[关键词]
[摘要]
目的观察四君子汤对IEC-6 细胞(大鼠小肠上皮细胞)增殖,多胺调控生长相关基因细胞周期检测点 激酶2(Checkpoint kinase 2,Chk2)、c-Myc 表达,以及对大鼠胃肠黏膜c-Myc 蛋白表达的影响。方法采用 SD 大鼠制备空白血清及四君子汤含药血清;无负荷细胞实验设空白对照组、腐胺组(10 μmol·L-1)及四君子汤 含药血清低、中、高(5%、10%、20%)剂量组;α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)负荷细 胞实验设空白对照组、DFMO 组(2.5 mmol·L-1)、腐胺组(10 μmol·L-1)及四君子汤含药血清低、中、高(5%、 10%、20%)剂量组;动物实验将SD 大鼠随机分为空白对照组、模型组(吲哚美辛组)及四君子汤低、高(5、 15 g·kg-1)剂量组。采用MTT 法检测IEC-6 细胞增殖情况;qPCR 法检测细胞Chk2、c-Myc mRNA 表达; Western Blot 法检测细胞Chk2、p-Chk2、c-Myc 蛋白表达和大鼠胃肠黏膜的c-Myc 蛋白表达。结果①细胞实 验:与空白对照组比较,10%、20% 四君子汤含药血清可促进给药24 h 后IEC-6 细胞的增殖(P<0.01),提高 p-Chk2 蛋白及c-Myc mRNA/蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);5%、10%、20% 四君子汤含药血清可促进给 药48、72 h 后细胞增殖(P<0.01),促进Chk2 mRNA/蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与DFMO 组比较,5%、 10%、20% 四君子汤含药血清可促进给药48 h 后细胞增殖(P<0.01),提高c-Myc mRNA/蛋白表达(P<0.05, P<0.01);10%、20% 四君子汤含药血清可促进给药72 h 后细胞增殖(P<0.01),促进Chk2 及p-Chk2 蛋白表 达(P<0.05,P<0.01);20%四君子汤含药血清可促进Chk2 mRNA 表达(P<0.05)。②动物实验:与模型组比 较,四君子汤5、15 g·kg-1 可上调模型大鼠胃黏膜及小肠黏膜c-Myc 蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论 四君子汤可促进IEC-6 细胞增殖,其作用机制可能与影响多胺信号通路,上调生长相关基因Chk2、c-Myc 表达有关。四君子汤可提高胃肠黏膜损伤模型大鼠胃及小肠黏膜c-Myc 蛋白表达水平。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
R285.5
[基金项目]
国家自然科学基金项目(81760864);贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔教合KY 字[2017]173);贵州中医药大学博士启动基金 项目(20160035)。