面脱落，提示喘平缓释片释药可能存在着新的释放模式-溶蚀-溶散-扩散机制。
目的 阐明喘平缓释片的释药机制。方法 采用转篮法结合HPLC测定喘平缓释片的累计释放率，用零级、一级、Higuchi方程、Peppas方程等释药模型对喘平缓释片的释放曲线进行拟合，从溶出过程中各规定时间点取样测定其溶胀率、溶蚀度，体视显微镜观察缓释片的形态变化。结果 喘平缓释片指标成分盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱在8 h的累计释放率均达到了80 %，基本实现了均衡释放，用Peppas方程进行拟合后的方程分别为lg（Mt/M∞）=0.5108 lgt-0.5562，R2=0.9991，n=0.5108和lg（Mt/M∞）=0.5150 lgt-0.5386，R2=0.9989，n=0.5150。喘平缓释片的溶胀率在药物约释放60 %时达到了最大值，其后逐渐下降，而溶蚀度则随着药物累计释放率的增加而增加。从体视显微镜观察到遇水膨胀后的缓释片凝胶层和浸润层在一定时间内是逐渐增厚的。结论 喘平缓释片的体外释放机制为药物扩散及骨架溶蚀两种作用。在喘平缓释片的体外溶出实验中，有众多颗粒从片剂表面脱落，提示喘平缓释片释药可能存在着新的释放模式-溶蚀-溶散-扩散机制。
2014, 25(5):603-605.
摘要:
目的 建立地埝药材中没食子酸的RP-HPLC测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱：Cosmosil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.5 %磷酸溶液；检测波长为274 nm；流速为1.0 mL·min-1；柱温为25 ℃。结果 没食子酸在0.234～1.794 μg内线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为99.33 %，RSD=1.19 %。结论 该方法准确、简便、重现性好，适用于没食子酸的含量测定，有助于完善地埝药材的质量控制方法。
目的 建立地埝药材中没食子酸的RP-HPLC测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱：Cosmosil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.5 %磷酸溶液；检测波长为274 nm；流速为1.0 mL·min-1；柱温为25 ℃。结果 没食子酸在0.234～1.794 μg内线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为99.33 %，RSD=1.19 %。结论 该方法准确、简便、重现性好，适用于没食子酸的含量测定，有助于完善地埝药材的质量控制方法。
2014, 25(5):606-610.
摘要:
目的 采用高效液相色谱-串联质谱技术（HPLC-MS/MS），建立同时测定某“中药保健品”中非法添加的4种降糖药二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、格列苯脲的方法。方法 采用Thermo BDS Hypersil C8（2.1 mm × 100 mm，2.4 μm）色谱柱，0.2 %甲酸水溶液（A）和乙腈-甲醇（6∶4，v/v）（B）为流动相进行梯度洗脱，流速0.3 mL·min-1，在电喷雾正离子模式下，以多反应监测（MRM）模式测定，定量离子对为m/z 129.9 → 70.9（二甲双胍）、m/z 205.9→59.9（苯乙双胍）、m/z 357.9→134.9（罗格列酮）、m/z 494.0→169.0（格列苯脲）。结果 同时检出了4种降血糖化学药物。检出限为0.06～0.5 ng·mL-1，定量限为0.21～1.62 ng·mL-1，在3个不同浓度的添加水平下，4种化学药物的平均回收率为66.3 %～110.2 %，相对标准偏差（RSD）为2.3 %～12.2 %。结论 该方法可快速、准确地检测保健食品中非法添加二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、格列苯脲4种降血糖化学药，具有专属性强、灵敏度高的特点。
目的 采用高效液相色谱-串联质谱技术（HPLC-MS/MS），建立同时测定某“中药保健品”中非法添加的4种降糖药二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、格列苯脲的方法。方法 采用Thermo BDS Hypersil C8（2.1 mm × 100 mm，2.4 μm）色谱柱，0.2 %甲酸水溶液（A）和乙腈-甲醇（6∶4，v/v）（B）为流动相进行梯度洗脱，流速0.3 mL·min-1，在电喷雾正离子模式下，以多反应监测（MRM）模式测定，定量离子对为m/z 129.9 → 70.9（二甲双胍）、m/z 205.9→59.9（苯乙双胍）、m/z 357.9→134.9（罗格列酮）、m/z 494.0→169.0（格列苯脲）。结果 同时检出了4种降血糖化学药物。检出限为0.06～0.5 ng·mL-1，定量限为0.21～1.62 ng·mL-1，在3个不同浓度的添加水平下，4种化学药物的平均回收率为66.3 %～110.2 %，相对标准偏差（RSD）为2.3 %～12.2 %。结论 该方法可快速、准确地检测保健食品中非法添加二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、格列苯脲4种降血糖化学药，具有专属性强、灵敏度高的特点。
22 小儿清肺颗粒质量标准研究
2014, 25(5):610-614.
摘要:
目的 制定小儿清肺颗粒（茯苓、清半夏、川贝母、百部等）的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）法对小儿清肺颗粒中茯苓、川贝母进行定性鉴别；采用高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）对小儿清肺颗粒中川贝母的有效成分贝母辛和贝母素乙同时进行定量测定，采用Comatex C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.02 %三乙胺水溶液，梯度洗脱，流速为1.0 mL·min-1，漂移管温度90 ℃，雾化室温度35 ℃，载气压力46.2 psi。结果 茯苓、川贝母的薄层斑点清晰，分离度好，专属性强，阴性对照无干扰。贝母辛在2.380～23.800 μg范围内，其进样质量的常用对数（X）与峰面积积分值的常用对数（Y）具有良好的线性关系（r=0.9996），平均加样回收率为99.6 %，RSD为0.20 %；贝母素乙在1.440～14.400 μg范围内，其进样质量的常用对数（X）与峰面积积分值的常用对数（Y）具有良好的线性关系（r=0.9997），平均加样回收率为99.4 %，RSD为0.43 %。结论 所建立的方法可靠、准确、专属性强，可用于小儿清肺颗粒的质量控制。
目的 制定小儿清肺颗粒（茯苓、清半夏、川贝母、百部等）的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）法对小儿清肺颗粒中茯苓、川贝母进行定性鉴别；采用高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）对小儿清肺颗粒中川贝母的有效成分贝母辛和贝母素乙同时进行定量测定，采用Comatex C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.02 %三乙胺水溶液，梯度洗脱，流速为1.0 mL·min-1，漂移管温度90 ℃，雾化室温度35 ℃，载气压力46.2 psi。结果 茯苓、川贝母的薄层斑点清晰，分离度好，专属性强，阴性对照无干扰。贝母辛在2.380～23.800 μg范围内，其进样质量的常用对数（X）与峰面积积分值的常用对数（Y）具有良好的线性关系（r=0.9996），平均加样回收率为99.6 %，RSD为0.20 %；贝母素乙在1.440～14.400 μg范围内，其进样质量的常用对数（X）与峰面积积分值的常用对数（Y）具有良好的线性关系（r=0.9997），平均加样回收率为99.4 %，RSD为0.43 %。结论 所建立的方法可靠、准确、专属性强，可用于小儿清肺颗粒的质量控制。
23 骨痹颗粒质量标准研究
2014, 25(5):614-618.
摘要:
目的 建立骨痹颗粒的质量标准。方法 采用薄层色谱（TLC）法对该制剂中桑寄生、续断、骨碎补进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定该制剂中续断的有效成分川续断皂苷Ⅵ的含量。结果 桑寄生、续断、骨碎补的TLC别专属性强；川续断皂苷Ⅵ在0.24～15.33 μg范围内呈良好的线性关系，平均回收率为98.36 %，RSD为1.09 %（n=9）。结论 该定性、定量检测方法简便可行、专属性强、重现性好、灵敏度高，可作为骨痹颗粒的质量控制标准。
目的 建立骨痹颗粒的质量标准。方法 采用薄层色谱（TLC）法对该制剂中桑寄生、续断、骨碎补进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定该制剂中续断的有效成分川续断皂苷Ⅵ的含量。结果 桑寄生、续断、骨碎补的TLC别专属性强；川续断皂苷Ⅵ在0.24～15.33 μg范围内呈良好的线性关系，平均回收率为98.36 %，RSD为1.09 %（n=9）。结论 该定性、定量检测方法简便可行、专属性强、重现性好、灵敏度高，可作为骨痹颗粒的质量控制标准。
2014, 25(5):618-621.
摘要:
目的 建立石墨炉原子吸收光谱法测定藏力康胶囊中镉含量的方法。方法 采用湿法快速消解法消解样品，用石墨炉原子吸收光谱法测定镉的含量。结果 镉的线性范围为0~10 ng·mL-1；标准曲线方程式为非线性通过零点，r=0.9994；平均回收率为105.1 %，RSD=2.1 %（n=6），仪器检出限为0.4 pg。3批藏力康胶囊镉的含量均低于中国药典和美国FDA对药品与功能性食品镉限量标准的要求（Cd≤0.3 μg·g-1）。结论 该方法准确、可靠，适用于藏力康胶囊等保健食品中镉的含量测定。
目的 建立石墨炉原子吸收光谱法测定藏力康胶囊中镉含量的方法。方法 采用湿法快速消解法消解样品，用石墨炉原子吸收光谱法测定镉的含量。结果 镉的线性范围为0~10 ng·mL-1；标准曲线方程式为非线性通过零点，r=0.9994；平均回收率为105.1 %，RSD=2.1 %（n=6），仪器检出限为0.4 pg。3批藏力康胶囊镉的含量均低于中国药典和美国FDA对药品与功能性食品镉限量标准的要求（Cd≤0.3 μg·g-1）。结论 该方法准确、可靠，适用于藏力康胶囊等保健食品中镉的含量测定。
2014, 25(5):621-623.
摘要:
目的 建立同时测定金归洗液中绿原酸和蛇床子素含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法 采用HPLC法，色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2 %磷酸水溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL·min-1；检测波长为324 nm；柱温为30 ℃。结果 金归洗液中绿原酸和蛇床子素分别在15.23~152.27 μg·mL-1（r=0.9999），4.35~43.52 μg·mL-1（r=0.9999）范围内浓度与峰面积呈良好线性关系，其平均加样回收率分别为98.13 %，RSD=1.51 %；98.69 %，RSD=0.92 %（n=6）。结论 该方法简单、准确、重复性好，可用于金归洗液中绿原酸和蛇床子素含量的同时测定。
目的 建立同时测定金归洗液中绿原酸和蛇床子素含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法 采用HPLC法，色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2 %磷酸水溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL·min-1；检测波长为324 nm；柱温为30 ℃。结果 金归洗液中绿原酸和蛇床子素分别在15.23~152.27 μg·mL-1（r=0.9999），4.35~43.52 μg·mL-1（r=0.9999）范围内浓度与峰面积呈良好线性关系，其平均加样回收率分别为98.13 %，RSD=1.51 %；98.69 %，RSD=0.92 %（n=6）。结论 该方法简单、准确、重复性好，可用于金归洗液中绿原酸和蛇床子素含量的同时测定。
2014, 25(5):624-628.
摘要:
目的 薏苡仁油属于不饱和脂肪酸，易氧化变质，用β-环糊精（β-CD）包合技术将薏苡仁油包合，使其粉末化。并考察其包合比。方法 用饱和水溶液法制备薏苡仁油β-环糊精包合物，用均匀设计表U7（73）初步确定包合条件，用正交试验表L9（34）得到最佳包合条件，采用差示扫描量热分析、X-射线衍射法、红外分光光度法、电镜扫描法验证包合物，并测定包合物的包合比。结果 投料比为1∶8，β-环糊精∶水1∶10，包合温度65 ℃，包合时间18 h；薏苡仁油可与β-环糊精形成1∶1（摩尔比）的包合物，包合常数281.07 mol·L-1。结论 在本研究条件下，薏苡仁油可与β-环糊精形成稳定的包合物，有利于制成固体制剂。
目的 薏苡仁油属于不饱和脂肪酸，易氧化变质，用β-环糊精（β-CD）包合技术将薏苡仁油包合，使其粉末化。并考察其包合比。方法 用饱和水溶液法制备薏苡仁油β-环糊精包合物，用均匀设计表U7（73）初步确定包合条件，用正交试验表L9（34）得到最佳包合条件，采用差示扫描量热分析、X-射线衍射法、红外分光光度法、电镜扫描法验证包合物，并测定包合物的包合比。结果 投料比为1∶8，β-环糊精∶水1∶10，包合温度65 ℃，包合时间18 h；薏苡仁油可与β-环糊精形成1∶1（摩尔比）的包合物，包合常数281.07 mol·L-1。结论 在本研究条件下，薏苡仁油可与β-环糊精形成稳定的包合物，有利于制成固体制剂。
2014, 25(5):628-631.
摘要:
目的 制备离子敏感型熊胆眼用即型凝胶，并对其凝胶特性进行评价。方法 采用单因素实验法优选凝胶基质以及凝胶增强剂，使用优选处方制备即型凝胶，并对其质量（渗透压、黏度、体外释放以及眼部滞留能力）进行考察。结果 结冷胶（Gelrite）和羧甲基纤维素钠（CMC-Na）比例为0.6 %∶0.3 %时制备凝胶效果较好；所制备的熊胆凝胶制剂与熊胆滴眼液比较，用药后黏度显著增加，具有较好的缓释特性；在用药部位停留时间较长，眼部滞留能力显著增强。结论 制得的熊胆眼用即型凝胶具有良好成型性，符合即型凝胶的要求。
目的 制备离子敏感型熊胆眼用即型凝胶，并对其凝胶特性进行评价。方法 采用单因素实验法优选凝胶基质以及凝胶增强剂，使用优选处方制备即型凝胶，并对其质量（渗透压、黏度、体外释放以及眼部滞留能力）进行考察。结果 结冷胶（Gelrite）和羧甲基纤维素钠（CMC-Na）比例为0.6 %∶0.3 %时制备凝胶效果较好；所制备的熊胆凝胶制剂与熊胆滴眼液比较，用药后黏度显著增加，具有较好的缓释特性；在用药部位停留时间较长，眼部滞留能力显著增强。结论 制得的熊胆眼用即型凝胶具有良好成型性，符合即型凝胶的要求。
2014, 25(5):632-634.
摘要:
目的 建立通贤柚叶的HPLC指纹图谱。方法 色谱柱为Sepax Amethyst C18-H（250 mm×4.6 0mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1 %甲酸，梯度洗脱，流速1.0 mL·min-1，检测波长303 nm，柱温25 ℃，进样量20 μL。分析12批通贤柚叶样品，并进行主成分分析。结果 建立了通贤柚叶的HPLC指纹图谱，确定了16个共有色谱峰，采用对照品指认了其中2个峰。主成分分析结果表明，11个色谱峰对其质量控制较为重要。结论 所建立的指纹图谱分析方法特征性强，为通贤柚叶的质量控制提供了科学依据。
目的 建立通贤柚叶的HPLC指纹图谱。方法 色谱柱为Sepax Amethyst C18-H（250 mm×4.6 0mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1 %甲酸，梯度洗脱，流速1.0 mL·min-1，检测波长303 nm，柱温25 ℃，进样量20 μL。分析12批通贤柚叶样品，并进行主成分分析。结果 建立了通贤柚叶的HPLC指纹图谱，确定了16个共有色谱峰，采用对照品指认了其中2个峰。主成分分析结果表明，11个色谱峰对其质量控制较为重要。结论 所建立的指纹图谱分析方法特征性强，为通贤柚叶的质量控制提供了科学依据。
2014, 25(5):635-638.
摘要:
目的 观察喘可治注射液联合化疗治疗Ⅲ、Ⅳ期老年非小细胞肺癌（NSCLC）的近期疗效。方法 采用前瞻性、随机、对照的临床研究方法，将62例老年NSCLC病例按1∶1比例分为试验组（喘可治注射液+中医辨证论治+化疗）和对照组（中医辨证论治+化疗），其中试验组32例，对照组30例。观察喘可治注射液联合化疗对瘤体大小、临床症状、体力状况（PS）评分、体质量的影响及化疗副反应。结果 试验组、对照组瘤体大小疗效评价：有效率（ORR）分别为31.3 %、16.7 %，稳定率（DCR）分别为84.4 %、73.3 %，两组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。试验组咳嗽、咯痰、夜尿频多、畏寒肢冷等临床症状缓解率优于对照组（P＜0.05）；试验组的PS评分改善优于对照组（P＜0.05）；试验组治疗后体质量增加率及稳定率均高于对照组（P＜0.05）；试验组骨髓抑制程度较对照组轻，其中白细胞及中性粒细胞变化有统计学意义（P＜0.05）。结论 喘可治注射液应用于Ⅲ、Ⅳ期老年NSCLC化疗患者具有增效减毒的协同作用，能明显改善临床症状、提高PS评分，维持体质量及有效减轻骨髓抑制。
目的 观察喘可治注射液联合化疗治疗Ⅲ、Ⅳ期老年非小细胞肺癌（NSCLC）的近期疗效。方法 采用前瞻性、随机、对照的临床研究方法，将62例老年NSCLC病例按1∶1比例分为试验组（喘可治注射液+中医辨证论治+化疗）和对照组（中医辨证论治+化疗），其中试验组32例，对照组30例。观察喘可治注射液联合化疗对瘤体大小、临床症状、体力状况（PS）评分、体质量的影响及化疗副反应。结果 试验组、对照组瘤体大小疗效评价：有效率（ORR）分别为31.3 %、16.7 %，稳定率（DCR）分别为84.4 %、73.3 %，两组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。试验组咳嗽、咯痰、夜尿频多、畏寒肢冷等临床症状缓解率优于对照组（P＜0.05）；试验组的PS评分改善优于对照组（P＜0.05）；试验组治疗后体质量增加率及稳定率均高于对照组（P＜0.05）；试验组骨髓抑制程度较对照组轻，其中白细胞及中性粒细胞变化有统计学意义（P＜0.05）。结论 喘可治注射液应用于Ⅲ、Ⅳ期老年NSCLC化疗患者具有增效减毒的协同作用，能明显改善临床症状、提高PS评分，维持体质量及有效减轻骨髓抑制。
2014, 25(5):639-642.
摘要:
目的 构建小鼠RPS20 miRNA干扰载体，进行载体质粒的提取及鉴定，以进行细胞转染实验。方法 针对小鼠RPS20基因miRNA序列，设计合成阴性对照及4对目标基因oligo，采用载体构建试剂盒进行重组克隆，经过退火、连接及转化后，进行测序及质粒提取鉴定。结果 测序结果提示序列构建完全正确，电泳结果提示质粒大小正确，纯度较高。结论 成功构建了针对于小鼠RPS20基因的miRNA干扰载体，测序及电泳结果提示，所构建序列可用于后续转染实验。
目的 构建小鼠RPS20 miRNA干扰载体，进行载体质粒的提取及鉴定，以进行细胞转染实验。方法 针对小鼠RPS20基因miRNA序列，设计合成阴性对照及4对目标基因oligo，采用载体构建试剂盒进行重组克隆，经过退火、连接及转化后，进行测序及质粒提取鉴定。结果 测序结果提示序列构建完全正确，电泳结果提示质粒大小正确，纯度较高。结论 成功构建了针对于小鼠RPS20基因的miRNA干扰载体，测序及电泳结果提示，所构建序列可用于后续转染实验。
2014, 25(5):643-646.
摘要:
炎症小体（inflammasome）是由多种蛋白组成的复合物，能够调节促炎细胞因子前体半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（pro-caspases）的活化，进而在固有免疫防御系统中促进白细胞介素（IL）-1β、IL-18和IL-33细胞因子前体的切割成熟，产生炎症应答。作为炎症反应的核心，炎症小体与阿尔茨海默病、脑脊髓炎、朊病毒病等中枢神经系统疾病的发生和发展密切相关。本文就炎症小体与中枢神经系统疾病关系的研究进展进行综述，希望为神经系统疾病的治疗提供新的方向和靶点。
炎症小体（inflammasome）是由多种蛋白组成的复合物，能够调节促炎细胞因子前体半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（pro-caspases）的活化，进而在固有免疫防御系统中促进白细胞介素（IL）-1β、IL-18和IL-33细胞因子前体的切割成熟，产生炎症应答。作为炎症反应的核心，炎症小体与阿尔茨海默病、脑脊髓炎、朊病毒病等中枢神经系统疾病的发生和发展密切相关。本文就炎症小体与中枢神经系统疾病关系的研究进展进行综述，希望为神经系统疾病的治疗提供新的方向和靶点。
2014, 25(5):647-650.
摘要:
对藏医学中药用龙胆科植物在我国现行药材标准中的品种收载和质量标准情况进行分析整理。结果表明，相关文献记载的藏医学药用龙胆科植物共有8属77种（含变种），但在《中国药典》、《部颁标准》和地方标准中收载的基源植物仅26种，约占33 %。在藏药的标准和文献中，药材的藏文名称、音译汉文名称的用字以及基原比较混乱。除少数几种与中药交叉使用的品种在《中国药典》中有比较完善的标准外，在《部颁标准·藏药（第1册）》、《藏药标准》及地方标准中绝大多数品种都仅有性状、粉末、理化鉴别等项规定，标准极不完善。因此，应开展文献考证、资源和使用现状调查，并结合现代药物研究技术进行系统研究，加强对藏药材的品种研究和质量标准体系的建立。
对藏医学中药用龙胆科植物在我国现行药材标准中的品种收载和质量标准情况进行分析整理。结果表明，相关文献记载的藏医学药用龙胆科植物共有8属77种（含变种），但在《中国药典》、《部颁标准》和地方标准中收载的基源植物仅26种，约占33 %。在藏药的标准和文献中，药材的藏文名称、音译汉文名称的用字以及基原比较混乱。除少数几种与中药交叉使用的品种在《中国药典》中有比较完善的标准外，在《部颁标准·藏药（第1册）》、《藏药标准》及地方标准中绝大多数品种都仅有性状、粉末、理化鉴别等项规定，标准极不完善。因此，应开展文献考证、资源和使用现状调查，并结合现代药物研究技术进行系统研究，加强对藏药材的品种研究和质量标准体系的建立。
