Abstract:

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基于中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）探讨白及对溃疡性结肠炎（UC）大鼠肠黏膜屏障的修复作用及 机制。方法 将 48 只 SD 大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组（0.3 g·kg-1 ）及白及低、中、高剂量 组（0.3、0.6、1.2 g·kg-1 ），每组 8 只。采用 2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）-乙醇灌肠法复制 UC 大鼠模型，造模 成功后按照设定剂量灌胃给药，每日 1 次，连续灌胃给药 21 d。在给药干预的第 1、11、21 天进行疾病活动指 数（DAI）评分；采用 HE 染色法观察大鼠结肠组织病理变化；ELISA 法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子 α（TNF-α） 和白细胞介素 1β（IL-1β）含量；Western Blot 法及免疫组化法检测大鼠结肠组织中 NETs 相关蛋白髓过氧化物酶 （MPO）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、血管内皮生长因子（VEGF）以及紧密连接（TJs）相关蛋白封闭蛋白 2 （CLDN2）、闭锁小带蛋白 1（ZO-1）的表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠 DAI 明显升高（P＜0.05）； 结肠组织黏膜层出现大面积变性坏死且肠腺结构消失，大量炎性细胞浸润，累及黏膜下层、肌层和浆膜层，病 理评分明显升高（P＜0.05）；血清 TNF-α、IL-1β 水平明显升高（P＜0.05）；结肠组织中 MPO、NE、VEGF、 CLDN2 蛋白表达明显升高（P＜0.05），ZO-1 蛋白表达明显降低（P＜0.05）。与模型组比较，各给药组大鼠的 DAI 均明显降低（P＜0.05）；柳氮磺胺吡啶组和白及中、高剂量组大鼠结肠肠腺结构完整清晰，黏膜未见明显 变性及坏死，可见少量炎性细胞浸润，病理评分明显降低（P＜0.05）；血清 TNF-α、IL-1β 水平明显降低（P＜ 0.05）；结肠组织中 MPO、NE、VEGF、CLDN2 蛋白表达明显降低（P＜0.05），ZO-1 表达明显升高（P＜0.05）。 结论 白及可能通过调控 NETs 激活及 TJs 相关蛋白表达，降低血清炎症因子水平，从而修复肠道黏膜屏障， 发挥治疗 UC 的作用。

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探讨杜仲汤对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响及机制。方法 将42 只雌性SD 大鼠随机分为假手 术组、模型组、阳性药组（戊酸雌二醇，0.09 mg·kg-1）、谷胱甘肽组（36 mg·kg-1）以及杜仲汤低、中、高剂量组 （0.54、1.08、2.16 g·kg-1）。去卵巢模型大鼠复制成功后，按照设定剂量灌胃给药，灌胃体积为10 mL·kg-1，每 日1 次，连续给药200 d。采用生化试剂盒检测大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）含量；ELISA 法检测大 鼠血清中抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）、骨保护素（OPG）含量；骨密度仪检测大鼠股骨骨密度；HE 染色法观 察大鼠胫骨组织病理变化；Western Blot 法检测骨组织中骨形态发生蛋白2（BMP-2）、OPG、一型胶原（COL1） 蛋白表达水平；RT-PCR 法检测骨组织中BMP-2、Runt 相关转录因子2（RUNX2）mRNA 表达水平。结果 与 假手术组比较，模型组大鼠体质量增长值显著升高（P＜0.01）；血清GSH、OPG 的水平显著降低（P＜0.05，P＜ 0.01），TRACP 水平显著升高（P＜0.01）；骨密度明显降低（P＜0.05）；骨小梁结构不完整，出现明显断裂，小 梁数稀疏且明显变薄；骨组织中BMP-2、OPG、COL1 蛋白表达水平均显著下降（P＜0.01），BMP-2、RUNX2 mRNA 表达水平明显降低（P＜0.05）。与模型组比较，杜仲汤低、中、高剂量组大鼠体质量增长值均显著降低（P＜ 0.05，P＜0.01），血清GSH 水平显著升高（P＜0.01），骨小梁结构明显改善，骨小梁变粗，数量增加，骨组织 中BMP-2、RUNX2 mRNA 表达水平均显著升高（P＜0.01）；杜仲汤中剂量组大鼠的血清OPG 水平显著升高（P＜ 0.01）；杜仲汤低剂量组大鼠的血清TRACP 水平显著降低（P＜0.01），骨组织中COL1 蛋白表达水平明显升高 （P＜0.05）；杜仲汤低、中剂量组大鼠的骨密度显著升高（P＜0.01），骨组织中OPG 蛋白表达水平明显升高（P＜ 0.01）；杜仲汤中、高剂量组大鼠骨组织中BMP-2 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。结论 杜仲汤能提高去 卵巢大鼠的骨密度，保护骨小梁完整性，对去卵巢大鼠骨质疏松症有一定防治作用，其机制可能与提高血清 GSH、OPG 水平，降低TRACP 水平，上调BMP-2、OPG、COL1 蛋白以及BMP-2、RUNX2 mRNA 表达，从 而促进骨形成有关。

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探讨安胃汤（半夏、黄连、干姜、乌药、百合等）含药血清对胃黏膜肠上皮化生（Gastric intestinal metaplasia，GIM）模型细胞自噬及凋亡的影响。方法 采用鹅去氧胆酸（CDCA）诱导人胃黏膜上皮细 胞GES-1，制备GIM 细胞模型。实验分为正常组（正常胃黏膜上皮细胞GES-1 常规培养）、模型组（经CDCA 复制成GIM 模型后常规培养）、空白对照组（GIM 模型细胞以等量空白血清培养）、安胃汤组（GIM 模型细胞＋ 7% 安胃汤含药血清），各组细胞干预24 h 后检测。采用流式细胞术（Annexin V-PE/7-AAD 双染法）检测细胞凋 亡；免疫荧光双标法检测肠上皮化生相关蛋白SOX2、CDX2 的表达情况；透射电镜观察细胞超微结构及自噬 情况；qRT-PCR 法检测细胞LC3、Bax mRNA 表达情况；Western Blot 法检测细胞MUC2、KLF4、LC3、Bax 蛋 白表达情况。结果 与正常组比较，模型组细胞的MUC2、KLF4 蛋白表达显著上调（P＜0.01），细胞的凋亡率 明显降低（P＜0.05）；SOX2 荧光强度明显降低（P＜0.05），CDX2 荧光强度显著增高（P＜0.01）；细胞结构紊乱， 细胞核萎缩畸形，内质网和线粒体等细胞器肿胀破裂及空泡化严重，自噬小体及自噬溶酶体明显增多；Bax mRNA 及蛋白表达明显下调（P＜0.05），LC3 mRNA 表达显著上调（P＜0.01），LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值显著 升高（P＜0.01）。与空白对照组比较，安胃汤组细胞的凋亡率显著增高（P＜0.01）；SOX2 荧光强度显著增高 （P＜0.01），CDX2 荧光强度明显降低（P＜0.05）；细胞结构较完整，镜下可见自噬小体和自噬溶酶体略有减少； Bax mRNA 及蛋白表达显著上调（P＜0.01），LC3 mRNA 表达显著下调（P＜0.01），LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值显 著降低（P＜0.01）。结论 安胃汤可能通过调节GIM 模型细胞自噬，并促进其凋亡，从而改善胃黏膜上皮细胞 的肠上皮化生情况。

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探讨毛蕊异黄酮对氧糖剥夺再灌注BV2 小胶质细胞极化的影响。方法 将对数生长期BV2 细胞 随机分为6 组：正常组、模型组、尼莫地平组（5 μg·mL-1）、毛蕊异黄酮高剂量组（20 μg·mL-1）、毛蕊异黄酮中 剂量组（10 μg·mL-1）、毛蕊异黄酮低剂量组（5 μg·mL-1）。氧糖剥夺3 h 后，各给药组换成含药的完全培养基， 复氧6 h。采用CCK-8 法检测细胞活力；测定细胞上清液中的一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白 细胞介素1β（IL-1β）、IL-10 含量；免疫荧光双染法检测BV2 细胞极化；Western Blot 法检测BV2 细胞的 iNOS、CD206 蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组的BV2 细胞活力显著降低（P＜0.01），NO、 TNF-α、IL-1β 水平明显升高（P＜0.05），IL-10 水平明显降低（P＜0.05）；免疫荧光双染检测中M1 型小胶质细 胞标记物iNOS 表达显著增强（P＜0.01）；Western Blot 检测中iNOS 蛋白表达明显上调（P＜0.05），M2 型细胞标 志物CD206 蛋白表达明显下调（P＜0.05）。与模型组比较，毛蕊异黄酮低、中、高剂量组及尼莫地平组的BV2 细胞活力显著提高（P＜0.01），NO、TNF-α、IL-1β 水平明显降低（P＜0.05），IL-10 水平明显升高（P＜0.05）； 免疫荧光双染检测中毛蕊异黄酮（10 μg·mL-1）组BV2 细胞的iNOS 表达显著减弱（P＜0.01）；Western Blot 检测 中毛蕊异黄酮（10 μg·mL-1）组BV2 细胞的iNOS 蛋白表达明显下调（P＜0.05），CD206 蛋白表达明显上调（P＜ 0.05）。结论 毛蕊异黄酮能促进活化的BV2 小胶质细胞向M2 型极化，抑制其向M1 型极化，减少炎性介质 的产生，降低氧化损伤，对缺血后脑组织损伤具有保护作用。

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探讨刺梨果多糖对肺腺癌A549 细胞增殖、凋亡的作用及机制。方法 在0、2、4、6、8、 10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞24、48、72 h 后，采用CCK-8 法检测A549 细胞增殖情况。在0、2、6、 10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞24、48 h 后，采用细胞划痕实验测定A549 细胞的迁移情况；Transwell 实 验测定A549 细胞侵袭情况。在0、2、6、10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞48 h 后，采用流式细胞术（PI 单 染法）测定A549 细胞周期；流式细胞术（Annexin V-FITC/PI 双染法）测定A549 细胞的凋亡情况；Real-Time PCR 法测定A549 细胞的周期、凋亡相关基因表达水平；Western Blot 法测定A549 细胞的周期、凋亡相关蛋白 表达水平。结果 （1）干预24、48、72 h 后，与对照组（0 g·L-1）比较，刺梨果多糖2、4、6、8、10 g·L-1 组的 A549 细胞生长受到显著抑制，细胞的存活率显著降低（P＜0.05，P＜0.01），刺梨果多糖干预48 h 的IC50 值为 6.109 g·L-1，后续实验采用2、6、10 g·L-1 浓度作为刺梨果多糖低、中、高剂量。（2）干预48 h 后，与对照组比 较，刺梨果多糖2、6、10 g·L-1 组的A549 细胞迁移距离显著增加（P＜0.05，P＜0.01），细胞侵袭数量显著减少 （P＜0.05，P＜0.01）；刺梨果多糖6、10 g·L-1 组的G0/G1 期、G2/M 期细胞比例均显著升高（P＜0.05，P＜0.01）， S 期的细胞比例显著降低（P＜0.01）；刺梨果多糖2、6、10 g·L-1组A549 细胞的G0/G1、G2/M 期相关调控因子 CDK-4、CDK-6、CyclinD1、CDK-1、CyclinB1 mRNA 及蛋白表达水平均显著下调（P＜0.05，P＜0.01）；A549 细胞的凋亡率均显著升高（P＜0.01）；凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA 表达显著上调 （P＜0.05，P＜0.01）；促凋亡Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 蛋白表达显著上调（P＜0.05，P＜0.01）， 抗凋亡Bcl-2 蛋白表达显著下调（P＜0.05，P＜0.01）。结论 刺梨果多糖能够抑制A549 细胞的增殖、迁移和 侵袭，阻滞细胞周期于G0/G1 和G2/M 期，并通过线粒体通路和死亡受体通路诱导A549 细胞凋亡。

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探讨复方鱼腥草提取物（牛蒡子及鱼腥草的挥发油、水提物、醇提物的混合物）对2 型糖尿病大 鼠肾脏组织中Sirt1/PGC-1α 通路的影响。方法 将SD 大鼠随机分为正常组、模型组、罗格列酮组（0.3 mg·kg-1）、 白藜芦醇组（0.12 g·kg-1）及复方鱼腥草提取物组（4.5 g·kg-1），每组10 只。采用高糖高脂饲料喂养4 周联合小剂 量腹腔注射1% 链脲佐菌素（STZ，30 mg·kg-1）复制2 型糖尿病大鼠模型。检测各组大鼠24 h 尿蛋白、24 h 尿 白蛋白、尿肌酐以及血清肌酐水平，计算肌酐清除率、肾脏指数。采用HE 染色法观察肾脏组织病理形态学变 化；免疫组化法检测肾脏组织中Sirt1 表达水平；Western Blot 法检测大鼠肾皮质中Sirt1、PGC-1α 蛋白表达水 平。结果 与正常组比较，给药4、8 周后，模型组大鼠的24 h 尿蛋白及尿白蛋白水平、肌酐清除率、肾脏指 数均明显升高（P＜0.05）；肾小球体积明显增大，可见肾间质伴有炎性细胞浸润，系膜区可见明显扩张；免疫 组化显示肾脏组织中的Sirt1 表达显著下调（P＜0.01）；肾皮质中Sirt1、PGC-1α 蛋白表达均明显下调（P＜0.05）。 与模型组比较，复方鱼腥草提取物组大鼠的24 h 尿蛋白及尿白蛋白水平、肌酐清除率、肾脏指数均明显降低 （P＜0.05）；肾小球增大、系膜增生与基质聚积均有明显改善；免疫组化显示肾脏组织中的Sirt1 表达显著上调 （P＜0.01）；肾皮质中Sirt1、PGC-1α 蛋白表达均明显上调（P＜0.05，P＜0.01）。结论 复方鱼腥草提取物对 2 型糖尿病大鼠的早期肾脏损伤具有保护作用，其机制可能与上调肾皮质中Sirt1/PGC-1α 通路有关。

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对两种经PEG 修饰载体材料（PELGE、PLGA）制备的克班宁（Crebanine，Cre）长循环纳米粒 （PELGE-Cre-NPs、PLGA-Cre-NPs）进行急性毒性试验与抗心律失常作用研究，探讨其增效减毒的效果。 方法 采用Bliss 法对PELGE-Cre-NPs 与PLGA-Cre-NPs 进行小鼠急性毒性试验，求半数致死量（LD50）；采用 氯仿诱发小鼠心室纤颤模型、氯化钡（BaCl2）及乌头碱致心律失常大鼠模型对两种纳米粒进行药效作用考察。 结果 PLGA-Cre-NPs 与PELGE-Cre-NPs 静脉注射的LD50 分别为13.619 mg·kg-1 与14.839 mg·kg-1，均比克班 宁静脉注射的LD50 （9.382 mg·kg-1）明显增加。与模型对照组比较，两种纳米粒均能明显对抗氯仿诱发的小鼠心 室纤颤、对抗氯化钡诱导的大鼠心律失常，明显提高乌头碱诱发大鼠室性早搏（VPB）、室性心动过速（VT）、 心室纤颤（VF）及心脏停搏（CA）的阈剂量（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）。与克班宁 （5 mg·kg-1）实验组比较， PELGE-Cre-NPs 高剂量（5 mg·kg-1）组恢复窦性心律维持时间≥5 min 的鼠数量明显增多（P＜0.05），心脏停搏乌 头碱阈剂量明显提高（P＜0.05）。结论 两种材料纳米粒PLGA-Cre-NPs 与PELGE-Cre-NPs 的毒性较克班宁 小，并具有较明显的抗心律失常活性，且作用效果强于游离克班宁，达到增效减毒作用。

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探讨芍药苷调节Ras 同源基因家族蛋白A（RhoA）/Rho 相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（ROCK）信号通 路对实验性自身免疫性葡萄膜炎（experimental autoimmune uveitis，EAU）小鼠辅助性T 淋巴细胞17（Th17）/调节 性T 细胞（Treg）免疫平衡的影响。方法 随机选出10 只小鼠作为正常对照组，其余小鼠构建EAU 模型，将造 模成功小鼠随机平分为模型组、芍药苷组（10 mg·kg-1 芍药苷）、RhoA/ROCK 信号通路激活剂溶血磷 脂酸（LPA）组（25 μmol·L-1 LPA）、芍药苷+LPA 组（10 mg·kg-1 芍药苷+25 μmol·L-1 LPA），每组10 只。模型组 和正常对照组给予等量生理盐水，给药每天1 次，持续14 d。眼前节临床表现评分评估炎症严重程度；HE 染 色观察眼球组织病理形态；ELISA 法检测血清中炎性因子转化生长因子-β（trarsforming growth factor beta，TGF-β）、 白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素17（IL-17）、白细胞介素23（IL-23）水平；流式细胞术检测脾脏Th17/Treg 细 胞水平；Western Blot 法检测维甲酸相关核孤儿受体γt（RORγt）、叉头状转录因子3（Foxp3）以及RhoA/ROCK 信号通路蛋白表达。结果 正常对照组小鼠无虹膜、结膜血管舒张充血，与正常对照组比，模型组小鼠出现虹 膜血管舒张充血，前房、虹膜、睫状体和视网膜内均有大量炎性细胞膨胀，眼前节临床表现评分、IL-17 和 IL-23 含量、Th17 细胞水平、Th17/Treg、RORγt、RhoA、ROCK1 蛋白水平明显升高（P＜0.05），IL-10 和 TGF-β 含量、Treg 细胞水平、Foxp3 水平明显下降（P＜0.05）。与模型组比，芍药苷组小鼠虹膜血管充血症状 明显缓解，眼前节临床表现评分、IL-17 和IL-23 含量、Th17 细胞水平、Th17/Treg、RORγt、RhoA、ROCK1 蛋白水平明显降低（P＜0.05），IL-10 和TGF-β 含量、Treg 细胞水平、Foxp3 水平明显升高（P＜0.05）；而LPA 加重了眼部损伤（P＜0.05），逆转了芍药苷对EAU 小鼠的改善效果（P＜0.05）。结论 芍药苷可通过下调RhoA/ ROCK 信号通路调节EAU 小鼠Th17/Treg 免疫平衡减轻EAU 小鼠葡萄膜炎。

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基于国家知识产权局专利数据库，分析外用中药复方专利治疗糖尿病足溃疡（diabetic foot ulcer， DFU）的用药规律及作用机制，并通过实验验证相关结果。方法 根据纳入和排除标准检索数据库中治疗DFU 的外用中药复方专利，去重后构建DFU 外用中药复方专利集，对其进行频数、性味归经、关联规则及聚类分 析，筛选治疗DFU 的外用核心中药数据集；进一步建立疾病-核心中药-活性成分-共有靶点网络模型，通过共 有靶点建立蛋白-蛋白互作网络（protein-protein interaction networks，PPI），利用Metascape 平台进行基因本体 （gene ontology，GO）富集分析与京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG） 通路分析；借助分子对接及动力学模拟评估潜在关键靶标与活性成分之间的结合能力与稳定性；并基于CCK-8 法评估关键活性成分对细胞增殖的影响，利用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）验证活性 成分对PI3K 及Akt 信号通路的调控作用。结果 共收集专利98 项，包含中药281 味。其中，寒性中药应用次 数最多，归肝经中药应用最多，清热类中药应用最多。通过数据挖掘获得频数前3 位的核心中药为当归、黄柏 和红花，进一步筛选得出核心中药包含活性成分85 种，其对应疾病靶点889 个；与DFU 靶点取交集后得到 166 个共有靶点，通过PPI 网络拓扑分析，确定了包括肿瘤坏死因子α（TNF-α）、过氧化物酶体增殖物激活受 体γ（PPARγ）等8 个核心靶点。GO 和KEGG 通路富集分析证实，核心中药的活性成分主要作用于炎症反应及 细胞凋亡等相关靶点，通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）等信号通路治疗DFU。分子对接和 动力学模拟表明关键靶点与其对应的核心成分之间具有良好的结合能力及稳定性。实验研究表明，关键活性成 分豆甾醇具有较高的生物安全性，其可明显上调PI3K 及Akt 的转录水平。结论 通过多维数据挖掘分析证实 治疗DFU 的外用复方大多具有清热解毒、活血化瘀特性，其关键活性成分豆甾醇、二氢尼洛替星主要作用于 PPARγ 及TNF-α 等DFU 靶点；豆甾醇可明显上调PI3K 及Akt 信号通路发挥治疗DFU 的效果。

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探讨中风醒脑液（Zhongfeng Xingnao Liquid）对脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）后神经系统 及免疫系统的影响。方法 从中医药系统药理数据库和分析平台（Traditional Chinese Medicine Database and Analysis Platform，TCMSP）获取中风醒脑液有效活性成分；并通过TCMSP、SwissTargetPrediction 数据库获取有 效活性成分作用靶点；通过药物靶标在线数据库（Therapeutic Target Database，TTD）、人类在线孟德尔遗传数 据库（Online Mendelian Inheritance in Man，OMIM）、DisGeNET、GeneCards 和Drugbank 数据库筛选脑出血相关 靶点；通过京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）筛选神经系统和免疫 系统相关靶点；运用STRING 平台分别对“中风醒脑液-脑出血-免疫系统”，“中风醒脑液-脑出血-神经系统” 交集靶点进行蛋白互作分析和筛选信号通路，运用MCC 法筛选中风醒脑液影响脑出血后神经系统和免疫系统 的核心靶点；利用Cytoscape 3.9.0 软件构建“药物-成分-核心靶点-通路”网络，计算网络度值（Degree），筛 选出中风醒脑液关键活性成分，运用Autodock Vina 软件对活性成分与核心靶点进行分子对接。利用胶原酶Ⅶ 型诱导大鼠脑出血疾病模型进行实验验证。结果 预测得出中风醒脑液主要活性成分31 种；中风醒脑液对脑 出血后神经系统潜在作用靶点33 个，对免疫系统潜在作用靶点68 个；槲皮素、洋川芎醌和β-谷甾醇等是 中风醒脑液影响脑出血后神经系统和免疫系统的主要活性成分，预测得出肿瘤蛋白P53（TP53）、丝裂原活化蛋 白激酶1（MAPK1）、胱天蛋白酶3（CASP3）等是中风醒脑液影响脑出血后神经系统的核心靶点，肿瘤坏死因子 （TNF）、白细胞介素6（IL-6）、基质金属蛋白酶9（MMP9）等是中风醒脑液影响脑出血后免疫系统的核心靶点； 分子对接结果显示MMP9、信号转导及转录激活蛋白3（STAT3）和白细胞介素1β（IL-1β）等蛋白受体与槲皮 素，洋川芎醌，β-谷甾醇及人参皂苷Rh2 等主要活性成分具有较好的亲和力。动物实验验证结果表明，中风 醒脑液高剂量组能改善脑出血大鼠神经缺损症状及血肿周边组织病理结构，有效减少脑出血后CASP3、IL-1β、 IL-6、TNF、PRKCA、PRKCD、RELA、TP53和MAPK1 mRNA的相对表达，上调NFKBIA、AKT1 mRNA 的相对表 达（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）。结论 中风醒脑液可能通过调控TNF、IL-6、TP53、MAPK1 及CASP3 等 表达来影响脑出血后神经系统和免疫系统，发挥治疗作用。

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运用回顾性分析与网络药理学方法，探索中医治疗普通登革热的辨证论治规律。方法 以2014— 2020 年于广州中医药大学第一附属医院住院治疗的普通登革热患者为研究对象，通过聚类分析和因子分析挖 掘普通登革热的证型和方药；并对研究对象进行二次辨证与计数；再利用网络药理学探索中药的潜在作用机 制。结果 普通登革热有3 个证型，按频数由高到低排序为：“风热夹湿，邪在卫气”证、“湿热伤络，邪侵营 血”证、“肺脾气虚，余邪未尽”证。共挖掘出3 首新方，登革1 号方可疏风清热、兼以祛湿；登革2 号方功 善清热解毒、疏风祛湿；登革3 号方擅长清热祛湿、凉血止血；3 首新方均可能含有槲皮素、木犀草素，可能 作用于TNF、IL6、AKT1，可能通过蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性的正调节、糖尿病并发症中的AGE-RAGE 信号通路等发挥治疗作用。结论 该研究挖掘了普通登革热的3 个证型与3 首中药新方，并认为3 首新方可能 有病毒抑制作用，且可能与炎症、免疫、凋亡调节等相关，但又各有差异。

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研究近20 年公开发表的雷公藤制剂建立卵巢功能障碍动物模型的相关文献，为未来应用雷公藤 制剂建立有关卵巢功能障碍动物模型标准化提供数据参考。方法 在中国生物医学文献数据库、维普期刊中文 服务平台、万方数据知识服务平台、中国知网及Springer、Embase、Web of Science、Cochrane Library、PubMed 数据库进行检索，获取2000—2023 年公开发表的与雷公藤制剂建立卵巢功能障碍动物模型主题相关的文献， 经人工仔细阅读筛选，运用Excel 2021 软件将模型类别、实验动物种类、初始年龄、正式实验前动物的筛选标 准、给药剂量、给药周期、成模标准及检测指标等数据录入并建立数据库进行统计分析。结果 共纳入278 篇 文献，其中中文文献270 篇、英文文献8 篇。纳入文献中应用雷公藤制剂建立的卵巢损伤模型较多的分别是： 卵巢早衰（POF；96 次，34.53%）、卵巢储备功能低下（DOR；80 次，28.78%）、早发性卵巢功能不全（POI； 27 次，9.71%）等；实验动物多选用Sprague Dawley（SD）大鼠（205 次，73.74%）、Wistar 大鼠（22 次，7.91%）， 昆明小鼠（21 次，7.55%）；多数实验开始前对实验动物行阴道脱落细胞检测动物的动情周期；造模药物多数采 用雷公藤多苷，给药剂量常见50 mg·kg-1（121 次，43.53%）、75 mg·kg-1（47 次，16.91%）、40 mg·kg-1（41 次， 14.75%）；模型成功多以动情周期紊乱为标准；涉及的检测指标频次最高的是血清性激素（229 次，25.87%）。 结论 现有的雷公藤制剂建立卵巢损伤动物模型，多选用7～12 周龄且动情周期规律的成熟雌性SD 大鼠。模 型评价指标建议综合动情周期、血清性激素、卵巢和子宫脏器指数、卵巢组织病理等结果。但目前仍缺乏对不 同造模方式的比较以及造模所用具体参数的确立，有待进一步探究。

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研究参苓白术散的化学成分及大鼠灌胃给药参苓白术散后大鼠血浆中的化学成分。方法 采用超 高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术，通过Peak View 1.2 和Chem Draw 软件，根 据保留时间、相对分子质量及二级离子碎片，结合对照品及文献数据，对参苓白术散的化学成分及入血成分进 行鉴别。结果 从参苓白术散中鉴定出104 个化学成分，主要为黄酮类和有机酸类成分；在灌胃后大鼠血浆中 鉴定出27 个入血成分，包括11 个原型成分和16 个代谢产物，主要的代谢途径为Ⅱ相代谢途径。结论 该研 究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS 技术快速分析了参苓白术散的化学成分及入血成分，可为阐明参苓白术散的药效 物质基础及其作用机制提供参考。

Abstract:

通过对白桦脂醇不同位点的修饰及进一步抗氧化活性分析，探讨白桦脂醇各修饰位点与抗氧化活 性间的关系。方法 以白桦脂醇为起始物，以四氢呋喃（THF）或二甲基甲酰胺（DMF）作溶剂，控制反应温度及 酸酐当量，进行酰化、羟基保护、氯铬酸吡啶鎓盐（PCC）氧化、脱保护基等反应合成7 个目标化合物，即 3，28-二乙酰基白桦脂醇、3，28-二烯丙酰基白桦脂醇、28-乙酰基白桦脂醇、28-烯丙酰基白桦脂醇、3-乙酰 基白桦脂醇、3-烯丙酰基白桦脂醇和3-羰基白桦脂醇。采用1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法测定目标化 合物的体外抗氧化活性。结果 白桦脂醇衍生物的结构通过核磁共振（NMR）图谱、高分辨液质联用（HRLC-MS） 综合解释得以验证。DPPH 法测试结果显示，白桦脂醇、3-乙酰基或烯丙酰基白桦脂醇及28-乙酰基或烯丙酰 基白桦脂醇对DPPH 均有一定的清除作用，且呈浓度依赖性，28-乙酰基或烯丙酰基白桦脂醇对DPPH 的清除 效果优于白桦脂醇及3-乙酰基或烯丙酰基白桦脂醇。在相同条件下，3-羰基白桦脂醇与3，28-双酰基（乙酰基 或烯丙酰基）取代白桦脂醇无明显清除DPPH 的作用。此外，烯丙酰基修饰的白桦脂醇体外抗氧化活性优于对 应的乙酰基修饰的白桦脂醇。结论 建立了简单易行的白桦脂醇酰化及羟基官能团保护方法。28-烯丙酰基白 桦脂醇表现出更优良的体外抗氧化活性，提示白桦脂醇28-位引入吸电子作用基团可能提高其抗氧化作用。

Abstract:

建立龙泽熊胆胶囊中水防风掺伪的检测方法。方法 以水防风区别于防风的专属性成分 Xanthalin 建立薄层色谱鉴别法（TLC），对样品进行初筛。若供试品溶液色谱中出现水防风特征斑点，则采用 高效液相色谱（HPLC）进行定性检查。色谱条件： SHIMADZU InertSustain® C18 色谱柱（250 mm × 4.6 mm， 5 μm）；以乙腈-水（58∶42）为流动相，等度洗脱；流速：1.0 mL·min-1；柱温：30 ℃；检测波长：324 nm；进 样量：10 μL。若供试品Xanthalin 色谱峰面积大于对照品的峰面积，视为阳性检出，必要时可进一步采用超高 效液相色谱串联三重四级杆质谱法（UPLC-MS/MS）进一步确证。结果 建立的TLC 法、HPLC 法简便、快速， 专属性、重复性、耐用性均符合《中国药典》要求。对市售107 批龙泽熊胆胶囊样品进行检测，19 批次样品 检出Xanthalin，提示该制剂存在水防风掺伪投料生产的风险。结论 该方法可实现水防风掺伪防风的定性鉴 别，有助于完善该品种的质量控制。

Abstract:

建立清肝润肺止咳露高效液相色谱（HPLC）特征图谱，测定其中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁 的含量，并结合化学模式识别方法，综合评价该制剂的质量。方法 采用HPLC 法，以甲醇- 5 μmoL·L-1 庚烷 硫酸钠溶液（用磷酸调节pH 至2.6）为流动相进行梯度洗脱，流速：1.0 mL·min-1，柱温：20 ℃，检测波长： 220 nm，进样量：10 μL。利用指纹图谱相似度评价软件，结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）和偏最小二 乘法判别分析（PLS-DA）对10 批清肝润肺止咳露的特征图谱进行评价。结果 10 批清肝润肺止咳露特征图谱 共确定16 个共有峰，指认了5 个共有峰，分别为吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁。其中4 个成分在 线性范围内（吗啡0.70~8.70 μg、可待因0.68~8.50 μg、罂粟碱0.60~7.55 μg、那可丁0.38~4.80 μg）均有良好的 线性关系（r≥0.999 7）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD 均小于3.0%；平均加样回收率在97.93%~99.43% 之间（RSD＜3.1%）；含量测定结果：吗啡43.58~76.47 μg·mL-1，可待因16.64~78.92 μg·mL-1，罂粟碱29.93~ 41.22 μg·mL-1，那可丁14.44~33.22 μg·mL-1。通过CA、PCA 和PLS-DA 分析，可将10 批清肝润肺止咳露分 为2 类（S3、S4、S8、S10 聚为一类，其余聚为一类），并筛选出峰2、峰4、峰13、峰11（吗啡）、峰1、峰 10、峰8、峰12、峰16（那可丁）9 个差异性成分。结论 该研究建立的HPLC 特征图谱及含量测定方法简单、 准确，结合化学模式识别法，可用于清肝润肺止咳露的质量控制。

Abstract:

探讨口腔洁含漱液对脾胃伏火型复发性口腔溃疡患者口腔菌群、血清炎症因子和T 细胞亚群水 平的影响。方法 选取2022 年4 月至2023 年3 月成都中医药大学附属医院口腔科和四川大学华西口腔医院口 腔黏膜科收治的脾胃伏火型复发性口腔溃疡患者64 例为研究对象，按照随机数字表法分为试验组（32 例）和对 照组（32 例），对照组患者给予醋酸曲安奈德乳膏治疗，试验组在对照组基础上联合口腔洁含漱液含漱、吞 服，每日3 次，持续治疗7 d。观察两组患者临床疗效，评价两组治疗前后，以及治疗后组间的中医证候积 分、疼痛指数、疼痛持续时间和溃疡愈合时间；实时荧光定量PCR 法分析口腔菌群（链球菌、韦荣氏菌、奈瑟 氏菌）DNA 浓度；ELISA 法检测血清炎症因子［肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-8］含量；流 式细胞术测定血清T 细胞亚群水平［T 淋巴细胞（CD3+）、辅助性T 淋巴细胞（CD4+）、CD4+/细胞毒性T 淋巴细胞 （CD8+）］。同时记录治疗期间不良反应，比较6 个月后复发情况。结果 试验组临床疗效、疼痛抑制效果和溃 疡愈合速率均优于对照组（P＜0.05）；两组患者治疗后口腔内链球菌和韦荣氏菌DNA 浓度明显高于治疗前，且 试验组高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；两组患者治疗后血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8 含量 相较治疗前降低，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+相较治疗前升高，且试验组改善程度优于对照组，差异均有统计学 意义（P＜0.05）。试验组复发率显著低于对照组（P＜0.05）。结论 口腔洁含漱液治疗脾胃伏火型复发性口腔溃 疡患者，可显著提高临床疗效，改善口腔菌群构成，抑制血清炎性反应水平，提高细胞免疫功能，降低复发 率，值得临床推广应用。

Abstract:

生姜为姜科植物姜的新鲜根茎，属于药食两用品，作为中药首次收载于《神农本草经》，而汉·张仲景 《金匮要略》最早记载了生姜在中医临床中的应用。干姜、炮姜分别是生姜经干燥加工和砂烫后的炮制品，三 者在临床上被广泛使用，但在药物属性和作用特点上却有所不同。基于不同历史时期的不同医家对三者的性效 和应用的记载并不完全一致，该文从古籍本草考证、现代化学成分和药理作用等方面对生姜、干姜、炮姜（三 姜）进行了总结，以系统地综述三姜的性效源流及现代研究进展，明确其临床应用范畴，为三姜性效的深入研 究提供参考，亦为中医临床合理用药提供个性化参考。