目的探讨酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠的镇静催眠作用及机制。方法①将96 只昆明小鼠 随机分为4 组：正常组、酸枣仁组（2.25 g·kg-1）、延胡索组（1.50 g·kg-1）、酸枣仁-延胡索配伍组（简称配 伍组，3.75 g·kg-1），每组24 只；每日1 次，连续灌胃10 d，然后观察戊巴比妥钠阈下剂量（腹腔注射， 35 mg·kg-1）诱导小鼠的睡眠发生率，阈上剂量（腹腔注射，45 mg·kg-1）诱导小鼠的睡眠潜伏期、睡眠时间。 ②将60 只昆明小鼠随机分为5 组：正常组、模型组、酸枣仁组（2.25 g·kg-1）、延胡索组（1.50 g·kg-1）、配伍组 （3.75 g·kg-1），每组12 只。采用慢性夹尾刺激和对氯苯丙氨酸（PCPA，400 mg·kg-1）腹腔注射的复合因子造模 法复制肝郁型失眠小鼠模型。每日1 次，连续灌胃给药14 d。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清去甲肾上 腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）的含量，检测垂体促肾上腺皮质激素（ACTH）及下丘脑促肾上腺皮 质激素释放素（CRH）的含量；采用免疫组化法检测垂体ACTH 和海马5-HT 的蛋白表达；采用qRT-PCR 法检 测脑组织中K+-Cl-共转运体2（KCC2）、Na+，K+-2Cl-共转运体1（NKCC1）mRNA 表达水平。结果①与正常组 比较，给药组小鼠的睡眠发生率明显提高，睡眠时间显著延长（P < 0.01）；酸枣仁组及配伍组的睡眠潜伏期显 著缩短（P < 0.01）。②与正常组比较，模型组小鼠血清的NE、DA 含量明显升高（P < 0.05，P < 0.01），5-HT 含量明显降低（P < 0.01）；脑垂体ACTH 及下丘脑CRH 含量明显升高（P < 0.01）；垂体中ACTH 的表达明显上 调（P < 0.01），海马中5-HT 的表达明显下调（P < 0.01）；脑组织的KCC2 mRNA 表达明显下调（P < 0.01）， NKCC1 mRNA 表达明显上调（P < 0.01）。与模型组比较，配伍组小鼠血清的NE、DA 含量明显降低（P < 0.01），5-HT 含量明显升高（P < 0.01）；脑垂体ACTH 及下丘脑CRH 含量明显降低（P < 0.01）；脑垂体中 ACTH 的表达明显下调（P < 0.01），海马中5-HT 的表达明显上调（P < 0.01）；脑组织的KCC2 mRNA 表达明显 上调（P < 0.01），NKCC1 mRNA 表达明显下调（P < 0.05）。结论酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠具有 镇静催眠作用，可能与其调控KCC2、NKCC1 基因表达，抑制HPA 轴激活，从而调节神经递质水平有关。

R285.5

国家自然科学基金项目（81503268）；中央财政中共卫生专项“2019 年全国第四次中药资源普查项目——河北省（Z135080000022）”