[关键词]
[摘要]
目的观察去氢木香内酯(Dehydrocostuslactone,Dehy)对乳腺癌SK-BR-3 细胞增殖和凋亡的影响,并 探讨其分子机制。方法体外培养乳腺癌SK-BR-3 细胞,分别加入不同浓度Dehy(5、10、20、30、40、50、 60、80、100 μmol·L-1)作用24、48、72 h,采用CCK-8 法检测细胞增殖抑制率。将SK-BR-3 细胞分为空白 对照组(0 μmol·L-1)和Dehy 10、20、30 μmol·L-1 浓度组,干预48 h 后,利用倒置显微镜观察乳腺癌SK-BR-3 细胞的形态;采用流式细胞术检测细胞周期;Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率;Hoechst 33258 荧光 染色法检测细胞凋亡的形态学变化;Western Blot 法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 和Cleaved Caspase-3 蛋白的 表达。结果Dehy 干预SK-BR-3 细胞24、48、72 h 后的IC50 值分别为24.84、19.39、11.45 μmol·L-1,且呈 现浓度和时间依赖性。与空白对照组比较,Dehy 10、20、30 μmol·L-1 浓度组的SK-BR-3 细胞数量明显减少, 细胞结构松散、轮廓消失、变圆,贴壁不良;Dehy 10、20、30 μmol·L-1 浓度组的G2/M 期细胞比例及细胞凋 亡率均显著升高(P < 0.05,P < 0.01),呈明显的浓度依赖性;Dehy 10、20、30 μmol·L-1 浓度组的SK-BR-3 细胞出现不同程度的细胞核浓染、固缩及碎裂等凋亡现象,且细胞核致密浓染的比例显著升高(P < 0.05,P < 0.01);Dehy 10、20、30 μmol·L-1 浓度组的Bax、Caspase-3 和Cleaved Caspase-3 蛋白表达显著上调(P < 0.05,P < 0.01),Bcl-2 蛋白表达明显下调(P < 0.05,P < 0.01),Bax/Bcl-2 比值明显升高(P < 0.05,P < 0.01)。结论Dehy 能够抑制乳腺癌SK-BR-3 细胞的增殖及诱导其凋亡,可能与其调控Bax/Bcl-2/Caspase-3 凋亡信号通路来抑制乳腺癌细胞的抗凋亡能力有关。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
R285.5
[基金项目]
重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ1725385,KJQN201802712,KJQN201902701,KJQN201802711);重庆市自然科学基金项目 (cstc2018jcyjAX0469);重庆三峡医药高等专科学校自然科学基金重点项目(2016xzz03)。