[关键词]
[摘要]
目的观察无尾果不同提取部位对人风湿性关节炎成纤维滑膜细胞(MH7A)相关细胞因子分泌及凋亡的 影响,初步筛选其抗类风湿关节炎(RA)的有效部位。方法采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导MH7A 细胞建 立类风湿关节炎滑膜细胞模型,并以无尾果总提物、水部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚部位进行干 预。采用CCK8 法检测MH7A 细胞的增殖活性,并计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测MH7A 细胞凋 亡;ELISA 法检测TNF-α 诱导MH7A 细胞分泌白细胞介素(IL)-6、IL-4、IL-1β、血管内皮生长因子 (VEGF)、NF-κB 受体活化因子配体(RANKL)水平;Western Blot 法检测MH7A 细胞的凋亡相关蛋白表达水 平。结果无尾果总提物、水部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚部位对MH7A 细胞的IC50 值分别为 223.9、99.4、123.7、497.9、>1 000 μg·mL-1。与正常对照组比较,模型组细胞上清液中的IL-6、IL-1β、IL-4、 VEGF 和RANKL 含量显著升高(P<0.01),凋亡细胞显著增多(P<0.01),促调亡因子Bax、Caspase-9、 Caspase-3 和抗凋亡因子Bcl-2 的蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,无尾果总提物组、水部 位组和正丁醇部位组均可显著诱导MH7A 细胞凋亡(P<0.01);显著降低IL-6、IL-1β、VEGF 和RANKL 水平 (P<0.01),升高IL-4 水平(P<0.01);水部位组和正丁醇部位组能明显上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-9 和 Caspase-3 的表达(P<0.01),抑制抗凋亡蛋白Bcl-2 的表达(P<0.01)。结论无尾果提取物诱导MH7A 细胞 凋亡及抗炎作用可能是其抗RA 的机制之一,水部位和正丁醇部位为其主要药效部位。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
R285.5
[基金项目]
国家自然科学基金项目(81860739);江西省卫生计生委中医药科研项目(2017A286);国家重点研发计划项目(2019YFC1712300); 江西省双一流学科(中药学)建设项目(JXSYLXK-ZHYAO034)。