[关键词]
[摘要]
目的探讨活血化瘀名方桃红四物汤(THSWD)减缓小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3,3T3)生长和增殖 可能的分子靶点及信号通路。方法在3T3 细胞内分别过表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、沉默bFGF 以及用PD98059 阻断细胞内ERK 上游信号通路;然后观察桃红四物汤对细胞活性,细胞周期,bFGF、ERK1/2 及p-ERK1/2 基因或蛋白表达的影响。桃红四物汤含药血清培养基浓度为20%,作用时间48 h。结果与正常 对照组比较,桃红四物汤组的3T3 细胞活性降低(P<0.01);G0/G1 期占比升高(P<0.05,P<0.01),S 期占比 降低(P<0.05,P<0.01);bFGF 和ERK1/2 基因表达降低(P<0.01);bFGF 和p-ERK1/2 蛋白表达降低(P< 0.05,P<0.01),ERK1/2 蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。与bFGF 过表达组比较,bFGF 过表达+桃 红四物汤组的3T3 细胞活性降低(P<0.05);G0/G1 期占比升高(P<0.01),S 期占比的差异无统计学意义(P> 0.05);bFGF 和ERK1/2 基因表达降低(P<0.01);bFGF 和p-ERK1/2 蛋白表达降低(P<0.01),ERK1/2 蛋白表 达的差异无统计学意义(P>0.05)。与PD98059 组比较,PD98059+桃红四物汤组的3T3 细胞活性降低(P< 0.05);G0/G1 期占比升高(P<0.01),S 期占比降低(P<0.01);ERK1/2 基因表达的差异无统计学意义(P> 0.05);ERK1/2 和p-ERK1/2 蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。由于bFGF 基因的结构独特性及沉默引 物设计的方法学缺陷,3T3 细胞内未能沉默掉bFGF。结论桃红四物汤在3T3 细胞中首先降低bFGF,进而降 低ERK 信号通路的标志性蛋白p-ERK 的表达,减缓3T3 细胞的增殖速度。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
R285.5
[基金项目]
广东省自然科学基金面上项目(2015A030313349)。