目的 建立美花石斛HPLC特征图谱分析方法，研究美花石斛及其水煎液指纹图谱的相关性。方法 采用Kromasil 100-5 C18色谱柱；流动相为乙腈- 0.2%磷酸溶液(梯度洗脱)；检测波长为280 nm；柱温为35 ℃；流速为0.8 mL/min。结果 16批美花石斛药材样品，标示出22个特征共有峰，相似度为0.854~0.969；10批美花石斛水煎液样品，标示出药材中的16个共有峰，相似度均在0.909以上。经对照品保留时间定位及特征峰紫外光谱分析，鉴别了2个特征峰（峰14为柚皮素、峰16为石斛酚）。每批药材与其水煎液间的相似度为0.815~0.910。结论 方法准确可靠稳定，重复性好，为美花石斛质量控制和物质基础研究提供参考依据。