[关键词]
[摘要]
目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及 相关机制。方法将分化完全的CFs 随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6 个复孔。除 空白血浆组外,其余各组以AngⅡ(10-7 mol·L-1)诱导构建细胞增殖及纤维化模型。空白血浆组及模型组以15% 空白血浆培养,益心泰含药血浆组以15%益心泰含药血浆培养,干预24 h。采用CCK-8 法检测CFs 细胞增殖 情况;ELISA 法测定细胞中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)及转化生长因子(TGF-β1)含量;流 式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western Blot 法检测细胞中TGF-β1、B 细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)及 Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)的蛋白表达水平;RT-qPCR 法检测CFs 的增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋 白(α-SMA)、CollagenⅠ/Ⅲ mRNA 表达水平。结果15%益心泰含药血浆对CFs 无明显的促细胞增殖或抑制作 用。与空白血浆组比较,模型组细胞G0/G1 期的细胞百分率明显降低(P<0.01),S 期和G2/M 期的细胞百分率 明显升高(P<0.01);细胞凋亡率有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TGF-β1 水平 均显著升高(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2 蛋白表达明显上调(P<0.01),Bax 蛋白表达明显下调(P<0.01); PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/Ⅲ mRNA 表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,益心泰含药血浆组细胞 的G0/G1 期细胞百分率明显升高(P<0.01),S 期和G2/M 期的细胞百分率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明 显升高(P<0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及TGF-β1 水平明显降低(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2 蛋白表达明显下 调(P<0.01),Bax 蛋白表达明显上调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/Ⅲ mRNA 表达水平均明显降 低(P<0.01)。结论益心泰含药血浆能够抑制CFs 细胞增殖分化及纤维化,可能与其调控Bax/Bcl-2 平衡及 下调纤维化相关因子表达有关。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
R285.5
[基金项目]
湖南省中医药科研计划项目(2020002,201516);湖南省“国内一流建设学科”中医学开放基金项目(2018ZYX44);湖南省研究生 科研创新项目(CX2018B471)。