目的建立慢性应激复合阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease，AD）体外损伤模型，并探究逍遥散含药脑 脊液（XYS）及空白脑脊液（Cerebro-Spinal Fluid，CSF）对该模型的干预作用。方法以叠氮化钠（NaN3）和皮质 酮对原代海马神经元进行药物干预建立模型，通过CCK8 实验筛选干预条件，利用线粒体膜电位和神经元存活 率评价模型特征。将神经元分为正常组，复合模型组，5%、10%、20%逍遥散含药脑脊液组，5%、10%、20% 空白脑脊液组，米非司酮组，并进行相应干预。以MAP-2 荧光强度、APP 和GR 蛋白表达为指标评价逍遥散 对该模型的干预作用。结果确定模型建立方法为先以30 mmol·L-1 的叠氮化钠干预12 h，再更换为 100 μmol·L-1 的皮质酮干预24 h。该模型特征符合预期，建立的方法稳定可靠。与正常组比较，复合模型组神 经元存活率、光密度比值、GR 表达均明显降低（P < 0.01），APP 表达明显增加（P < 0.01）。与复合模型组比 较，5%空白脑脊液组和5%逍遥散含药脑脊液组APP 蛋白表达降低（P < 0.05，P < 0.01）；10%空白脑脊液组 神经元存活率增加且APP 蛋白表达降低（P < 0.05）；20%空白脑脊液组光密度比值增加（P < 0.05），神经元存 活率增加且APP 蛋白表达降低（P < 0.01）；10%、20%逍遥散含药脑脊液组和米非司酮组神经元存活率及光密 度比值均明显增加（P < 0.01），APP 蛋白表达明显降低（P < 0.01）；各用药组的GR 蛋白表达均明显增加（P < 0.01）。与相应浓度的空白脑脊液组比较，5%逍遥散含药脑脊液组APP 蛋白表达降低且GR 蛋白表达增加（P < 0.05）；10%、20%逍遥散含药脑脊液组神经元存活率增加（P < 0.05，P < 0.01），光密度比值增加（P < 0.01）， APP 蛋白表达降低（P < 0.05）且GR 蛋白表达明显增加（P < 0.01）。结论逍遥散可有效缓解慢性应激复合阿尔 茨海默病体外模型的海马神经元细胞损伤，减少APP 蛋白表达，增加GR 蛋白表达，且其药理作用具有一定的 剂量依赖性，浓度为20%的高剂量逍遥散含药脑脊液组药效较佳。

R285.5

广东省自然科学基金项目（2018A030310496）；广东省中医药局项目（20181076）。