目的: 应用LC-MS/MS法建立大鼠尿液中朝藿定A、B、C及淫羊藿苷的同时测定方法，初步探讨淫羊藿提取物在大鼠体内的排泄规律。方法：以人参皂苷Rg1为内标，选用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（2.1×150 mm, 5 μm）；流动相：乙腈-0.1%乙酸水(30∶70)；流速：0.3 mL?min-1；柱温：40 ℃；采用电喷雾离子源（ESI）负离子多反应检测（MRM）模式测定。结果：朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷在1~500 ng?mL-1浓度范围内线性关系良好，日内精密度（RSD）均＜7.4%，日间精密度（RSD）均＜12.7%。大鼠口服灌胃给予淫羊藿提取物36 h后朝藿定A、B、C及淫羊藿苷的平均尿累积排泄量/给药量比值不超过0.266 ‰，0.198 ‰，0.297 ‰和0.425 ‰。结论：本研究建立的LC-MS/MS方法简便灵敏快速，适用于尿液中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的同时测定及淫羊藿提取物尿排泄动力学研究的应用，研究结果显示淫羊藿提取物原形药物基本不经尿液排泄，提示肾排泄可能不是其主要消除途径。