2018年第29卷第2期文章目次

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  • 1  “异常子宫出血”中药新药临床研究定位及设计要点的思考
    王雅楠
    2018, 29(2).
    [摘要](438) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2091)
    摘要:
    中医药治疗异常子宫出血具有传统的优势,开发有效中成药势在必行。结合本科室多年临床试验设计与中药新药研究实践经验,从新药临床定位、试验分期研究重点、新药临床试验设计要点等方面全面阐述对“异常子宫出血”临床试验设计的思考,以期使临床试验设计具有科学性、严谨性以及可行性,从而充分保证受试者的安全,降低新药研究的风险,提高临床定位的准确性。
    2  3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型建立、优化及分子指标鉴定
    罗新新
    2018, 29(2).
    [摘要](1176) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2289)
    摘要:
    [摘要]:目的:探讨3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)模型建立条件、优化及分子指标鉴定。方法:采用3-异丁基-1-黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine, IBMX),地塞米松(Dexamethason,DEX)和胰岛素联合诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,油红O染色鉴定。采用1μmol·L-1DEX诱导建立IR-3T3-L1脂肪细胞,1μmol·L-1DEX联合10μmol·L-1罗格列酮(Rosiglitazone,ROS)联合诱导建立IR-3T3-L1脂肪细胞。葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(Glucose oxidase-peroxidase,GOD-POD)检测不同时间点细胞培养液葡萄糖含量,确认IR-3T3-L1细胞模型最佳诱导时间和IR状态稳定性;甘油磷酸氧化酶法(glycerol phosphate oxidase,GPO-POD)测定胞内甘油三酯(Triglyceride,TG)含量。荧光定量qPCR和Western blot法分别检测脂联素(Adiponectin,ADPN)和葡萄糖转运蛋白-4(Glucose transporter 4,GLUT4)mRNA基因和蛋白质表达水平。结果:DEX作用3T3-L1脂肪细胞96h葡萄糖消耗差值比例最大,为46.84%;DEX ROS作用72h葡萄糖消耗差值比例最大,为22.77%,可确认为两种IR模型建立的最佳时间点,其后可保持稳定IR状态至少60h。两类IR细胞中的GLUT4和ADPN mRNA和蛋白表达水平较正常组显著降低(P<0.01),相较于DEX ROS组,DEX单独诱导细胞内GLUT4和ADPN mRNA和蛋白表达水平降低更显著。结论:DEX组和DEX ROS组两种诱导方法抑制GLUT4和ADPN mRNA和蛋白表达水平来建立稳定可靠的IR-3T3-L1细胞模型,但DEX单独诱导IR模型方法更稳定可能与更有效抑制了ADPN mRNA和蛋白表达导致葡萄糖消耗下降更为显著。
    3  miR-7介导中药复方养正散结汤调控胃癌细胞增殖
    余娅娅
    2018, 29(2).
    [摘要](662) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2200)
    摘要:
    摘要:目的 探索养正散结汤(YZSJD)对微小 RNA(miRNA)表达谱的影响及 YZSJD 通过调控 miRNA 发挥抑制胃癌细胞增殖作用可能的分子机制。方法 SD 大鼠灌胃 YZSJD(16.4 g · kg-1),每日 1 次,连续 7 d,制备大鼠 含药血清。AGS、SGC-7901、HS-746T、MKN-45 胃癌细胞给予 10%YZSJD 大鼠含药血清干预;miRNA 芯片检测胃癌细胞的 miRNA 表达情况;qRT-PCR 法检测胃癌细胞 miR-7 表达。MKN-45 细胞转染 miR-7 mimic、 miR-7 inhibitor 后,采用 CCK-8 法检测细胞增殖;Western Blot 法检测 MKN-45 细胞 EGFR 蛋白表达。结果YZSJD 干预后,胃癌细胞 miRNA 表达谱发生显著改变,促癌性 miRNA 发生下调,抑癌性 miRNA 显著上调。与对照组比较,AGS、SGC-7901、HS-746T 和 MKN-45 胃癌细胞中药组的 miR-7 相对表达量显著上调,差异均有统计学意义(P < 0.05)。与阴性对照组比较,miR-7 mimic 能够显著上调 MKN-45 细胞的 miR-7 表达,差异有统计学意义(P < 0.05);胃癌细胞 MKN-45 在转染 miR-7 mimic 48、72、96 h 后,细胞增殖抑制率显著下调,差异均有统计学意义(P < 0.05);在转染 miR-7 inhibitor 72、96 h 后,细胞增殖促进率显著上调,差异均有统计学意义(P < 0.05)。与对照组比较,中药组的 MKN-45 细胞 EGFR 蛋白相对表达水平明显下调,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论 中药复方 YZSJD 能影响胃癌细胞 miRNA 表达谱,其可能通过调节 miR-7/EGFR 表达发挥抑制胃癌细胞增殖的作用。
    4  竹节香附素A对人结肠癌细胞HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭活性的影响
    王宇 姜修博 韩豆 朱志铭 宋长琴 赵昂 张琪 刘昌辉 马博
    2018, 29(2).
    [摘要](426) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2266)
    摘要:
    摘要:目的 研究竹节香附素A (Raddeanin A,RA) 对人结肠癌细胞HCT-116增殖、凋亡、迁移及侵袭的活性影响,并初步探讨其作用机制。 方法 采用不同浓度的RA(0.125~50 μmol·L-1)处理?HCT-116细胞24,48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力。RA(1.0,2.0,4.0 μmol·L-1)干预后,采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;JC-1染色法检测线粒体膜电位变化;DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;采用Western Blot法检测细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达。选择低于凋亡浓度的RA (0.25,0.5,1.0 μmol·L-1)作用HCT-116细胞,采用细胞划痕实验和Transwell穿膜实验观察不同浓度RA 对结肠癌细胞HCT-116细胞迁移的影响;采用铺有matrigel胶的Transwell实验检测RA对HCT-116细胞侵袭能力的影响;采用RT-PCR法和Western Blot法检测RA作用后各组细胞中MMP-2、MMP-9基因及蛋白表达。 结果 RA干预24,48 h后的IC50值分别为5.967 μmol·L-1和4.797 μmol·L-1,且呈现浓度与时间依赖性。与空白对照组比较,RA 1.0,2.0,4.0?μmol·L-1浓度组凋亡、坏死的HCT-116细胞明显增多(P < 0.05,P < 0.01);线粒体膜电位坍塌率分别为70.2%,74.4%和91.6%,差异有统计学意义(P < 0.01);细胞内ROS含量显著增加(P < 0.01),且呈现浓度依赖性;Cleaved caspase-3蛋白的表达水平随RA浓度的增加而显著提高(P < 0.01)。RA干预后与空白对照组比较,0.5,1.0 μmol·L-1浓度组的细胞愈合率显著降低(P < 0.01);RA 0.25,0.5,1.0 μmol·L-1浓度组均能显著抑制HCT-116 细胞的迁徙能力(P < 0.01),均能显著抑制HCT-116 细胞体外侵袭能力(P < 0.05,P < 0.01)。与空白对照组比较,RA 0.5,1.0 μmol·L-1浓度组MMP-2、MMP-9 mRNA相对表达水平显著降低(P < 0.05,P < 0.01);RA 0.5,1.0?μmol·L-1浓度组MMP-2、MMP-9 蛋白相对表达水平显著降低(P < 0.01)。结论 RA既能够有效抑制人结肠癌HCT-116细胞增殖,又能诱导该细胞的凋亡,可能与诱导细胞内ROS产生,导致线粒体膜电位坍塌,激活caspase信号通路有关。低于凋亡浓度的RA (0.25,0.5,1.0 μmol·L-1)能明显抑制HCT-116细胞的迁移与侵袭活性,可能与通过下调HCT-116细胞MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达有关。
    5  冠心丹参滴丸化学成分及心血管药理作用的研究进展
    宋海英 刘剑刚 王培利 王承龙
    2018, 29(2).
    [摘要](594) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2137)
    摘要:
    冠心丹参滴丸是由三七、丹参、降香三味药物组成的已上市中药复方,其成分分析和临床研究相继逐步明确,药理机制的研究进展也得到深入。冠心丹参滴丸的主要药理作用包括调节血脂血糖、改善血液的流变性,改善精神心理状态,有效的减少冠心病的发作次数、减轻疼痛程度、缩短持续时间、增加硝酸甘油停减率、改善心电图表现、提高患者的生活质量。经研究证实其药理作用涉及血管内皮、炎症介质、脂质斑块、氧化应激损伤等多个环节和靶点,本文对冠心丹参滴丸的化学成分和心血管药理作用的近年研究做一综述。
    6  参苓白术散方联合西医治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病的系统评价及Meta分析
    吴科锐 罗景山 陈腾宇
    2018, 29(2).
    [摘要](413) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2192)
    摘要:
    目的:系统评价参苓白术散方联合西医疗法治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)的临床疗效及安全性。方法:计算机检索PubMed、the Cochrane library、中国知网、中国生物医学文献数据库、维普、万方数据库关于参苓白术散方联合西医疗法治疗慢性阻塞性肺疾病的临床随机对照试验(RCTs),检索时间为建库到2017年4月1日。由2名评价员根据纳入及排除标准独立对文献进行筛选,资料提取,偏倚风险评估。应用Revman5.3软件进行Meta分析。结果:最终纳入19项研究,Meta分析结果显示,应用参苓白术散方联合西医疗法治疗稳定期COPD,临床总有效率高于单独西医疗法,在肺功能、6min步行距离、中医症状总评分、慢性阻塞性肺疾病自我评估(CAT评分)、圣乔治呼吸问卷调查表(SGRQ)评分、营养学等指标的改善上优于单独西医疗法,且能减少COPD急性加重发作,安全性好。结论:应用参苓白术散方联合西医疗法治疗稳定期COPD临床疗效优于单独西医疗法,但由于本研究存在一定局限性,故仍需高质量临床研究加以佐证。
    7  秦艽不同配伍对风湿热痹型RA大鼠踝关节VEGF表达及病理学的影响
    王蓉
    2018, 29(2).
    [摘要](560) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2201)
    摘要:
    摘要: 目的 研究秦艽不同配伍对风湿热痹的类风湿性关节炎(RA)大鼠踝关节血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达及病理学的影响,探讨药性-疾病-疗效之间的关系及其治疗机制。方法 通过建立风湿热痹RA大鼠模型,将80只SD大鼠,随机分为空白组、Ⅱ型胶原组、病证模型组、阳性药组、单味秦艽组、秦艽威灵仙组、秦艽桑寄生组和秦艽防己组,共8组,每组10只。实验第39天时进行关节炎指数评分,并进行踝关节取材,采用HE染色技术观察踝关节组织的破坏程度,采用免疫组织化学法对踝关节VEGF的蛋白表达进行定位分析,再采用Western blotting法对VEGF的表达进行半定量分析。结果 HE染色结果显示,各给药组炎性细胞明显减少,毛细血管减少,绒毛变少,肉芽组织老化,纤维增多成为瘢痕,并且软骨破坏减轻。Ⅱ型胶原组和病证模型组的关节炎指数、VEGF蛋白表达量均明显高于空白组(P<0.05),且病症模型组高于Ⅱ型胶原组;各给药组关节炎指数、VEGF均有不同程度的降低,其中秦防组降低最为显著(P<0.05)。结论 各秦艽配伍药对可能通过调节风湿热痹型RA模型大鼠VEGF的表达,进而抑制新生血管的增生,发挥对RA治疗作用。其中平寒相配效果优于平温、平平相配。
    8  LC-MS/MS法检测人参皂苷Rb1对心肌缺血大鼠药效与药动学作用
    李慧
    2018, 29(2).
    [摘要](523) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2288)
    摘要:
    目的 研究人参皂苷Rb1在正常大鼠和急性心肌缺血模型大鼠体内的药动学。方法 以垂体后叶素(PIT)制备急性心肌缺血大鼠模型,实验分3个正常对照组和3个模型组,分别给予高、中、低剂量的人参皂苷Rb1(400,200,100 mg·kg-1),单次灌胃给药后于不同时点采血,以三七皂苷R1为内标,采用LC-MS/MS测定各时点血药浓度,并运用PK Solution 2.0软件计算药动学参数;Western Blot法测定大鼠肝脏中药物代谢酶CYP3a2、CYP2c9、CYP2c19、CYP1a1和CYP1a2蛋白表达。结果 人参皂苷Rb1的线性范围为5~10000 ng·mL-1,方法的专属性、提取回收率、日间及日内精密度、稳定性符合生物样品处理要求。与正常组比较,模型组大鼠AUC0-t和Cmax增加,t1/2和Tmax延长,CL降低(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠CYP3a2、CYP2c9、CYP2c19、CYP1a1和CYP1a2代谢酶蛋白表达明显下降(P<0.05或P<0.01);人参皂苷Rb1给药后12 h可诱导CYP1a1和CYP1a2表达。结论 该方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于人参皂苷Rb1的含量测定及药动学研究。
    9  土大黄及其有效成分药理活性研究进展
    朱继孝
    2018, 29(2).
    [摘要](559) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2464)
    摘要:
    土大黄药用历史悠久,为维吾尔医常用药材。近年来,国内外学者对土大黄的化学组成、药理活性进行了较为广泛的研究。成分分析表明,土大黄以蒽醌类、黄酮类、萘及萘醌类、二苯乙烯类等成分为主; 药理实验及临床报道表明,土大黄在抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化和抗免疫等方面具有重要作用。因此,对土大黄的各个有效成分的活性总结具有临床指示性意义。本文通过查阅国内外相关文献,总结了土大黄不同活性成分的药理活性及作用机制,为该药临床研究提供理论依据,进而为其开发利用提供依据。
    10  不同生长年限仿野生铁皮石斛醇提物的抗肿瘤活性比较
    林丽珍 许仕锦 杨永军 杨辉 雷胄熙 沈伟 魏刚
    2018, 29(2).
    [摘要](467) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2185)
    摘要:
    目的 研究不同生长年限的仿野生铁皮石斛醇提物(EIWD)对人肝癌细胞(HepG2)、宫颈癌细胞(Hela)的抗肿瘤活性。方法 以体外培养的HepG2、Hela为对象,MTT法检测细胞活性、荧光染色法检测细胞凋亡形态、流式细胞仪检测细胞凋亡率,比较各EIWD对HepG2、Hela的抗肿瘤活性。结果 1,2,3年生EIWD对HepG2、Hela具有明显的抑制作用(P<0.01),对Hela的抑制作用有明显的时间和浓度的依赖性;Hoechest 33258荧光染色法可见EIWD可诱导肿瘤细胞呈典型的形态,细胞核皱缩、破碎、显亮蓝色荧光;流式细胞仪检测显示EIWD可提高肿瘤细胞的凋亡率。结论 不同生长年限的EIWD对HepG2、Hela有抗增殖作用,其中对Hela抗肿瘤活性作用较明显,且生长期限较长的EIWD活性作用较强;可使肿瘤细胞出现典型的凋亡形态,具有促进凋亡作用。
    11  RP-HPLC法同时测定广枣中5种活性成分含量
    王晓琴
    2018, 29(2).
    [摘要](516) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2189)
    摘要:
    摘要:目的 建立双波长RP-HPLC法同时测定广枣中没食子酸、原儿茶酸、鞣花酸、5-羟甲基糠醛、3,3"-二甲氧基鞣花酸含量的测定方法,并比较整个果实以及果肉中5种成分的差异。方法 采用岛津Inertsil ODS-SP (250 mm ×4.6 mm, 5.0 μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B) 为流动相,梯度洗脱,流速0.9 mL?min-1,柱温25 ℃,258 nm检测没食子酸、原儿茶酸、鞣花酸和3,3"-二甲氧基鞣花酸,285 nm检测5-羟甲基糠醛。结果 没食子酸、5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、鞣花酸、3,3"-二甲氧基鞣花酸分别在0.161~0.965 μg(r = 1.0000)、0.203~1.219 μg(r = 0.9999)、0.169~1.013 μg(r = 0.9995)、0.168~1.008 μg(r = 1.0000)、0.027~0.162 μg(r = 1.0000)范围内线性关系良好;5种成分的平均回收率在97.62%~105.00%之间,RSD为0.30%~1.68%。结论:该方法专属性强、准确,重复性良好,可为蒙药广枣药材的质量控制提供科学依据。
    12  响应面法优化天葵子总生物碱提取工艺及体外抗氧化活性研究
    冯沼润 何先元 欧阳凯
    2018, 29(2).
    [摘要](447) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2112)
    摘要:
    目的:以天葵子块根为实验材料,采用响应面优化超声波辅助提取天葵子的总生物碱的工艺,并分析总生物碱的体外抗氧化活性。方法:利用 Design Expert 8.0.6 设计以乙醇浓度、液料比、超声时间、超声功率为四因素三水平的响应面试验进行考察,采用DPPH法、ABTS法和总还原能力测定法进行体外抗氧化考察。结果:获得最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为86%,液料比为37:1 mL·g-1,超声时间为32 min,超声功率为140 W。提取物有一定的还原力,清除DPPH 自由基的IC50值为0.631 mg·L-1,清除 ABTS自由基的 IC50值为0.747 mg·L-1。结论:表明优选的工艺条件简便可行,抗氧化活性大小与总生物碱的质量浓度呈明显的量效关系。
    13  白芥子挥发油促进冬病夏治方的经皮渗透研究
    阮世发
    2018, 29(2).
    [摘要](652) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2090)
    摘要:
    目的:研究白芥子挥发油对冬病夏治方中多个有效成分的促进透皮吸收作用。方法:采用体外透皮试验,以离体大鼠皮肤为透皮屏障,以冬病夏治方各中药中的有效成分延胡索乙素、细辛脂素、盐酸麻黄碱、黄芩苷作为模型药物,HPLC法测定各模型药物透过量,考察白芥子挥发油(0.5%,2%,5%)对各模型药物的经皮促渗透作用。结果:白芥子挥发油浓度较低时(0.5%)对各模型药物无明显的促进经皮渗透作用,随着浓度的增大,白芥子挥发油(2%,5%)可显著促进有效成分延胡索乙素、细辛脂素、盐酸麻黄碱、黄芩苷经皮渗透吸收,且呈浓度依赖性,即浓度越大,促透效果越好。结论:白芥子挥发油能促进冬病夏治方中有效成分延胡索乙素、细辛脂素、盐酸麻黄碱、黄芩苷经皮渗透吸收,作为处方中君药起到了治疗与促进药物渗透从而达到增效的双重作用。
    14  类叶牡丹提取物对TNF-α诱导的人类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞因子的影响
    吕邵娃 崔杰 段继新 郭玉岩 李国玉 匡海学
    2018, 29(2).
    [摘要](392) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2539)
    摘要:
    摘要:目的 利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞(MH7A)对细胞因子分泌的影响来探讨类叶牡丹提取物(Caulophyllum robustum Maxim Extract,CRME)抗类风湿性关节炎(RA)的分子机制。方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测CRME对MH7A活力的影响,选取半数抑制浓度(IC50)以下的药物浓度作为干预剂量;酶联免疫(ELISA)法检测CRME对 TNF-α 诱导 MH7A细胞释放白介素-6(IL-6)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、促凋亡因子(Bax、FasL)、抗凋亡因子(Bcl-2)和的影响。结果 在测定浓度下,CRME对 MH7A细胞活力无显著影响,IC50为 645.32 μg?mL-1。ELISA 检测结果表明,TNF-α作用下MH7A细胞促炎因子 IL-6 分泌量明显升高,CRME(剂量分别为 50、100、500 μg?mL-1)有显著的抑制作用,并有剂量依赖关系(均 P<0.01),各剂量组细胞上清中抑炎因子IL-4含量明显上升(P<0.01);与模型组比较,CRME 100、500 μg?mL-1剂量组细胞上清中 VEGF含量明显降低(P<0.05), 且具有浓度依赖性;CRME 500 μg?mL-1剂量组明显降低细胞上清中RANKL含量(P<0.01);CRME 100 μg?mL-1剂量组可促进FasL的表达(P<0.01),CRME 50、100、500 μg?mL-1各剂量组均可促进Bax的表达(P<0.01),且CRME 50μg?mL-1剂量组作用明显,50 μg?mL-1剂量组可降低Bcl-2的表达(P<0.05)。结论 减轻炎症、降低血管翳形成、增加骨保护,促进异常增生的滑膜细胞的凋亡可能是 CRME 抗类风湿性疾病的机理之一。
    15  一测多评法测定复方毛冬青片中3种皂苷类成分的含量
    武肖云 王振华 孙丽娜 刘小虹 张志强 宋健平
    2018, 29(2).
    [摘要](451) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2221)
    摘要:
    目的 建立复方毛冬青片中3种皂苷类成分的一测多评含量测定方法。方法 采用HPLC法,色谱柱:YMC-Pack Pro-C18 RS(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相A为乙腈(A)-0.1 %磷酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:203 nm;柱温:25 ℃。以人参皂苷Rb1为内参物,建立人参皂苷Rb1与人参皂苷Rg1及毛冬青皂苷甲的相对校正因子(RCF),并利用RCF计算人参皂苷Rg1、毛冬青皂苷甲的含量,同时利用外标法测定3种成分的含量,比较两者的差异,验证一测多评法的准确性和科学性。结果 不同条件下各成分RCF重现性良好(RSD﹤5.00 %),采用一测多评法计算的含量值与外标法实测值之间无明显差异。结论:以一测多评法对复方毛冬青片进行质量控制是稳定、可行的。
    16  UPLC法同时测定黑豆甘草汤中8个指标成份的质量控制研究
    赵嘉祺
    2018, 29(2).
    [摘要](527) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2183)
    摘要:
    目的:建立UPLC法同时测定黑豆甘草汤中8个指标成分的质量控制方法。方法:采用含0.1 mol?L-1的盐酸丙酮溶液提取样品,运用UPLC技术,使用ACE Excel 2 C18(100×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1 %甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量为0.3 mL?min-1;检测波长为260 nm和530 nm,柱温35 ℃,进样量为5 μL。结果:黑豆甘草汤中矢车菊-3-O-葡萄糖苷、大豆苷、黄豆黄苷、甘草苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、甘草酸铵盐分别在11.88~380.0 μg?mL-1(R2=0.9992)、16.88~540.0μg?mL-1(R2=0.9995)、12.50~400.0μg?mL-1(R2=0.9993)、14.38~460.0μg?mL-1(R2=0.9992)、17.50~560.0μg?mL-1(R2=0.9996)、15.63~500.0μg?mL-1(R2=0.9995)、6.00~192.0μg?mL-1(R2=0.9992)、15.63~500.0μg?mL-1(R2=0.9995)内线性关系良好;平均回收率均在95.12 %~105.83 %。结论:所建立的UPLC法可同时测定黑豆甘草汤中8个指标成分,结果稳定可靠,可作为含黑豆甘草汤的质量控制的方法。
    17  SE-HPLC测定刺糖多糖相对分子质量及纯度
    常军民
    2018, 29(2).
    [摘要](504) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2100)
    摘要:
    摘要目的建立高效液相色谱法测定刺糖多糖相对分子质量和纯度的方法;分析刺糖多糖的相对分子质量分布及含量测定。方法采用水提醇沉法及AB-8大孔吸附树脂和DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换树脂分离纯化不同相对分子质量的多糖组分,用TSK-GEL G4000PWXL,7.8mm×300mm色谱柱,2414示差折光检测仪,测定其相对分子质量分布和纯度。 结果得到刺糖多糖组分AP2-4,其多糖相对分子质量为4.99×104,纯度含量为93%±3%;相对分子质量分布为Mr:4.9733;Mn:4.9518;Mp:6.3112、4.8732;Mr/Mn为1.0。结论建立了简便、快捷、精密度高的凝胶色谱柱方法;较为准确的测定了刺糖多糖的纯度和相对分子质量分布。
    18  濒危南药青天葵查尔酮合成酶基因的克隆及序列分析
    黄琼林 曾湘达 卓一南 何瑞 詹若挺
    2018, 29(2).
    [摘要](470) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2263)
    摘要:
    目的克隆濒危南药青天葵黄酮类药效成分生物合成途径第一步关键酶——查尔酮合成酶(chalcone synthase, CHS)的编码基因,并分析其序列特征及编码蛋白的功能。方法在前期青天葵转录组测序获得的CHS基因序列片段的基础上,采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)从青天葵叶片中获取编码CHS的cDNA全长并克隆其编码区;利用生物信息学方法对其编码蛋白进行同源性比对和功能分析。结果克隆获得的青天葵CHS基因编码区长度为1173 bp,编码391个氨基酸。编码蛋白的氨基酸序列预测显示,青天葵CHS蛋白为酸性、亲水性蛋白,分子量约为96.9 kDa;不含有信号肽、转运肽和跨膜结构域,很可能定位于细胞质中;具有查尔酮合成酶保守功能域,归属于查尔酮合成酶超家族,与文心兰等同科植物CHS蛋白的同源性可达87%。结论成功克隆得到青天葵查尔酮合成酶基因,为后续的基因功能鉴定和生物合成调控奠定了基础。
    19  基于皮肤衰老临床病症特点的动物模型分析
    项丽玲 王灿 温亚娟 张梦飞 苗明三
    2018, 29(2).
    [摘要](487) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2198)
    摘要:
    摘要:目的:基于皮肤衰老临床病症特点,对目前现有的皮肤衰老模型进行归纳分析。方法:通过整理分析中西医对皮肤衰老的诊断标准及临床表现,总结皮肤衰老动物模型的特点及造模方法,对比临床诊断标准及症状特点,对现有动物模型与临床症状的吻合程度进行探讨分析,明确其优缺点及应用前景。结果:皮肤衰老动物模型造模方法多样,但现有模型与皮肤衰老的临床病症特点差距较大,无法体现皮肤衰老中西医病因的动物模型。结论:探索能进一步反应皮肤衰老临床病症特点,体现皮肤衰老中西医病因,复制出能更加吻合临床病症特点的动物模型是今后需要努力发展的方向。
    20  五子衍宗丸中不同配伍对4种活性成分的影响
    陈珊珊
    2018, 29(2).
    [摘要](479) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2203)
    摘要:
    目的:考察五子衍宗丸中不同配伍情况下,所含的4种活性成分的含量变化,以期探讨其配伍的部分科学内涵。方法:采用水煎回流提取法制备五种药材及相互配伍的样本;采用Unitary C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长360 nm,测定各样本中金丝桃苷、紫云英苷、槲皮素和山柰酚4中活性成分含量变化。结果:菟丝子与枸杞子、五味子、覆盆子配伍后各组中金丝桃苷和紫云英苷的含量均有显著增加,槲皮素和山柰酚含量的无明显变化。其中金丝桃苷的含量与配伍前比分别增长了53.50%、27.89%、24.30%。菟丝子与车前子配伍后4种活性成分的含量均有减少。结论:不同配伍对菟丝子活性成分含量有一定影响,其中枸杞子作用最为显著;其研究结果为分析配伍规律提供实证依据。
    21  活血化瘀方药或联合其他疗法治疗寻常型银屑病有效性和安全性 的meta分析
    吕萌
    2018, 29(2).
    [摘要](530) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2131)
    摘要:
    摘要: 目的 系统评价活血化瘀方药或联合其他疗法治疗寻常型银屑病的有效性及安全性。 方法 自各数据库建库开始,分别对四大英文数据库(PubMed、EMBASE、Web of Science、Cochrane library)及四大中文数据库{中国学术期刊全文数据库(CNKI)、维普期刊数据库(CQVIP)、 万方数据库(Wanfang)、中国生物医学文献数据库(CBM)}中有关活血化瘀方药或联合其他疗法治疗银屑病的随机、对照试验(RCTs)进行全面检索,检索时间截止至2017年10月。提取相关文献资料后,再由2名独立研究者根据 Cochrane 系统评价的方法,对纳入的研究进行质量评估并提取有效数据,最后运用 RevMan5.3 软件对相关数据进行meta分析。 结果 本项研究最终纳入了10个符合要求的RCT,共涉及1228名银屑病患者,meta分析的结果显示:治疗组有效率[OR=2.88,95%CI(1.85,4.48)]、PASI评分改善[OR=-1.92,95%CI(-2.38,-1.46)]均优于对照组,且不良反应少。 结论 活血化瘀方药或联合其他疗法治疗寻常型银屑病安全有效,但由于纳入研究的方法学质量普遍较低,本研究结论尚需更多高质量、多中心、大样本的随机双盲对照试验证实。
    22  高效液相色谱法测定泰痹颗粒Ⅱ号中虎杖苷、葛根素、黄芪甲苷的含量
    叶绘晟 龚志强
    2018, 29(2).
    [摘要](430) [HTML](0) [PDF 0.00 Byte](2219)
    摘要:
    目的 建立泰痹颗粒II号中虎杖苷、葛根素、黄芪甲苷的高效液相色谱测定方法。方法 虎杖苷、葛根素测定方法:色谱柱为AlltimaTM C18( 4.6 mm×150 mm,5 μm);柱温为30 ℃;流动相为乙腈-水(18∶82);流速为1 mL?min-1;检测波长为306 nm。黄芪甲苷测定方法:色谱柱为Lichrospher 5HE C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-水(35∶65);流速为:1.0 mL?min-1;蒸发光检测器:漂移管温度为80 ℃;气体流量为2.0 L?min-1。结果 虎杖苷、葛根素、黄芪甲苷分别在10.42~62.52 μg?mL-1、5.04~30.24 μg?mL-1、52.4~314.4 μg?mL-1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.81%、98.33%、98.61%;RSD分别为1.30%、1.46%、0.59%。结论 该方法灵敏、结果准确、重现性好、简便,可用于泰痹颗粒II号中3种成分的含量测定,为泰痹颗粒II号的质量评价提供参考。

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