目的从濒危药用植物青天葵（Nervilia fordii）中克隆F-box 基因，为寻找解决青天葵资源紧缺的方法提 供依据。方法从青天葵转录组中筛选得到2 个F-box 基因的核心片段，以RACE 技术获得基因的全长并克 隆其编码区；通过荧光定量PCR（qRT-PCR）进行组织表达模式分析；利用酵母双杂交实验验证F-box 蛋白的 F-box 区域与拟南芥ASK1 蛋白的互作情况。结果从青天葵中克隆到F-box 基因NfFBL3 和NfFBL4，它们的 开放阅读框（open reading frames，ORF）分别长1 974、1 833 bp，分别编码657、611 个氨基酸。二者均包含 F-box 保守功能结构域，C 端具有多个重复亮氨酸序列（Leucine rich repeats，LRRs）；NfFBL3 和NfFBL4 蛋白 均为不稳定的疏水蛋白，定位于细胞核，无信号肽及切割位点。系统进化分析表明，NfFBL3 和NfFBL4 分别 与F-box/LRR-repeat protein 3 蛋白、F-box/LRR-repeat protein 4 蛋白聚在一起。二者均在青天葵的块茎中表达 量较高。酵母双杂交实验中NfFBL3 的F-box 区域能与拟南芥ASK1 蛋白互作，而NfFBL4 不与ASK1 蛋白互 作。结论该研究从青天葵中克隆得到2 个F-box 基因，其中NfFBL3 编码的蛋白可与拟南芥ASK1 蛋白发生 互作，为进一步研究青天葵中Skp1-Cullin-F-box（SCF）复合体的功能提供科学依据。

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广东省省级乡村振兴战略（农业科技创新及推广体系建设）专项——广东省现代南药产业技术体系创新团队（粤财农[2020]100 号）。