[关键词]
[摘要]
目的基于高内涵细胞成像系统(HCS)探讨黄芩苷(Baicalin)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺癌 A549 细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养人肺癌A549 细胞,用TGF-β1 诱导A549 细胞发生上 皮间质转化,设立空白对照组(TGF-β1 0 ng·mL-1)、TGF-β1 模型组(TGF-β1 5 ng·mL-1)和黄芩苷干预组 (TGF-β1 5 ng·mL-1 +黄芩苷5、10、20 μmol·L-1)。采用MTT 法检测黄芩苷对A549 细胞活性的影响;以 TGF-β1 诱导人肺癌A549 细胞发生上皮间质转化,并加入不同浓度黄芩苷干预,采用HCS 分析细胞肌动蛋白 应激纤维(F-actin)纹理强度、细胞面积、细胞圆度和细胞长度等形态学变化,以及细胞黏附能力和运动迁移能 力变化;RT-qPCR 法检测上皮间质转化相关标志基因Collagen I、FN1、Vimentin 和E-cadherin 的相对表达 量。结果黄芩苷干预A549 细胞48 h 后半数抑制浓度(IC50)为22.59 μmol·L-1。HCS 分析结果显示,与空白对 照组比较,TGF-β1 模型组细胞形态呈间质细胞样(纺锤形)变化,F-actin 纹理强度增强(P<0.01),细胞长度 和细胞面积增大(P<0.01),细胞圆度减小(P<0.01),黏附率降低(P<0.01),迁移率和迁移速度升高(P< 0.01);与TGF-β1 模型组比较,黄芩苷干预组细胞形态呈上皮细胞样(不规则多边形)变化,F-actin 纹理强度 减弱(P<0.05,P<0.01),细胞长度和细胞面积减小(P<0.01),细胞圆度增大(P<0.01),黏附率升高(P< 0.01),迁移率和迁移速度降低(P<0.05,P<0.01)。RT-qPCR 结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1 模型组 Collagen Ⅰ、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量升高(P<0.01),E-cadherin 的mRNA 相对表达量降低(P< 0.01);与TGF-β1 模型组比较,黄芩苷干预组Collagen I、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量降低(P< 0.05,P<0.01),E-cadherin 的mRNA 相对表达量升高(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩苷能够有效阻止 TGF-β1 诱导的人肺癌A549 细胞上皮间质转化进程,提示HCS 是一种多参数系统分析细胞上皮间质转化的有 效工具。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
R285.5
[基金项目]
山东省自然科学基金项目(ZR2020MH384);山东省中医药科技发展计划项目(2019-0040);山东中医药大学大型仪器设备功能开发 专项(2018yq17)。