目的 建立五生饮中3种单酯型乌头类生物碱（苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱）的含量测定方法。方法 采用YMC-Pack ODS-AM C18柱（250mm×4.6mm,5μm），柱温35℃，以乙腈一四氢呋喃(25:15)为流动相A，0.1mol/L醋酸铵溶液(每1000ml加冰醋酸0.5m1)为流动相B，梯度洗脱，流速1.0ml/min，检测波长235nm，进样量：10μl。结果 苯甲酰新乌头原碱在146.96～1469.60ng范围内线性关系良好，r=0.9999，平均回收率为99.05%（RSD为1.87%）；苯甲酰乌头原碱在16.78～167.80ng范围内线性关系良好，r=0.9998，平均回收率为99.42%（RSD为1.94%）；苯甲酰次乌头原碱在20.30～203.00ng范围内线性关系良好，r=0.9999，平均回收率为100.15%（RSD为1.53%）。结论 所建立的方法操作简单，稳定性好，准确度高，重复性好，可用于五生饮水煎剂的质量控制方法。